Содержание к диссертации
Стр.
ВВЕДЕНИЕ 4
ГЛАВА 1. Обзор литературы
1.1. Сущность метода фото динамической терапии (Ф ДТ) 9
1.2 Основные фотрсенсибилизаторы, применяемые при проведении 13
ФДТ
Механизмы повреждения при фото динамической терапии 17
Преимущества и недостатки ФДТ 23
1.5. Место электрохимического лизиса (ЭХ Л) в лечении 24
злокачественных новообразований
1.6. Химико-физические принципы электрохимического лизиса 25
1.7. Преимущества и недостатки метода ЭХЛ 30
ГЛАВА 2. Материалы и методы
Характеристика объекта исследования 32
Характеристика фотосенсибилизатора 33
2.3. Методика изучения накопления фотосенсибилизатора в
тканях 34
Методика проведения ЭХЛ опухолей и объем выполненных исследований 36
Методика проведения ФДТ опухолей и объем выполненных исследований 39
Методика проведения сочетанной терапии опухолей и объем выполненных исследований 42
Методы морфологического исследования 43
Статистическая обработка результатов исследований 43
ГЛАВА 3. Результаты исследований
3.1. Результаты исследования эффективности ЭХЛ 44
3.2. Результаты изучения накопления фотосенсибилизатора в 53
опухоли методом спектрометрии
Результаты исследования эффективности сочетанной терапии опухолей 56
Результаты исследований мягких тканей бедра животных в зоне проведенного исследования
Внешние изменения опухолевой ткани после процедуры ЭХЛ 61
Результаты морфологического исследования 62
ГЛАВА 4. Заключение и обсуждение результатов 70
ВЫВОДЫ 78
ПРАКТИЧЕСКИЕ РЕКОМЕНДАЦИИ 79
СПИСОК ЦИТИРУЕМОЙ ЛИТЕРАТУРЫ
Отечественной 80
Зарубежной 89
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
ФДТ - фотодинамическая терапия
ЭХЛ - электрохимический лизис
ФС - фотосенсибилизатор
ОЕ - относительные единицы
ПР — полная регрессия опухоли
К - коэффициент абсолютного прироста опухолей
АД - артериальное давление
ССС - сердечно-сосудистая система
ИК - индекс контрастности
СЯЛ - сегментоядерные лейкоциты
ФД - флюоресцентная диагностика
АФК - активные формы кислорода
Введение к работе
Актуальность темы исследования. Одной из задач
современной медицины является поиск способов повышения эффективности лечения злокачественных новообразований для максимального поражения опухоли при минимальном повреждении здоровых тканей. В последние годы проявляется повышенный интерес к экспериментально-клиническому изучению и совершенствованию фотодинамической терапии (ФДТ) злокачественных опухолей [159]. Метод ФДТ основан на применении фотосенсибилизаторов (ФС), обладающих свойствами избирательно накапливаться в ткани злокачественных опухолей, и под воздействием света или лазерного излучения соответствующего диапазона, в присутствии кислорода, вызывать фотохимические реакции с развитием флюоресценции и избирательного разрушения опухолевых клеток с последующей гибелью опухолевой ткани. Главное преимущество этого метода - избирательное повреждение опухолевых тканей при максимальном сохранении окружающих здоровых [23,37,56,106,121]. Разработанные в последние годы ФС достаточно быстро выводятся из организма, не оказывая каких-либо серьезных побочных эффектов [29,32,46,80,95]. Более того, при фотодинамической терапии местные реакции (в виде геморрагического некроза, воспалительных явлений) носят временный характер, завершаясь полной эпителизацией дефекта тканей, не дают впоследствии каких-либо поздних осложнений. Однако ограничением применения существующего метода ФДТ является, по данным различных авторов, относительно небольшая глубина проникновения лазерного излучения. Тем не менее, ФДТ хорошо зарекомендовала себя при лечении злокачественных опухолей мягких тканей различных локализаций - злокачественных заболеваний кожи, внутрикожных метастазов меланомы, саркомы Капоши, опухолей языка, рака слизистых оболочек полости рта, нижней губы, рака трахеи, крупных бронхов, рака плевры, мезотелиомы, раке молочной железы и других
локализаций [99,104,116,117]. Поскольку возможности ФДТ еще не исчерпаны, во всем мире ведется активная работа по ее совершенствованию.
