Введение к работе
Актуальность темы. Туберкулез – это хроническая инфекционная болезнь человека, животных, птиц и холоднокровных, в большинстве случаев сопровождаемая образованием в пораженных органах и тканях специфических узелков (туберкулов), предрасположенных к творожистому распаду (В.Е. Щуревский, 1976; В.П. Урбан, 1991; А.С. Донченко, 1998).
Инфекционная этиология туберкулеза была доказана при заражении морских свинок и кроликов патологическим материалом. Изучение болезни на лабораторных животных позволило сделать вывод, что бычий вид микобактерий туберкулеза более патогенен для кроликов, чем человеческий. Эти данные легли в основу учения о видах микобактерий, с дифференциацией на человеческий, бычий и птичий виды (цит. по Р. Дженсен, Д. Маккей, 1977). Чистую культуру возбудителя туберкулеза на свернутой кровяной сыворотке впервые получил Р. Кох в 1882 г.
Со времени открытия возбудителя туберкулеза Р. Кохом прошло более 100 лет. За этот период во всех странах большое внимание уделяли изучению этой инфекции. Ведущими учеными нашей страны (С.Н. Вышелесский, 1940; В.Е. Щуревский, 1976; А.С. Донченко, 1971, 1989; Н.П. Овдиенко, 1990; М.А. Сафин и соавт., 1992; Ю.А. Макаров, 1993; В.Г. Луницын и соавт., 1994; Н.А. Шкиль, 1998; Н.М. Колычев и соавт., 2001; Н.И. Прокопьева, 2004; А.Х. Найманов, 2009 и др.) сделан большой вклад в изучение биологии возбудителя, его источников и резервуаров, патогенеза, клинического проявления, патологической анатомии и эпизоотологии.
Существенное место в диагностике туберкулеза занимают бактериологическое исследование, включающее микроскопию мазков, культуральное и биологическое исследования. Известно, что восприимчивость разных видов лабораторных животных к микобактериям туберкулеза неодинакова и зависит от вирулентности возбудителя, дозы, метода введения и чувствительности к нему макроорганизма (Ю.А.Макаров и соавт., 1990; М.А. Сафин и соавт., 1992). На этом принципе построен метод определения вида возбудителя с помощью биологической пробы (А.С. Донченко и соавт., 2004; Н.П. Овдиенко, 2006).
Биологические исследования, согласно «Наставлению по диагностике туберкулеза животных» (М., 2002), могут длиться до 6 мес., поэтому основным направлением научного поиска в настоящее время является сокращение сроков постановки биологической пробы. В связи с этим для индикации и идентификации возбудителей туберкулеза до вида актуальным является поиск новых видов и пород (моделей) лабораторных животных, более восприимчивых к возбудителям туберкулеза по сравнению с используемыми в настоящее время.
Цель исследований – усовершенствовать способ биологической диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных на основе новых экспериментальных моделей (перепела и карликовые кролики).
Задачи исследований:
– провести комплексное изучение использования перепелов в качестве экспериментальной модели для биологической диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных;
– осуществить комплексное изучение использования карликовых кроликов в качестве экспериментальной модели для биологической диагностики туберкулеза сельскохозяйственных животных;
– усовершенствовать схему дифференциальной диагностики туберкулеза с использованием в биологической пробе перепелов и карликовых кроликов.
Научная новизна работы. Предложены новые способы постановки биологической пробы с целью сокращения сроков постановки диагноза на туберкулез и типизации микобактерий при использовании в качестве лабораторных животных перепелов 41-суточного возраста и карликовых кроликов живой массой 1,0 – 1,3 кг.
Установлено, что перепела восприимчивы к возбудителю туберкулеза птичьего вида. Определена оптимальная заражающая доза M. avium (1,0 ЕД) для перепелов, необходимая для воспроизведения инфекционного процесса.
Выявлено, что карликовые кролики более восприимчивы к туберкулезу, чем кролики породы Советская шиншилла. Использование карликовых кроликов позволяет сократить сроки постановки диагноза на 19 суток. Определена оптимальная заражающая доза микобактерий бычьего и птичьего видов (0,1 ЕД).
Изучены патологоанатомические особенности проявления инфекционного процесса туберкулеза у перепелов и карликовых кроликов и индексы пораженности внутренних органов.
Использование в биологической пробе перепелов и карликовых кроликов повышает диагностическую эффективность в 1,5 раза (ускоряет постановку диагноза на 15 суток), экономический эффект повышается в 1,45 – 1,66 раза.
Приоритет выполненных исследований подтвержден двумя патентами Российской Федерации: «Способ постановки биологической пробы для определения видовой принадлежности микобактерий» (№ 2311872, А61В 10/00 от 10.12.2007), основанный на включении в биопробу карликовых кроликов, и «Способ постановки биологической пробы для определения видовой принадлежности микобактерий» (№ 2339700, А61В 10/00 от 27.11.2008), основанный на включении в биопробу перепелов.
Теоретическая и практическая значимость. Полученные экспериментальные данные показывают высокую диагностическую эффективность использования перепелов и карликовых кроликов в биологической пробе при типизации микобактерий. Их практическое использование при диагностике туберкулеза позволит сократить сроки постановки биологической пробы, повысить информативность патологоанатомических исследований и снизить затраты. На основании результатов исследований возможно широкое использование этих животных в научно-исследовательских и практических учреждениях ветеринарного профиля при проведении лабораторных исследований на туберкулез.
Апробация полученных результатов. Материалы диссертационной работы доложены на: международной научной конференции СО РАСХН (Краснообск, 2004); II международной научно-практической конференции молодых ученых СО РАСХН (Краснообск, 2006); международной конференции молодых ученых ГНУ СибНИИСХ (Омск, 2006); VIII Сибирской ветеринарной конференции по проблемам ветеринарной медицины домашних животных НГАУ (Новосибирск, 2008); III международной научно-практической конференции молодых ученых (Новосибирск, 2008); международной научно-практической конференции, посвященной 70-летию со дня основания ИЭВСиДВ (Краснообск, 2010); заседаниях ученого совета ГНУ ИЭВСиДВ Россельхозакадемии (2007, 2008, 2009, 2010 гг.).
Публикация результатов исследований. По теме диссертации опубликовано 11 научных работ, в том числе одна статья в рецензируемом научном журнале, рекомендованном ВАК Минобразования и науки РФ («Сибирский вестник сельскохозяйственной науки»).
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 137 страницах компьютерного текста и включает разделы: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы, практические предложения, список литературы и приложения. Диссертация иллюстрирована 13 таблицами, 4 рисунками. Список литературы включает 214 источников, в т.ч. 36 зарубежных авторов.
