Введение к работе
Актуальность проблемы. Объ-Иртышский бассейн является самым большим очагом описторхова в мире (Д.Д.Яблоков, 1979). В последние годы наблюдается повсеместное снижение интенсивности инвазии (И.А.Павлюков и соавт., 1989), причина которого остается неясной. В связи с полиморфизмом клинических проявлений выявление больных описторхозом, проживающих в эндемичном очаге, сопряжено с большими трудностями, и поэтому лабораторная диагностика описторхоза играет ведущую роль в его распознавании. Снижением интенсивности инвазии определяются трудности гельминтоовоскопической диагностики. В связи с этим, разработка методов иммунодиагностики описторхоза приобретает исключительно важное значение.
Реакции иммунитета, используемые для диагностики описторхоза, могут быть подравделены на 2 группы. Одна группа реакций обеспечивает выявление антител в сыворотке крови больных описторхозом. К их числу относятся РИГА и ИФА с описторховным антигеном. Апробация РИГА в клинике показала ее несомненную диагностическую ценность при распознавании острых форм описторхоза. По данным И.А. Клебаиовской я В.В. Горчакова (1981), реакция положительна у 98,1 % больных острым описторхозом, а в случаях хронических форм бписторхоза ее диагностическая значимость бывает существенно ниже.
С 70-х годов для диагностики описторхоза стал широко применяться ИФА для выявления прогивоописторхозных антител. Общая картина диагностической ценности ИФА не отличается от диагностической значимости РИГА. Высокие титры антител в реакции ИФА отмечаются у больных острым описторхозом (Г.А.Гицу и соавт., 1987; Клебановская л соавт.,1990). Роль ИФА в распознавании хронического описторхоза существенно ниже. И.А. Клебановская и О.Ю.Старостина (1987) при одномоментном ис-
пользовании 2-х реакций иммунитета (РИГА и ИФА) смогли подтвердить диагноз только у 52,7 X больных хроническим опистор-хозом.
Трудности распознавания хронического описторхоза с применением РИГА и ИФА определяются еще и тем, что у исследователей нет единства мнений в отношении так называемого "диагностического" титра реакции. Так, по мнению И.А.Клебановскои и О.Ю.Старостиной (1987), диагноэ хронического описторхоза может быть поставлен при тигре реакции ША 1:50, а согласно инструктивным указаниям фирмы "Вектор" - при титре 1:200. А.Я.Лысенко (1978) считает ва диагностический титр разведение сыворотки 1:400.
С нашей точки зрения, более перспективными для диагностики описторхоза являются реакции, направленные на выявление антигенов описторхисов в фекалиях. Ю.В.Теплухин и соавт. (1986) разработали РИГА с антительным диагностикумом, при использовании которой антигены описторхисов в фекалиях могут быть выявлены у 65-70Х больных описторхозом. Трудность внедрения этой реакции в широкую клиническую практику определяется отсутствием промышленного производства антительного зритроцигарного диагностикума.
В 1987 году В.Г.Кузнецова и соавт. использовали принцип тонкослойного иммунного анализа (H.Elwing et al., 1975) для диагностики описторхоза.. В отличие от оригинального метода, для выявления антигенов описторхисов в фекалиях В.Г.Кузнецова и соавт. в качестве источника антител использовали сыворотку крови обследуемого больного. По их данным, при применении ТИА с аутосывороткой диагноз хронического описторхоза может быть верифицирован у 87,5 % больных. Однако к недостаткам этой реакции следует отнести то, что при оценке ее
результатов в водяных парах может вноситься значительный элемент субъективизма.
Поэтому дальнейшее совершенствование методов иммунодиагностики описторхоза является актуальной задачей клинической медицины.
Цель исследования - совершенствование лабораторной диагностики описторхоза с применением реакций иммунитета.
Задачи исследования:
-
Изучить диагностическую ценность ИФА в распознавании острого и хронического описторхоза в условиях нивкой интенсивности инвазии.
