Введение к работе
Актуальность проблемы
В настоянеє вреня наблюдается утяяеление течения туберкулезного процесса, снияение иммунитета и развитие вторичного иммунодефицита у подавлащего числа больных (до 75%), а также появление больного количества больных с резистентными микобактерияии к противотуберкулезным препаратам (Хоненко Й.Г. и др., 1994, Кузьмина Н.В., 199В).
Для повннения эффективности противотуберкулезного лечения с цельв коррекции вторичного иммунодефицита применятся неспецифи-ческие иммуноиодулирувцие средства: синтетические-леванизол, диу-цифон, нуклеянат натрия и др. (fl.5. Инсанов, 1384. Т.В.Баранова, 1986). биологические препараты, полученные из тимуса животных -Т-активин, тималин, тимоген и др., а также вецеглва, выделенные из бактерии-рибомунил, продигиозан и дрЛВ.Я.Арион, 1984, Хоненко И.С. 1993).
Под воздействием выне перечисленных препаратов, у больных туберкулезом частично нормализовнвались показатели иммунитета и повивалась эффективность лечения. Однако положительный эффект отмечался не у всех больных, и нередко, такие показатели.как специфическая пролиферативная активность Т-клеток в РБТ в ответ на антигены иикобактерий, не всегда восстанавливалась.
Известно, что больным туберкулезом для стимуляции специфических реакций клеточного иммунитета, являющегося основным звеном противотуберкулезной защиты, в качестве иммуномодулирунщих средств применяпт туберкулин, реже - вакцину БЦЯ (В.А. Крылов, 1995).
Для получения хорошего эффекта данная патогенетическая терапия обычно применяется на ранних этапах лечения, но индивидуальным схемам с учетом туберкулиновой чувствительности организма больного. При тяжелых формах туберкулеза применение туберкулино и БЦІ - терапии ограничено.
Эчитнвая, что часть туберкулезных антигенов при самостоятельном введении является слабыми имнуногєнами, было необходимо соединить их с синтетическим адышантом. который, сам обладая им-муномодулирущим эффектом, усиливал бы имиуногенное действие данных антигенов.
Для этих целей нам представлялось интересным использовать новый синтетический имнуномодулятор-пслиоксидоний, ( разрешенный для применения и хсропо зарекомендовавший себя в клинике (В.Ф.С. 42-2727-96). Било показано, что применение полиоксидония в сочетании с лекарстветшми препаратами нормализовало показатели клеточного и гуморального иммунитета у больных бронхиальной астмой, хроническим бронхитом, с гнойно-раневыми инфекциямиСft.И.Борисова с соавт., 1937; В.Н.Некрасов с соавт., 193?; I!.Я.Козлов с соавт., 1997; Т.И.Гришина с соавт., 1998). При этом повивались сниженные показатели лимфоцитов с маркерами СДЗ, СД4, увеличивалась фагоцитарная активность нейтрофилов.
В настоящем исследовании сделана попытка создать противотуберкулезный препарат, который соединил бы в себе свойства полиоксидония активно стимулировать неспецифические иммунологические показатели (Т-лимфоциты, их субпопуляции, активность фагоцитоза) и усиливать специфическое имиуногенное действие антигенов, выделенных из туберкулезных микобактерий.
Для этого было необходимо соединить полиоксидоний с антигенами микобактерий вакцинного нтамма БЦЯ, отработать безопаснуп для организма дозу, ливеннув токсико-аллергических свойств, изу-чить специфические свойства препарата, особенно его специфическое иммуиомодулирупдее действие, а также экспериментально обосновать возмошюсть его применения на больных туберкулезом.
Цель исследования
Разработка специфического противотуберкулезного иммуноиоду-лятора, состоящего из антигенного комплекса цитоплазмы микобактерий БЦЗ и неспецифического имнуномодулятора - полиоксидония (П),(препарат ЦП-БЦЮ. изучение его иммунобиологических свойств.
Задачи исследования
-
Выделить из микобактерий туберкулеза вакцинного атамна БЦ1 антигенный комплекс цитоплазмы (ИКЦ).
-
Сконструировать специфический противотуберкулезный имму-номодулятор ЦП-БЩ из антигенного комплекса цитоплазмы и полиок-сидония.
