Введение к работе
Актуальность проблемы.
В настоящее время накоплен обширный материал, свидетельствующий о грубых нарушениях иммунологической реактивности у больных, страдающих опийной наркоманией. Длительное употребление опийных наркотоксикантов приводит к формированию иммунодефицита, который сопровождается чрезвычайно высоким риском развития бактериальных инфекций, вызываемых как патогенной, так и оппортунистической микрофлорой, вирусных инфекций, течение которых приобретает у наркоманов нередко «фатальный характер» (Rouveix В., 1992; Roy S., Loh Н., 1996; Eisenstein Т., Hiburger М., 1998; Nunez G., Urzua J., 1999). Отмечено (Bewley T. et al., 1968), что чаще всего причиной смерти опийных наркоманов являются гноеродные инфекции (39%), гепатиты (29%) и передозировка наркотика (17%). В настоящее время в связи с массивной экспансией вируса иммунодефицита человека к этому «списку» прибавилась ВИЧ-инфекция, частота которой максимальна в среде наркоманов. В этом случае фактором риска являются не только использование нестерильных шприцев и игл, но и особенности нарушений иммунитета, «облегчающие» инфицирование и способствующие более быстрому размножению вируса в организме, в частности С04+-лимфоцитоз (Rouveix В., 1992). Несмотря на интенсивные исследования, механизм нарушений неспецифических и специфических механизмов иммунитета при опийной наркомании и при длительном введении экзогенных опиатов экспериментальным животным до конца не ясен. Характер воздействия опийных наркотоксикантов на иммунные процессы поливалентен и обусловлен как прямым воздействием на опиатэргические механизмы, так и опосредованным через ЦНС влиянием, в том числе так называемым «химическим стрессом» (Carr D. et al., 1995; Van der Laan J. et al., 1995).
В последние годы резко возрос интерес к роли апоптоза в регуляции иммунных функций. Апоптоз - естественный закономерный процесс рецепторно-опосредованной, генетически запрограммированной, физиологически активной гибели клетки, в настоящее вре-
мя рассматривается как один из ключевых механизмов поддержания иммунного гомеостаза - селекции лимфоцитов в онтогенезе, регуляции силы и продолжительности иммунного ответа, реализации механизмов цитолиза, иммунопривилегированности и т.д. (А. А Ярилин, 1996; С. Г. Аббасова и соавт., 1999). Сформулирована концепция «апоптотического иммунодефицита» (А.Н. Череде-ев, Л.В. Ковальчук, 1997; Kovalchuk L., Cheredeev A., 1999). Недостаточность апоптотическои элиминации может лежать в основе ряда аутоиммунных и лимфопролиферативных процессов, преобладание «негативной активации» - апоптоза в основе некоторых первичных иммунодефицитов и индуцированных различными факторами вторичных иммунодефицитных состояний. Избыточный апоптоз лимфоцитов, как субстрат формирования иммунодефицита, описан при туберкулезе легких (А.Г. Хоменко и соавт., 1996; Р.Ш. Юсупова и соавт., 2000; Sibiryak S. et al., 1999), гнойно-септических процессах (Е.Р. Черных и соавт., 1999), ВИЧ-инфекции (Bohler Т. et al., 1997), воздействии ксенотоксических факторов (Sibiryak S. et al, 1998).
Апоптоз лимфоцитов при воздействии морфина впервые был описан в 1993 году (Fuchs В., Pruett S., 1993). За прошедший период времени в доступной литературе появились лишь единичные работы, свидетельствующие об активации апоптоза лимфоцитов и макрофагов при длительном воздействии опиатов, и высказано предположение о возможной связи этого факта с высоким риском бактериальных инфекций и тяжелым течением ВИЧ-инфекции (Nair М. et al., 1997; Singhal P. et al. 1999, 2000). Можно полагать, что исследования в этом направлении углубят понимание механизмов формирования иммунологической недостаточности у наркоманов и позволят разработать новые подходы к иммунокоррекции и, возможно, фармакотерапии лекарственной зависимости.
Цель исследования.
Оценить особенности нарушений иммунного статуса и изучить апоптоз лимфоцитов у больных опийной наркоманией.
Задачи исследования.
-
Изучить иммунный статус опийных наркоманов, включая суб-популяционную структуру лимфоцитов, их функциональную активность, уровень сывороточных иммуноглобулинов, цитокиновый статус, состояние фагоцитарно-метаболической активности нейтро-филов
-
Изучить экспрессию ассоциированных с апоптозом FasR и FasL у больных опийной наркоманией в сравнении со здоровыми донорами.
-
Изучить апоптоз лимфоцитов периферической крови у больных опийной наркоманией
-
Охарактеризовать особенности иммунного статуса и апопто-за лимфоцитов у опийных наркоманов в зависимости от наличия или отсутствия клинически выраженной вторичной иммунологической недостаточности.
