Введение к работе
В последнее десятилетие стало формироваться представление о целостной автономной многокомпонентной системе, обеспечиваю- ' щей гомеостаз кальция в организме. Центральным регуляторным-органом этой системы являются околощитовидные железы.
Большинство авторов придерживается того мнения, что эффекты кальцийрёгулирующих гормонов на многие интегративные процессы, и в первую очередь, на иммунные механизмы, опосредуются исключительно через кальциевый механизм. Имеется обширная литература о роли Са в иммунных процессах. Показана его важная роль в активации комплемента (Hadden, 1979), нейтрофилов (Hume,Gordon,1983; Naccache,1983; Ochs, 1983; Sheram, e.a., 1983), в инициации Т-лимфоцитарных реакций (Gearing,e.a., 1985), в митогенной активации лимфоцитов (Blitstein, Diamans-tein, 1978; Desaymard,e.a.,1980), в синтезе иммуноглобулинов (Brawn,1970; Bolis,1971), дифференцировке клеток (Green,e.a., 1976),в распознавании по типу "рецептор - лиганд" (Lichtman, 1983), и так далее. Вместе с тем имеются, единичные сведения, согласно которым функции кальций-регулирующих гормонов, и в частности паратиреоидного гормона и кальцитонина, далеко не всегда реализуются через кальциевые механизмы. Их следует рассматривать не только в качестве медиаторов, оказывающих сугубо разрешающее действие на отдельные органы-мишени, а в более широком плане - в качестве секреторно-активных веществ общебиологического спектра действия. С этой точки зрения наиболее актуальным является изучение взаимосвязи между кальцийрегулирующи-ми гормонами и иммунной системой. Имеется ряд данных, указывающих на наличие тесных рсципрокных взаимоотношений между центральным органом иммуногенеза - тимусом и околощитовидными железами (Perris,e.a.,1967; 1970; Perry,e.a., 1984). Изучение взаимодействия гормонального комплекса, обеспечивающего гомеостаз кальция, с иммунной системой, является необходимым для
понимания многих сторон процесса реализации тех или иных иммунных функций. К сожалению, проведенные в этой области исследования носят фрагментарный характери не позволяют получить достаточного представления об уровне взаимодействия иммунной ситсмы и системы, обеспечивающей кальциевый гомеостаз. Имеющиеся в литературе сведения по этому вопросу немногочисленны и затрагивают лишь отдельные звенья сложной многогранной системы клеточного и гуморального иммунитета. Так, известно, что па-ратгормон стимулирует, а кальцитонин тормозит митотическое деление незрелых лимфоидных клеток в тимусе (Whitfield, с.а., 1970; Potts, Deffos, 1974). Выявлены высокоаффинные рецепторы к пара-тиреоиднэму гормону на различных субпопуляциях лимфоцитов (Perry, е.а., 1984; Bialasievich, е.а., 1979; Yamamoto, с.а., 19S3). Имеются отдельные сведения, косвенно свидетельствующие в пользу модулирующей роли медиаторов тимуса на секреторные процессы в околещитовидной и щитовидной железах. Из тимуса удалось выделить фактор, обладающий способностью, снижать подобно хальцитонину уровень кальция в крови (Potop, 1966; Milcu, е.а., 1973). Ксмелевой с сотрудниками (Ксмелева,184) было показано, что удхтение тимуса приводит к стойкому резкому повышению уровня паратиреоидно! ) гормона в крови. Наличие функциональной связи в известной мере подтверждается и единым эмбриональным происхождением околощитовидных желез и тимуса: показано, что они оба развиваются из одной и той же группы клеток третьего жаберного кармана (Gilmor, 1937; Aria, е.а., 1983).
Таким образом, литературные данные свидетельствуют о важной роли кальцийрегулирующих гормонов в реализации реакций клеточного н гуморального иммунитета, однако судить о конкретных механизмах взаиморегуляции и зависимости между околощи-товидгшми железами и органами иммуногенеза на сегодняшний день не представляется возможным.
В настоящей работе предпринята попытка выявить роль пептидных гормонов, регулирующих кальциевый гомеостаз, в функционировании клеток иммунной системы.
Цель исследования. Целью настоящей работы являлось выделение и очистка продуктов секреции околощитовидных желез и изучение действия ряда препаратов, полученных из ткани околощитовидных желез на митотическую активность иммунокомпентных клеток.
Основные задачи исследования:
-
Выделить продукты секреции окслощитовтдных желез.
-
Прогести хроматографическое разделение экстрактов околощитовидных желез на сефадексе G-'OO.
-
Провести хроматографический разделение экстрактов околощитовидных желез на геле TOYO-PEARL HW-55.
-
Провести анализ иммуномодуляторной активности различных фракций, полученных при хроматографическом разделении экстрактов околощитовидных желез, на лимфоидных клетках лабораторных животных.
-
Провести анализ иммуномодуляторной активности различных фракций, полученных при хроматографическом разделении экстрактов околощитовидных желез, на лимфоидных клетках, полученных из тимуса,селезенки и лимфоузлов человека.
Новизна исследования. Впервые получены новые сведения, указывающие на тесную взаимосвязь между функциональным состоянием иммунной системы и гормонами, регулирующими гомеостаз кальция в организме.
Показано, что паратиреоидный. гормон и экстракт из околощитовидных желез способны изменять митотическую активность им-мунокомпетентных клеток в 10 и более раз, что говорит о высокой специфичности взаимодействия. Показано, что кальцийрегулиру-ющие пептиды, и в частности, паратиреоидный гормон, могут связываться с митогенными рецепторами лимфоцитов, а в определенных условиях также модулировать митотическую активность конканавалина А и фитогемагглютинина. Проведен хроматографії ческий анализ экстрактов околощитовидных желез. Изучена имму-номодуляторная активность различных фракций (паратгормонсо-держащих и парлтгормон не содержащих). Впервые показано, что
иммуномодуляторную активность кроме паратиреоидного гормона имеют и другие соединения, полученные из экстрактов тканей око-лощитовидных желез.
Теоретическое и практическое значение работы. Полученные результаты указывают на существование связей между системами, регулирующими иммунный и кальциевый гомеостаз.
Эти результаты позволяют научно обосновать существование большого количества иммунодефицитных состояний при эндокринных патологиях, сопровождающихся нарушениями в кальцийрегу-лирующей системе.
Полученные результаты являются основой для разработки новых методов очистки биоактивных соединений из тканей околощи-товидиых желез с применением гелей TOYO-PEARL, с последующей тестировкой биологической активности полученных препаратов.
Апробация работы. Материалы диссертации были доложены и обсуждены на:
4-ом Всесоюзном симпозиуме"Регуляция иммунного гомеоста-за" (Суздаль, 1986);
2-ой конференции по проблемам физико-химической биологии и биотехнологии в медицине (Ереван, 1986);
4-ой республиканской молодежной конференции по физико-химической биологии (Севан, 19S7);
конференции молодых специалистов и ученых медицинского института "Современные вопросы общей и частной патологии" (Ереван, 1988).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 работ. На основании полученных результатов даны два рационализаторских предложения.
Структура и объем диссертации. Работа состоит из введения, обзора литературы, описания материала и методов исследования, трех глав, содержащих изложение результатов собственных исследований, выводов и указателя литературы.