-
Изучить токсичность, реактогешюсть и специфическую активность препарата ЩІ-БЦ8 на здорових яивотных.
-
Отработать оптимальний дозу препарата Щ1-БЦІ, не вызывающую токсико-аллергических реакций у иивотннх.
-
Изучить иммупомодулируюцее и лечебное действие препарата ЩІ-БЦІ на модели экспериментального туберкулеза.
Научная новизна
і. Разработан и сконструирован специфический иныуномодулятор ЦП-БЦЯ. содержащий комплекс туберкулезных антигенов, выделенных из цитоплазмы ыикобактерий туберкулеза мтамма ЬЩ.и синтетического носителя: иммуномодулятора - полиоксидония .
-
Показано отсутствие токсичности и геактогенности препарата ЦІІ-БЦ8 в оптимальних дозах с помоцыо современных морфологических и иммунологических методов.
-
Впервые показана возмоїность применения данного специфического иммуномодулятора I самостоятельно и в сочетании с противотуберкулезной химиотерапией) при экспериментальном туберкулезе у ныией. Изучены иммуноиодулирующие свойства препарата.
-
Получен патент на изобретение "Иммунокодулирунщее лекарственное средство" N 2112543 от If/ июня 1998 г.
Практическая значимость
-
Сконструирован специфический противотуберкулезный иммуио-модулятор - ЦІІ-БЦІ, способные восстанавливать нарушенные параметры противотуберкулезного иммунитета, ке вызывая при этом токси-ко-аллергических реакций в организме экспериментальных животных.
-
На основании проведенных экспериментов отработаны дозы препарата ЦП-БЦЯ и схемы которые могут бить использованы в последующем при пведепия больным туберкулезом.
Внедрение результатов в практику здравоохранения
Разработанной специфический противотуберкулезный иммуномоду-лятор ЦП-БЦЯ внедрен в ЦИИИГ PftMH (акт внедрения ЦНИИТ РАМН).
С целью получения разревения на клинические испытания имму-номодулятора на ограниченном контингенте больная туберкулезом» осложненным вторичным иммунодефицитом разработан»:
-
Инструкция по приготовлению и контролю препарата ЩІ-БЦІ.
-
Результаты лабораторно-эиспериментального (доклинического) изучения препарата ЦІІ-БЦ8 - специфического противотуберкулезного иммуномодулятора.
-
Программа клинических испытания препарата ЦП-БЦЯ при туберкулезе.
-
Приготовлена 3 серии препарата ЦП-БЦЯ.
Положения, выносимые на защиту
-
Сконструирован специфический противотуберкулезный иммуно-модулятор - ljH-БЦІ, состоящий из антигенного комплекса цитоплазма (нКЦ), содержащего 0.1 мкг белка, и і мг полиоксидония (П).
-
Обосновано, что препарат ЦП-БЦЯ с содерванием 0,1 мкг белка нКЦ является безвредным и не вызывает токсико-аллергических реакций.
-
Показано, что введение специфического иммуномодуляторз Ш-0ЦІ в отработанной дозе и схеме 2 раза в недели в течении двух іедель (2x2) повышает фагоцитарную активность макрофагов, ин-шчирует развитие в организме здоровых мнией развитие специфических реакций ГЗТ и аитителообразовання.
-
Использование препарата ЦІІ-ІЩІ по отработанной дозе и :хеме как самостоятельно, так и совместно с противотуберкулезной [имиотсрапиея, оказывает иммуномодулирующее действие и обеспечи-іает высокий терапевтический эффект.
Апробация диссертации
Материалы диссертации долояенн на конференции "Молекулярные основы патогенеза и диагностики туберкулеза и другой легочной патологии" (Москва, 1995), II Российской национальном конгрессе "Человек и лекарство" (Москва 1995), Мекдународной конференции по легочным заболеваниям (Пария, 1977), йеяотдєлєической конференции ЦНИИ туберкулеза РАИН (І998).
Диссертация опробярована 14.07.98 г. на научной конференции отдела иммунологии ЦІШЙТ РІШ1.
Публикации. По теме диссертации опубликовано 6 печатных работ. Получен патент на изобретение "Иммуноыодулирукщее лекарственное средство" N 2112543 от 10 июня 1998 г.
