Введение к работе
Актуальность теш. Проблема опухолевого роста - одна из важнейших в современной биологии и медицине. Это связало как с широким распространением онкологических заболеваши'1, так и отсутствием кардинальных методов их терапии.
Взаимоотношения опухолевого роста и иммунной системы носят можний характер а до конца не выяснены. Действительно, с одной зторош, иммунная система организма способна распознавать, разрушать и элиминировать из организма опухолевые клетки, с другой стороны,' сама опухолевая ткань на иммунную систему оказывает супрес-зивное влияние, что выражается в инволюции тимуса, гипопластичес-<их и атрофических процессах в периферических лш.йюидднх органах, нарушении процессов миграции, функциональной активности, кооперацій различных видов иммунокошетентних клеток, а такяе продукции .пітокшюв, результатом которых является, подавление иммунного ответа на уровне целостного организма (Р.Б. Петров, 1976; В.И. Говал-ю, 1977; Р.В. Петров, P.M. Хаитов, 1977; P.M. Хаитов, 1979; Т.Н. Зелезнеза, Ю.А. Грдневич, 1980; Н.И, Белянчшсова и др., 1981; З.А. Уманский, В.Г. Пинчук, 1902; Ь.Б. фукс, 1983; Б.Д. Брсццз, .987).
Процессы МИГраЦИИ КрОВеТВОріШХ СТВОЛОВЫХ КЛеТОК, Т- И В-ЛЫ.1-
іоциіов, их кооперативное взаимодействие „являются ваінейгаими эта-іами в становлении иимушого ответа. Разработанные зксперимэнталь-!ые метода оценки этих этапов (Р.В. Петров с сотрудниками, 1969-,975; Miller , Mitchell , 1968) широко применяются для харакієрис-'ики различных имыуномодуляторов, а также для выявления нарушений :ри некоторых патологических состояниях, например, при эксперимеп-альных артрите, гломерулонефрите, сифилисе (У.В. Маджидов, 1980; !.Д. Уразметова, 1987; Э.Г. Кіш, 1992). Установлено, что у животах с перевитыми опухолями все этапы аммунопоэза оказались нару-в'шшми (P.M. Хаитов и др», 1976; А.Ш. Норимов, 1978). Однако, аи больший интерес вызывает изучение этих вопросоз при канцероге-езе, индуцированном химическими агентами, так как оно позволило ы характеризовать состояние отдельных звеньев дшунопоэза" на тапах развития опухолевой ткани (латентный период, стадия воз-якновения опухоли и терминальная стадия).
Показано, что нарушение активности различных субпопуляций
иммунокомпетентных клеток при опухолевом процессе неоднозначно. Так, активность ЕК, Т-халпоров подавлена, а Т- и В-супрессоров и макрофагов-супрессоров - повышена (Р.В. Петров, P.M. Хаитов,1977; А.ІІІ. Норимов, 1978; Lennard et el. , 1984; Lotzova , 1984; P.И. Краснії и др., 1985; Pope , 1985; Вогоз et al. , 1987; А.С. Сапа-ров и др., 1992).
Установление отого (ракта открывает возможность целенаправлен ного, селектішіюго воздействия на отдельные популяции клеток. Так с помощью алтисивороток к Т-супрессорам (М.С. Бляхер, 1987), идис типам i-j их рецепторов (А,С. Апт и др., IS8S) или к антителам к вдыогипу і-і (Каиазекі et аі. , 1987) возможно блокирование іш душиш Т-супрессоров, Использование цптокинов (интерферон, интер-леіікші-2) позволяет повышать ЕК активность (В.Д. Соловьев, И.Г. Баландин, 1981; Schneider-', 1986; З.Г. Кадагидзе и др., 1989; Balkvdll , 1989; Drews , I98S). Оказалось, что некоторые полиэлектролиты, в частности lla-5, повышают активность Т-хелпвров при снижении Т-клеточяой супрессии иммунного ответа (Р.В. Петров и др., IS8I; А.ІЛ. Нажштдинов, 1982).
Использование шноклональных антител, особенно гомологичных, открывает широкие возможности не только в диагностике, но и в активной иммунотерапии онкологических больных (lieville et al., . 1982; Bouchsix , 1985; Сагівзоп et al. , 1989; t>enekcv;itech et al., 1989').
