Введение к работе
Актуальность исследования.
Ежегодно в мире регистрируется два-три миллиона новых случаев туберкулеза. В России в 2003 году заболеваемость туберкулезом составила 83,2 человека на 100000 жителей смертность 21 человек на 100000. По данным ВОЗ за время жизни больной активным туберкулезом легких инфицирует 20 человек.
Длительное время туберкулез может протекать бессимптомно. Поэтому своевременная диагностика туберкулеза крайне актуальна. Основным критерием лабораторной диагностики туберкулеза остается выявление возбудителя - Mycobacterium tuberculosis в диагностическом материале.
Традиционные микробиологические методы выявления возбудителя не всегда позволяют подтвердить диагноз туберкулеза. Методы люминесцентной бактериоскопии и посева обладают низкой чувствительностью и обнаруживают M.tuberculosis только у 50-60% больных активным туберкулезом легких, в связи с этим внедрение методов быстрого и специфичного выявления M.tuberculosis чрезвычайно актуально [Хоменко А.Г. 1995; Оттен Т.Ф., 1997; Владимирский М.А., 1997; Стаханов ВА., 2000]. Поэтому широкое распространение получили методы диагностики инфекционных заболеваний на основе выявления специфической ДНК или РНК возбудителя методом полимеразной цепной реакции. Применению РСЫдля M.tuberculosis посвящены публикации в зарубежной и в отечественной печати, показана строгая специфичность этого метода исследования [Gyllensten U.B. et al., 1988; Abu Al-Soud W. et al., 1998; Boddinghaus B. et al, 1990; Ehlers S. et al, 1994; Вишневский Б.И., 1998; Бочкарев Е.Г., 2000]. Однако, в последнее время в некоторых работах отмечаются трудности, связанные с применением этой технологии в практических лабораториях. При лабораторной диагностике туберкулеза легких не всегда представляется возможным получить материал непосредственно из очага поражения. Отмечено, что ингибирование реакции, вызываемое компонентами различных диагностических образцов, значительно снижает её чувствительность, нередко обуславливая ложноотрицательные результаты [Wilson I.G., 1997; Honore-Bouakline S. et al., 2003].
-2-Целью настоящего исследования явилась оценка эффективности
метода полимеразной цепной реакции для диагностики туберкулеза легких при
использовании различного диагностического материала и определение места
PCR в комплексе диагностических лабораторных исследований.
Научная новизна.
Наибольшая диагностическая значимость результатов PCR по сравнению с
бактериоскопией и посевом выявлена для больных с ограниченными
туберкулезными поражениями, такими как туберкулез внугригрудных
лимфатических узлов, инфилыративный и очаговый туберкулез легких.
Впервые показана диагностическая ценность PCR при выявлении М. tuberculosis
из крови у больных туберкулезом легких.
Основные положения, выносимые на защиту.
Информативность метода PCR для диагностики туберкулеза зависит от формы
и распространенности туберкулезного процесса в легких, от способа
предварительной обработки диагностических образцов и полноты вьщеления
Результаты PCR могут служить лабораторным критерием для оценки
эффективности проводимой терапии у больных туберкулезом легких с
отрицательными результатами бактериоскопии и культурального посева.
Диагностическая ценность результатов PCR для больных туберкулезом легких
увеличивается при исследовании помимо мокроты, в качестве
диагностического материала крови, мочи, плевральных экссудатов и биоптатов
различных тканей, а также при предварительном культивировании мокроты.
Апробация научных результатов. Основные положения диссертации
доложены на 3 съезде научно-медицинской ассоциации фтизиатров
(Екатеринбург, 1997), на II, III и IV Всероссийских конференциях
"Полимеразная цепная реакция в диагностике и контроле лечения
инфекционных заболеваний", (Москва, 1998, 2000, 2002), на IV и VII
Всероссийском конгрессе 'Человек и лекарство" (Москва, 1997, 2002), на
симпозиуме «Иммунодиагностика и иммунореабилитация при лепре,
туберкулезе и других хронических заболеваниях» (Астрахань, 1998), на 9
Национальном конгрессе по болезням органов дыхания (Москва, 1999), на
-3-
Национальном конгрессе «Клинической иммунологии,
аллергологии и иммунореабилитации» (Алмааты, 1999), на научно-практической конференции молодых ученых «Актуальные вопросы туберкулеза и других гранулематозных заболеваний» (Москва, 2001), на заседаниях секции микробиологии и иммунологии туберкулеза Московского отделения Всероссийского научно-практического общества эпидемиологов, микробиологов и паразитологов (Москва, 2002,2003).
Работа апробирована на совместном заседании отдела микробиологии и иммунологии ГУ ЦНИИТ РАМН (30.06.2004 г.)
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа изложена на 145 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, 4 глав собственных исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и списка литературы. Работа иллюстрирована 35 таблицами и 12 рисунками. Список цитируемой литературы содержит 200 источников, из них 29 отечественных и 171 зарубежных. Публикации. По теме диссертации опубликовано 19 печатных работ
