Введение к работе
Актуальность проблемы. Наряду с лучевой терапией и хирургическим вмешательством химиотерапия является одним из основных методов лечения злокачественных новообразований [Переводчикова Н.И., 2005]. Известно, что применение противоопухолевых средств в высоких дозах приводит к адекватному ответу на терапию, увеличению вероятности наступления ремиссии и, как следствие, повышению эффективности проводимого лечения. В то же время, цитостатические препараты помимо опухолевых клеток поражают здоровые ткани организма. Наиболее распространены гематологическая, гастроинтестинальная и гепатотоксичность химиотерапевтических средств [Богуш Т.А. и др., 2000; Гершанович М.Л., 2004; Птушкин В.В., 2004]. Побочное действие большинства цитостатиков ограничивает их применение и служит показанием к снижению дозы лекарства, прерыванию и даже прекращению лечения.
В настоящее время в клинической практике используются достаточно эффективные препараты, предназначенные для снижения токсических проявлений химиотерапии, однако большинство из них обладают рядом недостатков. В частности, применяемый для коррекции гематологических нарушений Г-КСФ, может способствовать прогрессированию роста опухоли путем стимуляции в ней ангиогенеза [Okazaki T. et al., 2006]. Показано, что этот препарат может провоцировать рост рака яичников [Ninci E.B. et al., 2000], поскольку, как оказалось, рецепторы для него часто экспрессируются в клетках данного вида опухоли. Установлено, что Г-КСФ в ряде случаев индуцирует иммуносупрессию и ослабление регуляции иммунного ответа Т-хелперами как in vivo, так и in vitro [Ohta Y. et al., 2004]. Кроме того, у препарата выявлены местные реакции на введение - костно-мышечные боли и аллергические реакции. Стоит отметить, что стоимость рекомбинантных гемоцитокинов достаточно высока, что ограничивает их применение [Kanbayashi Y. et al., 2006]. Перечень гепатопротекторов используемых в клинике невелик, на сегодняшний день наиболее часто применяются гептрал и препараты, содержащие эссенциальные фосфолипиды [Оковитый С.В., 2002; Ларионова В.Б., 2004]. Коррекция гастроинтестинальной токсичности довольно сложна. Для получения оптимальных результатов требуется согласованность мер по профилактике и лечению основных желудочно-кишечных осложнений в комплексе. Преимущественно с этой целью применяются средства лишь для снижения симптоматики диспептического синдрома: тошноты, рвоты, диареи, задержки стула и стоматитов [Гершанович М.Л., 1999; Орлова Р.В., 2001; Птушкин В.В., 2005], однако не существует препаратов, которые бы патогенетически воздействовали на пораженный в результате химиотерапии эпителий желудочно-кишечного тракта. Следует подчеркнуть, что средства, предназначенные для использования в схемах лечения онкологических больных, не должны стимулировать развитие опухолевого процесса и препятствовать лечебному действию цитостатиков.
Паклитаксел (митотакс, Д-р Реддис Лабораторис Лтд, Индия) вводили мышам с карциномой легких Льюис внутрибрюшинно однократно в дозе 20 мг/кг на 10 сут после трансплантации, либо в дозе 32 мг/кг на 14 сут после перевивки; мышам с меланомой В-16 - в дозе 32 мг/кг на 12 сут развития опухоли. Циклофосфан (ОАО «Биохимик», г. Саранск) крысы с карциносаркомой Уокер-256 получали однократно в дозе 50 мг/кг внутрибрюшинно на 16 сут развития опухоли; мыши с солидным раком легкого-67 - однократно внутрибрюшинно в дозе 125 мг/кг на 10 сут после перевивки. 5-фторурацил («Дарница», г. Киев) вводили мышам внутрибрюшинно однократно в дозе 110 мг/кг на 10 сут после перевивки карциномы легких Льюис. Гранулоцитарный колониестимулирующий фактор - нейпоген (филграстим, Ф. Хоффманн-Ля Рош Лтд., Швейцария) вводили подкожно мышам с карциномой легких Льюис в дозе 30 мкг/кг через 24 ч после инъекции паклитаксела ежедневно в течение 5 сут. Гепатопротектор эссенциале Н (А. Наттерманн & Сие. ГмбХ, Германия) крысы получали ежедневно per os в дозе 100 мг/кг через 24 ч после введения циклофосфана в течение 6 сут.