Следовательно, разработка методов селективного воздействия на отдельные субпопуляции лимфоцитов является одним из путей коррекции иммунологических.нарушений, и чрезвычайно перспективным направлением в комплексной терапии больных со злокачественными заболеваниями.
Работа Еішолнєиа в рамках программа 0.69.07 "Исследовать генетические ц молекулярные механизмы нарушений иммунитета и наслед ствешшх болезней и разработать на этой основе методы и способы их профилактики, диагностики и лечения", утвержденной постановлениями ГКНТ СССР и Госплана СССР li І8І/І28 от 16.07.81 г.
Цель и задачи исследования. Цель настоящей работы - експериментальний аналіз нарушений этапов имцгнопоэза и функций отдельных субпопуляций иммунокомпетентных клеток при опухолевом росте различного ганезиса и на втой основе разработка подходов к салак-аивн ой - имыуноіерапии.
В процессе реализаций поставленной цели решались следующие
конкретные задачи: '
-
произвести анализ нарушении основных этапов ишунопоэза (миграция, пролиферация и днфферйнцнровка кровотворних стволовых клеток, миграция Т- и В-клегок и их кооперативное взаимодействие, взаимодействие Т-р и Тд-клеток, макрофагов с лимфоцитами) и иммунного ответа на уровне целостного организма у мышей с индуцированными канцерогенами и перевитыми опухолями; . .
-
изучить нарушения функциональной активности различных cyt5— популяций лимфоцитов, играющих ключевую роль в системе иммунитета (Т-хелпэры и ^предшественники АОК, Т-супрессоры специфической и
НесПеЦИфИЧесКОЙ природы, В-СупреОСОрЫ, КОНТрСупреССОрЫ, Т-КИЯЛЄ-
ры, ЕК, а также некоторые продукции их функции - лимфокшш Т-кле-ток, Ш-І, ШІ-2) у мышей с индуцированными и перевитыми опухолями;
-
произвести анализ структурных изменений в составе клеток лимфоидных органов (тимус, селезенка, лимфатические узлы) у мышей с перевитими опухолями;
-
исследовать иммунные механизмы действия некоторых иммунс— модуляторов (флосулон, вдгисупрессорная сиворотка) у интактннх животных;
-
изучить эффективность тормозящего влияния на рост и развитие опухолевой ткани ряда препаратов различного механизма действия; ...
-
показать, что в основе тормозящего влияния на рост и развитие опухоли в организме некоторых изученных препаратов лежит
их корригирующее влияние на отдельные этапы иммуногенеза и/или функциональную активность различных субпопуляций лимфоцитов, нарушенные у животных с опухолям:.
Научная новизна и практическая значимость работы» Впервые на большом окспернменташзом материале при опухолях различного генезиса проведен всесторонний анализ нарушений основных этапов им-мунопоээа и функциональной активности разлігпшх субпопуляций лимфоцитов и макрофагоа. Так, показано, что опухолевой рост сопровождается усилением процессов миграции костномозговых стволовых клеток, а также их способности образовывать КОЕ в организме сии-гашых облученных в летальной дозе реципиентов, которое при терминальной стадии сменяется их подавлением. Направление дифферен-цировки гешпоэтическах элементов лрк опухолевом росте изменяется преимущественно в сторону зрктропоэза, наиболее выраженное
среди стволовых элементов селезенки.
Показано, что при МП и ДЫБА, канцерогенезе разко подавлена миграция В- и Т-клеток, причем в последнем случае в большей степени. Прн МХТ канцерогенезе и перевитых опухолях эффект кооперации Т~ и В-клеток не только ингибирован, но в некоторой мере вообще на проявлялся, в то время как в опытах с Д'ЛБА этот эффект 'был сохранен, хотя и бия подавлен по отношению к контролю. Виявлено, что нарушение взаимодействия Т- и B-клаток обусловлено в основном подавлением функции Т-хэлперов.
На примера МХТ канцерогенеза установлено, что взаимодействие Tj- и Tg-JUieTOK снижено только в стадии развития опухоли, а в терминальной стадии опухоленосигельства практически не нарушено.
