Введение к работе
Актуальность проблемы. Иммунная система играет ключевую роль в патогенезе развития и течения опухолей. С одной стороны, различные нарушения иммунологического противоопухолевого надзора увеличивают частоту появления новообразований; с другой — особенности иммунного статуса, предшествующие образованию опухоли, оказывают влияние на характер течения и развитие осложнений. Известно также, что растущие опухоли вырабатывают вещества, способные влиять на состояние иммунной системы. (Н.М. Бережная, В.Ф. Чехун, 2000г.). Таким образом, существуют многогранные взаимоотношения между опухолью и иммунной системой хозяина (АЮ. Барышников, 2003г.).
В структуре онкологической заболеваемости населения большинства стран мира более половины приходится на долю новообразований органов пищеварения, причем в каждой стране имеются особенности соотношения частоты отдельных форм таких опухолей (Д.Г. Заридзе, 2000г.). В России среди первых пяти причин смерти от злокачественных новообразований после рака легкого и молочной железы, наиболее частыми формами являются рак желудка и кишечника (В.И. Чиссов, 2000г., М.И. Давыдова, 2003г.; Н.Н. Трапезников, Е.М. Аксель, 2001г.). По данным ВОЗ, число больных новообразованиями органов пищеварительного тракта непрерывно увеличивается. В последние десятилетия, в связи с внедрением эндоскопической техники и развитием миниин-вазивной хирургии, удалось значительно повысить выявляемость этой патологии в ранние сроки заболевания. Благодаря использованию эндоскопических манипуляций, стала возможной постановка клинико-морфологического диагноза уже при первом обращении больного за медицинской помощью. Важная особенность, сопровождающая эндоскопические биопсии - это небольшой объем материала, ограниченный размер которого сужает представление исследователя о степени дифференцировки, пролиферативной активности и инвазивных свойствах опухоли. Указанные обстоятельства становятся объективными факторами клинико-морфологической недооценки агрессивности новообразования. Улуч-
шению диагностики способствует внедрение передовых технологических приемов исследования, в частности, таких, как проточная цитометрия. Проточная цитофлуориметрия биопсийного материала, позволяет сочетать эндоскопическое и классическое патоморфологическое обследование с параллельным анализом цитометрических параметров клеток обнаруженной опухоли и клини-ко-лабораторными иммунологическими обследованиями.
Цель исследования: выявить особенности иммунного статуса у больных с новообразованиями пищеварительного тракта в зависимости от степени диффе-ренцировки и интенсивности пролиферации клеток из материала биопсий, полученных с использованием миниинвазивных хирургических методов.
Задачи исследования:
-
Провести сравнительный анализ параметров иммунного статуса больных с новообразованиями пищеварительного тракта различной локализации в зависимости от степени гистологической дифференцировки, пролиферативной активности клеток и плоидности опухолей.
-
Определить показания к проведению проточной цитометрии биопсийного материала, полученного при эндоскопическом исследовании больного; оценить результаты применения проточной цитометрии с параллельным ДНК-анализом материала биопсий на раннем этапе диагностики.
-
Оценить значение миниинвазивных хирургических методов в ранней диагностике заболеваний органов пищеварительного тракта методом проточной цитометрии.
-
На основе сопоставления данных иммунологического и патоморфологи-ческого исследований с показателями проточной цитометрии биопсийного материала выявить параллели уровней катаплазии опухолей и изменений иммунного статуса пациентов.
Научная новизна. Впервые выявлены изменения иммунологического статуса больных новообразованиями пищеварительного тракта, коррелирующие с определенными значениями уровней катаплазии и степеней дифференцировки опухоли. Впервые обоснована целесообразность включения иммунологическо-
го исследования как составляющего оценки общего состояния пациентов, учитывая выявленные особенности измененного иммунного статуса больных. Впервые показана целесообразность внедрения проточной цитометрии с параллельным ДНК-анализом материала биопсий, полученных с использованием ми-ниинвазивных хирургических методов. Определены показания к проведению проточной цитометрии биопсийного материала, взятого при эндоскопическом исследовании больного.
Практическая значимость. Полученные в работе данные свидетельствуют о необходимости комплексного патоморфологического и цитометрического исследования биоптатов новообразований пищеварительного тракта с клинико-иммунологическим обследованием пациентов. Установленные изменения отдельных звеньев системы иммунитета могут служить дополнительными критериями оценки общего состояния больных с новообразованиями ПТ. Разработаны показания для проведения цитометрического исследования на проточном цитофлуориметре с параллельным ДНК-анализом биоптатов, полученных при эндоскопическом исследовании больных, которые способствуют улучшению онкологической диагностики на раннем этапе.
Положения, выносимые на защиту
-
Выявлена зависимость характер и выраженности иммунологических нарушений у больных с новообразованиями органов пищеварительного тракта от уровня катаплазии и степени дифференцировки злокачественных опухолей.
-
Пролиферативная активность различных по степени гистологической дифференцировки новообразований характеризуется типичными изменениями параметров клеточного цикла. Количество и кратность содержания ДНК в клетках (плоидность) исследованных опухолей отражает уровень катаплазии новообразований.
-
Высокоинформативным для цитометрического исследования является материал рутинных биопсий органов пищеварительного тракта, полученный в процессе первичного эндоскопического обследования. Данные ДНК-цитометрии клеток биопсийного материала опухоли и иммунологического ис-
следования больных взаимообогащают диагностический арсенал клинической хирургии.
Внедрение результатов исследования в практику. Результаты исследования внедрены в работу городской клинической больницы (ГКБ) № 18, Централизованного патанатомического отделения (ЦПАО) ГКБ № 13, Центра иммуно-аллергологии РДКБ, г.Уфа.
Апробация работы. Материалы проведенных исследований представлены на VII1, ГХ Всероссийских научных форумах с международным участием «Молекулярные основы иммунорегуляции, иммунодиагностики и иммунотерапии» (СПб, 2005), ГХ итоговой научно-практической конференции с международным участием «Молодежь и медицинская наука в XXI веке» (Киров, 2005). Диссертация апробирована на межкафедральном заседании БГМУ (протокол № 1 от 01.04.2005г.), на заседании Регионального диссертационного совета КМ 002.124.01 при Президиуме Академии наук Республики Башкортостан (протокол № 33 от 26.05.2005г.).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 8 научных работ, в том числе научных статей и методических рекомендаций. Оформлено 1 рационализаторское предложение.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на страницах
машинописного текста, иллюстрирована рисунками, таблицами; состоит
из введения, 5 глав, заключения, выводов, практических рекомендаций. Список литературы содержит 244 источника, из них 89 отечественных и 155 иностранных авторов.