Водорастворимые полисахариды получали из фармакопейного сырья фракционным методом [Методы химии углеводов…, 1980]. Полученные образцы полисахаридов были стандартизованы по содержанию углеводов спектрофотометрическим методом [Dubois M. et al.,1956], содержанию белка по методу Брэдфорда [Bradford M.M., 1976] и нуклеиновых кислот [Спирин А.С., 1958]. Выделенные ВРПС, сведения об их количественном содержании в растительном сырье и качественном составе предоставлены кафедрой химии ГОУ ВПО «Сибирский государственный медицинский университет Федерального агентства по здравоохранению и социальному развитию» (г. Томск). Сухие ВРПС растворяли физиологическим раствором либо дистиллированной водой из ампул заводской фасовки. ВРПС растений вводили внутрибрюшинно с 7 сут после перевивки опухолей: мышам с карциномой легких Льюис в дозах 10 или 20 мг/кг в течение 11-12 сут; с меланомой В-16 и солидным раком легкого-67 - в дозе 20 мг/кг в течение 9 сут. Крысам с карциносаркомой Уокер-256 ВРПС вводили внутрижелудочно в дозе 50 мг/кг с 6 сут развития опухоли в течение 15 сут.
Показатели периферической крови мышей (концентрация гемоглобина, показатель гематокрита, количество эритроцитов, тромбоцитов, общее число лейкоцитов) определяли на гематологическом анализаторе «Abacus» (Diatron, Austria). Подсчет лейкоцитарной формулы в периферической крови и миелограмм костного мозга производили стандартными гематологическими методами [Гольдберг Е.Д. и др., 1992]. Для гистологического исследования кусочек тонкой кишки фиксировали в жидкости Карнуа. Депарафинированные срезы толщиной 5 мкм окрашивали гематоксилин – эозином по Караци. На продольных срезах подсчитывали среднее количество эпителиальных клеток в криптах (не менее чем в 10). В этих же криптах подсчитывали количество митозов и вычисляли митотический индекс как процент клеток в митозе от общего количества просмотренных клеток. Количество клеток на ворсинках подсчитывали от основания до вершины, выбирая 10 ворсинок на каждом препарате [Зуфаров К.А. и др. 1974]. В сыворотке крови крыс определяли активность АлАт, АсАт и ЩФ на полуавтоматическом биохимическом анализаторе фирмы «Cormay» c помощью наборов фирм «Вектор-Бест» и «Cormay» [Камышников В.С., 2003]. Для оценки функциональной активности клеток лимфатических узлов использовали тест нейтрализации опухолевых клеток Винна [Гольдберг Е.Д. и др., 2008]. По окончании экспериментов животных умерщвляли, соблюдая "Правила проведения работ с использованием экспериментальных животных", проводили вскрытие, ревизию внутренних органов, выделение опухоли и метастазов. При этом оценивали возможность повышения противоопухолевого и антиметастатического действия цитостатиков с помощью ВРПС. Для этого вычисляли процент торможения роста опухоли - ТРО [Софьина З.П. и др., 1980], частоту метастазирования опухолей вычисляли в процентах (по отношению числа животных с метастазами к общему количеству животных в группе). Подсчитывали среднее количество метастазов у одного животного в группе, определяли диаметр метастазов, высчитывали их среднюю площадь [Dingemane K.P. et al., 1985]. Величину различия в метастазировании опухоли между контролем и опытом оценивали по индексу ингибирования метастазирования [Архипов С.А., Юнкер В.М., Грунтенко Е.В., 1984].
Для определения достоверности различий полученных данных в группах применяли непараметрические критерии Вилкоксона-Манна-Уитни и углового преобразования Фишера. Различия считали достоверными при Р0,05 [Лакин Г.Ф.,1980].
![Флюоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия опухолей органа зрения с применением фотосенсибилизатора хлоринового ряда [Электронный ресурс]](/i/i/4602/185091.png "Флюоресцентная диагностика и фотодинамическая терапия опухолей органа зрения с применением фотосенсибилизатора хлоринового ряда [Электронный ресурс] Крупнов Роман Николаевич")