Виявлено, что при опухолевом росте резко подавлено контактное взаимодействие макрофагов с тикоциташ или клетками лимфатических узлов, что в большей степени зависит от макрофагов, нежели клеток лиыфовдной системы.
При опухоленосительстве, индуцированном химическими канцерогенами и путем перевивки, активность специфических и неспецифических Т-супрессоров, а также В-супрессоров повышена. Клетки лимфатических узлов интактннх мышеи- и мышей с опухолями оказывают контрсупрессивное действие на сингенше клетки селезенки (Т-супрессо-ры). Показано, что Т-суцрессоры у животных с опухолями теряют способность воспринимать сигналы от других клеток, в том числе от контрсупрессоров.
Активность Т-киллеров при опухолевом росте существенных изменений не претерпевает,- в то время как ЕК активность значительно угнетена. Продукция ИЛ-2 при химическом канцерогенезе на стадия опухоленосительотва снижена примерно в 2 раза, а снижение продук-ции 11Л-І отмечалось только в опытах с ЖТ.
Опухолевой процесс в клеточном составе лимфэидных органов вызывает выраженные структурные изменения, свидетельствующие о вовлечении в процесс клеточных элементов, ответственных и за гуморальные, и за клеточные звенья иммунитета.
Показано, что целенаправленное, селективное воздействие на нарушенные этапы* ишунолоэза и функции иммунокошетентных клеток, участвующих в иммунном ответе, оказывает тормозящее влияние на рост и развитие опухолевой ткани.-Так, противоопухолевой эффект фяосулона, впервые изученного в атом аспекте нами, реализуется на уровне Т-супрессоров и Ж. Препарат полностью отменял эффект
Т-супреесоров и восстанавливая ЕК активность.
Противоопухолевой эффект КАСС, .тппг.-.о непосредственного влияния )іа циркущфуппіиа T-cynpeccopu, обусловлен влиянием во на процессы дїиїфоренцпровки и пролиферации клеточных элгаментов а лголфс— ндных органах - усилением преимущественно клеточных факторов иммунитета.
Противоопухолевый пф|якт тактивіша реализуется" на уровне восстановления рецепторного аппарата лимфоцитов. Зффэкт синтетических полимеров ІШП и ПАК в восстановлении ш,?лпшого ответа опосредован их стимулїгрукщчм влияшієіл на процессы миграции и проли-іїералин гемопоэтаческ.их стволових меток, На -5 - его способностью корригировать дефекты иммунной сиотег/а на уровне взакуодеііствля глакрофігов и лішфсцнтов Т-клеточнои линии ди^ферекцкровки, а такта подавлять активность спещіфлнеских и неслецифіческлх Т-суггрес-соров» Повышенную активность 3-супресссрсв при опухолевом росте удается ингибировать о помогаю щашофосЬашда,
Практическое значения полученных результатов состоит и в
том, что показана лршгцяппалькая воз .".гордость путем селективней
коррекции с помощью пгслуномодуляторов нарушенных этапов иг.т.іунс—
поээа и функции отдельные імлунокомлогентишс клеток активно тор
мозить рост и развитее опухолевой ткани. Следовательно, эти дан
ино обосновшэаэт целесообразность дальнейших исследований в этом
направления,, . .._
Апробация работы. Материалы диссертации долоквны на: 5-й Республиканской конференции ЩИ медвузов Узбекистана (Ташкент, 198.1)( 1-й Республика»слой конференции по медицинской жлуколо-гни (Ташкент, 1983), Бсесовзной научной конференции" "Современнне метода иммунотерапии" (Ташкент, 1984), конференции молодых ученых Филиала института имнуяолоиш (Ташкент, 196?), 1-м Зсесоэзном иммунологическом съезде (Сочи, 1289), 1-м Республиканском съезде иммунологов и аллергологов Узбекистана (Самарканд, 1291), Республиканском научном общества ;н.мунолсгов Узбекистана (Тазхенг, 1991) Ученом совете Института іпжунолопш ІЗ РУз (Ташкент, 1992).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 20 работ, получено I авторское свидетельство СССР.
Объем и структура диссертации. Диссертация кздонена ка З^иО
страницах машинописи, т них страниц текста. Диссертация со-
