Введение к работе
Актуальность проблемы. Несмотря на значительные успехи,достигнутые s последние годы в реаниматологии, тяжелый гпповолеми-ческпй шок среди причин, приводящих к гибели людей при массовых катастрофах, занимает ведущее место / Б.Н.Семенов, 1992, I.:. Klain и др - , 198» /. Частая безуспешность реанимационных мероприятий связана с отсутствием целостной научно обоснованной системы профилактики и терапии терминального процесса v постреанима-цнонкой болезни. Это обусловлено все еще недостаточны/, пониманием молекулярных механизмов гипоксического повреждения органов при смертелы.ой кровспотере и после реанимации.
Ло данным ряда авторов / К.R.Champion и др . , 1976, R.A. Cowley и др .,1982, G. Schlag с соавт.,1991 и др./,частой причиной гибели Сольных, перенесших критические состояния, ЯБ -ляется печеночная недостаточность, ііри зі см основні:.: фактором развития патологии печен:: выступает нарушение метаболизма, что приводит к накоплению токсических продуктов , интенсификации деструктивных процессов, затрагивают^ как цитсплазматическнй, так и ядерный аппарат гепатсцпта.
Участие нуклеиновых кислот з поддержании структуры и пункции клеток, тесная связь этих бкомвкгсмолекул с ^ункцнснальнь:...
I.3erezesky ,I^sJ /. имеются убедительнее доказательства того, что массивное поступление ионов кальция в цитозоль клетки вызывает активацию липоли.за , протеолиза, а также дисагрегациз ксішонєнтов цитоскелета /S.Orrenius et al. , I9cd, B.K.Siesjo,
Исследования печени при терминальных состояниях затрагивают , в основном, иитоплазматические структуры гепатоцита / Т.Е. Казуева , I9d5, В.Д.Конвай ,1936, Ы.Б.Биленко ,19о9, СЕ.Никулина, 1969, Г.С.Левин ,1991, В.Р.Тгішр и др., 1962, L.V.blolchano-va и др., 1991 / и в меньше?, степени - ядерны:"; аппарат клетки / к.ш.Т'ырткаников , 19Ь6, H.U.Lazarus,A.Hopfenbeck,1976, 1979 /. Мевду тем известно , что деструкция ДНК хроматина является определяющим фактором сохранения жизнеспособности клетки. Однако, механизмь; деградации нуклеиновых кислот е печени при смертельной кровопотере совершенно не изучена. До настоящего времени в патогенезе исемического повреждения печени при терминальных состояниях не определена роль ключевых q-ерментов обмена нуклеиновых кислот - Ca^t^o"-зависимых эндонуклеаз. Последнее представляется особенно важным для раскрытия механизмов повреждения структуры и функции этого органа при массивной кровопотере и в постреанимационных состояниях.
Ь связи с участием ионов кальция в механизмах регуляции ак-тизности Са ',:>'.+-зависимих эндонуклеаз в клетке было важным определить роль кальциевых блокаторов в динамике активности этих ферментов при. гиповолемическо.м шоке и после реанимации. Это позволит не только исследовать некоторые механизмы, связанные с нарушением опосинтетических функций клеток печени, но и разработать пути эффективней защиты гепатоцита от повреждающего действия терминального ;. пс.стреснимапнонного процессов.
-
Исследовать зависимость между длительностью гиповолеми-ческой гипотензии и активностью Са +, Ыа +-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени.
-
Выявить динамику активности Са +, Up ^-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени в постреанимационный период.
-
Выяснить общие закономерности и различия в изменении активности Са +, Мо +-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени и коры головного мозга при умирании на фоне длительной гипо-волемической гипотензии и в постреанимационный период.
-
Оценить влияние блокатора кальциевых каналов верапамила на уровень активности Са +, \Ад +-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени в процессе гиповолемического шока и после реанимации.