Однако, несмотря на успехи в развитии данного метода, часто после лечения возникают рецидивы. Поэтому актуальным является сочетание ФДТ с другими известными методами лечения опухолей (лучевая терапия, химиотерапия, хирургия и др.) [26,76]. Одним из таких, но еще мало изученных, методов является электрохимический лизис (ЭХЛ). Он относится к области минимально инвазивных технологий. ЭХЛ новообразований включает в себя воздействие электрического тока, а также воздействие продуктов электрохимических реакций и транспортировок, которые происходят при взаимодействии электрических и магнитных полей с электрохимической системой тела. Опухолевая ткань является более восприимчивой к электрохимическим воздействиям, чем здоровая [5,90,136,144].
В настоящем исследовании была изучена возможность сочетания электрохимического лизиса (ЭХЛ) и фото динамической терапии (ФДТ) для повышения эффективности деструкции саркомы М-1 у крыс при использовании оптимальных параметров обоих методов.
Цель исследования
Разработка метода сочетанной фотодинамической терапии и электрохимического лизиса на экспериментальной модели опухоли -саркоме М-1.
Задачи исследования
Изучить эффективность лечения саркомы М-1 методом электрохимического лизиса.
Отработать оптимальные параметры электрохимического лизиса (положение электродов, сила тока, время воздействия).
Исследовать различные схемы сочетания электрохимического лизиса и фото динамической терапии для достижения максимального повреждения опухолевой ткани.
Провести анализ морфологических изменений в опухолевой и здоровой тканях после самостоятельного применения электрохимического лизиса и сочетанной терапии.
Научная новизна.
В работе впервые дана экспериментальная оценка эффективности сочетанного применения фотодинамической терапии и электрохимического лизиса при лечении крыс с саркомой М-1. Показано, что совместное применение этих методов при определенных параметрах и последовательности проведения позволяет значительно повысить эффективность терапии. Проведены морфологические исследования тканей при использовании электрохимического лизиса и сочетанной терапии для верификации необратимости изменений.
Научно-практическая значимость работы.
Полученные данные служат научным обоснованием совместного применения в клинических условиях фотодинамической терапии и электрохимического лизиса при лечении злокачественных опухолей мягких тканей, позволяя повысить эффективность лечения.
Положения, выносимые на защиту.
Разработан метод сочетанной фотодинамической терапии и электрохимического лизиса опухоли саркомы М-1 у крыс.
Сочетанное применение фотодинамической терапии и электрохимического лизиса позволяет повысить эффективность
лечения по сравнению с самостоятельным применением этих методов.
В эксперименте установлена оптимальная схема такой сочетанной терапии, позволяющая получить до 97% полной регрессии опухолей у крыс: внутрибрюшинное введение фотосенсибилизатора «Фотолон» в дозе 2,5 мг/кг веса животного, проведение электрохимического лизиса через 1 час после введения ФС (при параметрах: горизонтальное введение электродов, сила тока 20 мА, время процедуры 10 минут) и последующее облучение при плотности энергии лазерного излучения 300 Дж/см2.
Результаты представленных морфологических исследований показывают, что повреждающее действие ЭХЛ реализуется не только посредством деструкции паренхимы опухоли, но и ее сосудистой сети. Использование сочетанного воздействия электрохимического лизиса и фотодинамической терапии способствует более полному и стойкому уничтожению опухоли, приводящему к образованию фиброзного рубца на месте ее локализации.
Публикации материалов исследования
Основные положения диссертации изложены в 5-ти печатных работах: 2 статьях и тезисах 3 докладов.
Структура и объем работы
Диссертация состоит из введения, обзора литературы, материалов и методов, главы результатов исследований, обсуждения и заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы, включающего 171 источника (из них 97 иностранных). Работа изложена на 100 страницах.
Связь с планом научных работ ГУ-МРНЦ РАМН
Работа выполнена на базе ГУ-МРНЦ РАМН в рамках запланированных тем: «Методологические аспекты фотодинамической терапии в эксперименте и клинике», № гос. регистрации 01.20.03 - 03640 и «Разработка методов интерстициальнои лазерной и электрохимической терапии злокачественных опухолей в эксперименте и клинике», № гос. регистрации 0120.0 602181.