Научная новизна.
В работе реализован патогенетический принцип оценки иммунного статуса у больных опийной наркоманией II стадии. Выявлены характерные особенности нарушений субпопуляционной структуры лимфоцитов, их функциональной активности, цитокиновый дисбаланс, нарушение фагоцитарно-метаболической активности ней-трофилов. Этот комплекс нарушений позволяет охарактеризовать иммунный статус данных больных как состояние патологической активации иммунной системы в сочетании с функциональной недостаточностью неспецифических и специфических систем имму-норезистентности.
Впервые изучена экспрессия ассоциированных с апоптозом FasR и FasL на лимфоцитах периферической крови при опийной наркомании. Обнаружено, что при опийной наркомании наблюдается гиперэкспрессия FasR и тенденция к увеличению экспрессии FasL. а также нарушение нормального соотношения содержания FasR+ и FasL4 лимфоцитов с основными субпопуляциями лимфоцитов, лимфоцитов, экспрессируюших активационные антигены и интегральный белок митохондрий - продукт антиапоптогена Вс1-2. Гиперэкспрессия ассоциированных с апоптозом мембранных гликоп-ротеинов отражает общую тенденцию к активации и повышенную апоптотическую готовность лимфоцитов.
Впервые выявлено, что в периферической крови опийных наркоманов повышено содержание лимфоцитов с морфологическими, тинкториальными признаками апоптоза, а также отмечено повышение активности одного из ключевых ферментов, участвующих в реализации программы апоптоза - каспазы 3. Обнаружено, что Т-лимфоциты опийных наркоманов при активации через Т-клеточ-ный рецептор характеризуются повышенной готовностью к апоп-тозу, но резистентностью к проапоптогенному эффекту глюкокортикостероидов.
Впервые показано, что преобладание процессов апоптоза наиболее характерно для опийной наркомании, осложненной наличием инфекционного иммунопатологического синдрома, т.е. вторичной иммунологической недостаточности.
Научно-практическая значимость работы.
Полученные результаты расширяют представления о механизме и характере иммунотоксического действия опийных наркотоксикантов, что открывает перспективу разработки новых подходов к иммунокорригирующей терапии и, возможно, оптимизации терапии абстинентного синдрома.
Внедрение результатов исследования.
Материалы диссертационной работы включены в учебный процесс при чтении лекций врачам по курсу иммунологии на кафедре глазной и пластической хирургии с курсом иммунологии института последипломного образования Башкирского государственного медицинского университета (БГМУ), в учебный процесс курса иммунологии БГМУ, кафедры психиатрии и наркологии БГМУ. Разработанные автором методические подходы реализованы в клинико-диагностической работе отдела клинической и экспериментальной иммунологии и ВИЧ-диагностики Всероссийского центра глазной и пластической хирургии.
Основные положения, выносимые на зашиту:
1. Характер нарушений иммунного статуса при опийной наркомании II стадии отражает состояние патологической активации иммунитета на фоне функциональной недостаточности специфических и неспецифических механизмов иммунореактивности.
-
Лимфоциты периферической крови больных опийной наркоманией характеризуются гиперэкспрессией ассоциированных с апоптозом FasR и FasL, а также повышенным апоптозом как непосредственно в организме наркоманов, так и при специфической активации в витральной системе. Механизмы интенсификации апоптоза у опийных наркоманов полимодальны.
-
Избыточный апоптоз лимфоцитов при опийной наркомании может являться субстратом развития вторичной иммунологической недостаточности.
Апробация работы.
Материалы диссертации доложены на научных конференциях, в том числе и международных: III и IV научных конференциях с международным участием «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге - 2000» (Санкт-Петербург, 2000); «Дни иммунологии в Санкт-Петербурге - 2001» (Санкт-Петербург, 2001), Ш съезде иммунологов и аллергологов СНГ (Сочи, 2000); VI Xenobiotic Metabolism and Toxicity Workshop (Antalya, Turkey, 2000), VI Конгрессе РААКИ (Москва, 2001); XI Международном Конгрессе иммунологов ICI-2001 (Stokcholm, 2001; 1-й конференции иммунологов Урала). Фрагменты работы неоднократно докладывались на заседаниях Башкирского научного общества иммунологов (2000,2001).
Публикации.
По теме диссертационного исследования опубликовано 10 работ, из них 2 работы в международной печати.
Объем и структура диссертации.
Диссертационная работа изложена на 129 страницах, иллюстрирована 13 таблицами и 15 рисунками. Она состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов исследования, главы, посвященной результатам собственных исследований и их обсуждению, заключения, выводов, библиографического списка, включающего 230 литературных источников.