Научная новизна работы. Настоящими исследованиями впервые обнаружено, что Са^4*, Мд "^-зависимый эндонуклеолиз з ядрах ге-патоцитов является Еакным патогенетическим механизмом ишемичес-кого повреждения печени при тяжелом гиповолемическом шоке. Показано, что массивная кровопотеря вызывает активацию Са'"+, Независимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени, прогрессирующую по мере удлинения периода артериальной гипотензии. Установлено также, что в постреанимационном периоде (1-3 мес.) активность Сас+, \hq "''-зависимых эндонуклеаз не имеет тенденции к сникенка. Обнаружены общие закономерности в изменении активности исследуемых ферментов в клеточных ядрах печени и коры головного мезга собак при длительной гиповэлемнческой гипотензии и е псстреанн-мационный период.
Получены новые данные, свидетельствующие об ингибиру:ощем елиякии верапамила, введенного внутривенно как за 30 минут до массивной кровопотери, так и в реанимационном комплексе, на процессы Са"+, !.'. q ^-зависимого эндокуклеолиза в клеточных ядрах печени собак.
Теоретическая и практическая значимость работы. Полученные данные вносят существенный вклад в изучение молекулярных механизмов повреждения клеток печени при длительно.1.: гиповолемичес-кем шоке и з поствеаккма'ционный период. Выявлены и поэанализи-
рованы закономерности активации Са +, Мд +-зависимых эндонуклеаз клеточных ядер печени и коры мозга в терминальный период и после реанимации. Установлена возможность коррекции процессов эндонук-леолиза в клеточных ядрах печени блокатором кальциевых каналов верапамилом в дозе 0.1 и 1.0 мг/кг. Полученные в работе данные о молекулярных механизмах нарушений биосинтетических процессов в умирающей клетке и защитной роли кальциевых блокаторов позволяют наметить новые подходы для коррекции гипоксических повреждений в организме при смертельной кровопотере и профилактики осложнений постреанимационной болезни.
Основные положения, выносимые на защиту:
-
Массивная кровопотеря вызывает активацию Са +, IAq +~ зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени, прогрессирующую по мере удлинения периода гиповолемической гипотензии.
-
Процесс Са , Мо +-зависимого эндонуклеолиза в клеточных ядрах гепатоцитов сохраняет высокую активность и в постреанимационном периоде после длительной артериальной гипотензии.
-
Существуют общие закономерности в изменении активности Са +, М^ +-завискмых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени и коры головного мозга собак при длительной гиповолемической гипотензии и в постреанимационный период.
-
Предварительное введение верапамила до массивной крово-потери, также как к включение^его в реанимационный комплекс.вызывает снижение активности Са'""1", \'^. +-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени.
Апробация работы. Результаты исследований доложены на итоговой научной конференции Института общей реаниматология Ш\ СССР (г. Москва, 1990), научной конференции молодых ученых Института общей реаниматологии АМН СССР (г. Москва, 1991), международном конгрессе патофизиологов (г. і.'осква, 19Э1), Всеармейской научной конференции "Актуальные вопросы совершенствования диагностики и лечения пострадавших в районах массовых бедствий" (г. Ленинград, 1991), 2-ой Всесоюзной конференции "Фармакологическая коррекция гипоксических состояний" (г. Гродно, 1992)., конференции "Профилактика и экспериментальная тера-
-o-
пия экстремальных и терминальных состояний" (г. Омск, 1992) конгрессе анестезиологов-реаниматологов Украины (Запорожье, 1992).
Апробация работы состоялась 30 января 1992 г. на межлабораторной научной конференции Института общей реаниматологии РАМН.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 10 научных работ.
Структура и объем работы. Материалы диссертации изложены на 133 страницах машинописного текста, содержат 9 таблиц, II рисунков, 5 фотографий. Работа состоит из введения, обзора литературы, изложения методов и результатов исследований, обсуждения, выводов и списка литературы, включающего 123 отечественных и 123 иностранных источника.
Похожие диссертации на Изменение активности Са2+, Mg2-зависимых эндонуклеаз в клеточных ядрах печени собак при длительной гиповолемической гипотензии и в постреанимационный перод (экспериментальное исследование)
