Введение к работе
Актуальность работы.
В настоящее время достигнут значительный прогресс в понимании інєтичєских основ канцерогенеза ( Киселев Ф.Л. и др., 1990; Сейц И.Ф., нязев П.Г., 1986). Разработаны генетические диагностические тесты для экоторых опухолей и уже есть первые протоколы генной терапии, дентифицировано большое количество онкогенов, активация которых взывает злокачественную трансформацию клеток. Ведутся активные зиски антионкогенов, потеря функции которых также приводит к )ансформации.
Важнейшим методом поиска антионкогенов и выяснения их эвлеченности в том или ином заболевании является аллелотипирование, эзволяющее установить делеции различных участков хромосом. С эмощью этого метода были выявлены делеции генов в некоторых юмосомах, в частности, на коротком плече 11-й хромосомы. Так, потери терозиготности в локусе 11р15.5 часто встречаются в опухолях легкого яичника, в то время как литературные данные по раку молочной железы эсьма противоречивы. При исследовании генетической природы опухоли /ільмса у детей было показано, что в развитии этого заболевания играют эль делеции как антионкогена WT1, расположенного в локусе 11р13 и эдавно клонированного (Call К.М. et .al., 1990), так и антионкогена, годящегося в локусе 11 р15.5 (последний до сих пор не клонирован), толне вероятно участие этих двух антионкогенов в генезе опухолей у іросльїх.
Известно что, поломки некоторых антионкогенов могут сочетаться с дологической активацией онкогенов, оказывая влияние на течение іухолевого процесса (Bonsing R.A. et al., 1993; Knyazev P.G. et al., 1993). этом плане представляются интересными исследования амплификации жогена INT-2, так как он располагается также на 11-й хромосоме (локус Iq13). В лаборатории молекулярной генетики НИИ онкологии им. Н.Петрова накоплен опыт работы по поиску амплификации онкогена Т-2 в некоторых опухолях у человека. Было сделано предположение, что
это событие является маркером пролиферативнои активности в опухоли молочной железы (Черница О.И. и др., 1996), проводились также попытк рассмотреть это явление в свете теории аллельного имбаланса, хотя пок безуспешные. Разногласия в литературе по поводу корреляци амплификации онкогена INT-2 с клинико- патологическими показателям опухолевого процесса до сих пор не разрешены.
Цель и задачи исследования. Целью работы является: молекулярно- генетическг характеристика делеций генов короткого плеча 11 -й хромосомы опухолях молочной железы, легкого и яичника, а также изучение і сочетания с амплификацией онкогена INT-2 и установление і возможного клинического значения.
В связи с этим были поставлены следующие задачи:
1. Выявить частоту и структуру делеций на коротком пле1
хромосомы 11 в опухолях молочной железы, легкого и яичника.
-
Выявить частоту амплификации локуса 11q13 в данных опухоля;
-
Оценить комбинаторику генных повреждений в опухолях.
4. Изучить клинико- патологическое значение выявленнь
молекулярно- генетических аномалий.
Научная новизна и практическая значимость полученнь результатов.
В ходе выполнения диссертационного исследования впервь показано:
- делеций локусов региона 11 р13 встречаются довольно часто п[ немелкоклеточном раке легкого (локус D11S324- 36%, локус D11S32 25%) и с несколько меньшей частотой при раке яичника (D11S32 27%, D11S323- 19%) и молочной железы (D11S324- 24%, D11S32 15%).
делеции локусов региона 11р13 являются маркерами іетастатического потенциала опухоли (р<0.02 для рака молочной елезы) и её агрессивности (р<0.01 для рака яичника).
делеции локусов региона 11 р13- событие гГозднее, т.к. имеет ильную тенденцию к корреляции со стадией заболевания (р<0.1 для поскоклеточного рака легкого и рака молочной железы).
делеции региона 11р15.5 не встречаются при аденокарциноме эгкого.
нет взаимосвязи между делециями локусов 11р13 и 11р15.5.
нет взаимосвязи между делециями локусов 11р и амплификацией экуса 11q13.
Диссертационная работа имеет научно- теоретический характер, э практическая ценность заключается в следующем.
Впервые выявлены клинико- патологические корреляции делеции жусов D11S323 и D11S324, которые непосредственно фланкируют тгионкоген WT1, с метастатическим потенциалом опухолей и их рессивностью в опухолях у человека, что позволит в будущем ізработать новые методы диагностики прогноза онкологических іболеваний.
Апробация работы.
Основные положения диссертации были представлены на: 3 еждународной Конференции "СПИД, рак и связанные с ними юблемы" Санкт- Петербург, Россия 22- 26 Мая, 1995; - 3-rd ternational Conference "AIDS, Cancer and Related Problems". May 22-26, I95, Saint- Petersburg, Russia, №10.2.; "Первом Мировом Конгрессе по эстижениям в Онкологии" 22- 26 октября, 1995, Афины, Греция- 1st orld Congress on Advances in Oncology, Oral & Posters.- 1995.- N"298.
Структура и объём диссертации. Диссертация изложена на 104 раницах машинописного текста и состоит из введения, обзора тературы, глав материалов и методов, результатов исследований,
обсуждения полученных данных и выводов. Работа иллюстрирована ' таблицами и 6 рисунками. Библиографический указатель включает 22 публикации на русском и английском языках.
