Содержание к диссертации
Список принятых сокращений 5
ВВЕДЕНИЕ 6
Актуальность работы 6
Цель работы 6
Задачи исследования 7
Научная новизна работы 7
Теоретическая и практическая значимость работы 8
ОБЗОР ЛИТЕРАТУРЫ 9
Введение 9
Строение ЛПС и его локализация в клеточной мембране 11
Гетерогенность фракций ЛПС и методы их выделения 16
Эндотоксичность ЛПС - связь с первичной структурой 24
Иммунобиологические свойства ЛПС 31
Активация врожденного иммунного ответа 33
Активация адаптивного иммунного ответа 36
Толерантность к эндотоксину 37
Некоторые характеристики ЛПС Salmonella и Shigella 40
МАТЕРИАЛЫ И МЕТОДЫ 44
Материалы 44
Животные 44
Клетки 44
Реактивы для выделения и фракционирования ЛПС 44
Реактивы для проведения электрофоретического анализа , 44
Реактивы для определения иммуногенности 45
Прочие реагенты и материалы, используемые в работе Растворы, использованные в работе 45
Методы 45
Выделение углеводсодержащих антигенов и их анализ 45
Выделение углеводсодержащих антигенов 45
Очистка ЛПС, полученного водно-фенольным методом экстракции 46
Методы определения содержания примесей в препаратах 47
Фракционирование ЛПС смесью хлороформ-метанол-0,2М водный НС1 47
Фракционирование ЛПС с помощью гидрофобной хроматографии на октил сефарозе 4B-CL 47
Методы изучения физико-химических характеристик антигенов 47
Методы определения молекулярной массы О-СП Sh. sonnei 47
Электрофорез в полиакриламидном геле 48
Метод спектроскопии ЯМР 48
Методы определения биологических характеристик антигенов 48
Иммуногенность антигенов 48
Определение пирогеиности препаратов 50
Определение токсичности препаратов 51
Определение серологической активности 51
Кератоконъюнктивальный тест [Sererty, 1957] 52
Индукция толерантности 52
РЕЗУЛЬТАТЫ И ОБСУЖДЕНИЕ
Фракционирование ЛПС и физико-химические свойства выделенных фракций Sh. sonnei, фаза
Экстракция смесью хлороформ-метанол-НСІ 57
Гидрофобная хроматография 58
Ультрацентрифугирование 60
Иммунобиологические свойства фракций ЛПС Sh. sonnet 65
Токсичность фракции С-ЛПС(8Ь.з) 66
Иммуногенность фракций ЛПС Sh. sonnei 69
Системный иммунный ответ 69
Иммунный ответ на слизистых оболочках 76
Иммуногенность серий низкотоксичных фракций Sh. sonnei, фаза 1 78
Толерогенность фракций GJinC(Sh.s) sonnei 81
Изучение фракций ЛПС, полученных из некоторых энтеробакгерий 82
Фракционирование и физико-химические свойства ЛПС-фракций Sh. flexneri 2а и S. enterica sv typhi O901 83
Иммунобиологические свойства фракций С-ЛПС(8Ь.г) и С-ЛПС(ЗД), выделенных из ЛПС Shflexneri 2а и S. enterica sv typhi О901, соответственно 86
Токсичность выделенных фракций в галактозаминовой модели 86
Иммуногенность фракций С-ЛПС(8Ь.г) и С-ЛПС(З.і) Sh.flexneri 2а и S. enterica sv typhi 87
Заключение 91
ВЫВОДЫ 92
СПИСОК ИСПОЛЬЗОВАННОЙ ЛИТЕРАТУРЫ