-
Изучить диагностическую ценность ТИА и его иммуно-ферментной модификации (мТИА) в распознавании острого и хронического описторхоза в условиях нивкой интенсивности инвазии.
-
Изучить специфичность реакций ТИА и мТИА.
-
Исследовать в иымуноблоттинге антигенные компоненты секреторно-экскреторных продуктов, тегумента и экстракта ма-рит описторхисов.
Научная новизна:
-
Впервые для выявления антигенов описторхисов в фекалиях больных использована иммуноферментная модификация ТИА с аутосывороткой.
-
Впервые установлено, что сыворотки крови больных описгорхозом в реакциях ТИА и мТИА могут положительно реагировать с антигенами аскариды человека, широкого лентеца, однокамерного эхинококка и Methorchis bills (albldus).
-
Впервые в экстракте марит описторхисов выявлен антиген с молекулярной массой 100 кДа, который специфически реагирует с сыврротками крови больных описторхозом и не реаги-
рует с сыворотками крови неинвазированных лиц.
Практическая значимость и внедрение результатов работы.
С применением ТИА и мТИА с аутосывороткой представляется возможным диагностировать наличие инвазии описторхисами не только в случаях клинически выраженных форм, но и при инаппарантных и латентных формах.
Учитывая, что реакция ТИА для своей постановки не требует специального оборудования и реактивов, она может быть использована при проведении массового обследования населения.
Установлена возможность постановки 2-го этапа раакции мТИА после экспонирования чашек в водяных парах при сомнительных или отрицательных результатах ТИА.
Результаты исследований внедрены в 1-й МИКБ г.Новосибирска и поликлинике N 1 г.Новосибирска. Положения, выносимые на зашиту.
-
Диагностическая ценность реакции ИФА со стандартными реагентами приближается к 100% только у больных острым описторхозом.
-
С применением ИФА диагноз хронического описторхоза может быть установлен не более чем у 50% больных.
-
Для диагностики описторхоза в период хронической фазы целесообразнее использование реакций иммунитета для выявления антигенов описторхисов в фекалиях (ТИА и мТИА).
-
С применением мТИА диагноз описторхоза может быть установлен у всех больных острым описторхозом и у 87,5 -хроническим.
-
В экстракте марит описторхисов выявлен антиген с молекулярной массой 100 кДа, который дает полосы преципитации с сыворотками крови больных описторхозом и не реагирует с сыворотками крови неинвазированных лиц.
Апробация работы.
Материалы диссертации доложены на 53, 54, 56 и 57-й итоговых научных конференциях студентов и молодых ученых НМИ (апрель 1992, 1993, 1995 и март 1996г.), на заседании ассоциации инфекционистов Новосибирской области (декабрь 1991г.), на научной сессии НМИ, посвященной 100-летию Новосибирска (октябрь 1994г.), на 1-й научной конференции Новосибирского отделения паразитологического общества РАН (февраль 1996г.), на 6-й научно-практической конференции врачей г.Новосибирска (апрель 1996г.).
Диссертация апробирована на совместном совещении кафедр инфекционных болезней лечебного и педиатрического факультетов Новосибирского медицинского института.
По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, оформлено рационализаторское предложение "Способ диагностики описторхоза", разработаны и внедрены методические рекомендации "Диагностика и лечение больных описторхозом".
Объем и структура диссертации.
Похожие диссертации на Совершенствование методов лабораторной диагностики описторхоза
![Клиническая оценка современных методов диагностики острых кишечных инфекций у детей [Электронный ресурс]](/i/i/4283/186374.png "Клиническая оценка современных методов диагностики острых кишечных инфекций у детей [Электронный ресурс] Ильина Надежда Олеговна")
![Комплексное обследование больных ВИЧ-инфекцией с использованием современных методов лучевой диагностики [Электронный ресурс]](/i/i/4427/203696.png "Комплексное обследование больных ВИЧ-инфекцией с использованием современных методов лучевой диагностики [Электронный ресурс] Бурова Надежда Владимировна")
