Введение к работе
Врожденная или приобретенная недостаточность иммунологических механизмов защиты организма приводит к нарушению функционирования отдельных звеньев иммунной системы, появлению инфекционных осложнений, аутоиммунной патологии, аллергических заболеваний.
В настоящее время сложились условия для перехода от эмпирических исследований к патогенетическому подходу изучения вторичных иммунодефицитных состояний, выявления механизмов иммунологических процессов и оценке их роли в этиопатогенезе конкретных заболеваний. Такой подход подразумевает комплексное изучение различных функций, реализуемых иммунокомпетентными клетками в процессе иммунного ответа, каковыми являются: распознавание, активация, пролиферация, дифференциров-ка и регуляция. Полноценная реализация функций иммунокомпетентных клеток во многом определяется их генетической стабильностью. Генетическая стабильность может быть охарактеризована состоянием струоуры ДНК лимфоцитов и их способностью к репарации ДНК.
Впервые теоретическое обоснование возможной роли повреждений ДНК в развитии иммунодефицитных состояний было сделано G. Harris (1982, 1985) при изучении многих наследственных заболеваний с дефектами репарации ДНК.
За последние годы в литературе накоплены экспериментальные данные о роли повреждений ДНК лимфоцитов периферической крови в развитии вторичных иммунодефицитных состояний при различных заболеваниях. А. В. Карауловым и Є. Ю. Москалевой было обнаружено значительное снижение способности лимфоцитов периферической крови к репарации ДНК и повышение спонтанного репаративного синтеза ДНК при неспецифических заболеваниях легких, остром инфаркте миокарда, рассеяннном склерозе.
Также было показано, что свежевыделенные ядросодержащие клетки крови здорового человека практически не содержат спонтанных разрывов ДНК и могут быть использованы для индикации различных воздействий.
При заболеваниях, сопровождающихся снижением способности лимфоцитов периферической крови к репарации ДНК (неспецифических заболеваниях легких, остром инфаркте миокарда, рассеянном склерозе) обнаружено и накопление повреждений в ДНК этих клеток. Аналогичные повреждения обнаружены и при иммунизации здоровых . добровольцев (Караулов. 1991).
Снижение способности лимфоцитов к репарации ДНК и накопление повреждений в ДНК лимфоцитов периферической крови человека при заболеваниях рассматривается как один из неизвестных ранее механизмов нарушения функций иммунокомпетентных клеток, приводящих к формированию временной иммунологической недостаточности у человека.
В связи с этим представляется крайне актуальным исследовать, насколько широко данное явление встречается при социально значимых заболеваниях, сопровождающихся развитием вторичных иммунодефицитных состояний.
ЦЕЛЬЮ работы является изучение повреждений ДНК по скорости щелочной денатурации ДНК лейкоцитов периферической крови и их способности к репарации ДНК в сравнении с оценкой иммунного статуса у больных с различными заболеваниями, часто сопровождающихся развитием вторичных иммунодефицитных состояний: при бруцеллезе, при гнойно-септических осложнениях у хирургических больных и при вирусном гепатите В.
ЗАДАЧИ исследования:
-
Исследование и оценка показателей иммунного статуса;
-
Оценка способности лимфоцитов периферической крови к репарации ДНК;
-
Изучение структуры ДНК лейкоцитов периферической крови по скорости щелочной денатурации ДНК лизатов клеток у больных при хроническом бруцеллезе, при гнойно-септических осложнениях у хирургических больных и у больных вирусным гепатитом в.
-
Проведение сравнительного анализа влияния иммунокорректоров, используемых при лечении больных хроническим бруцеллезом, по исследуемым показателям скорости щелочной денатурации ДНК ЛПК и их способности к репарации ДНК лимфоцитов в сравнении с классическими показателями иммунного статуса.
Новизна работы заключается в новом подходе к проблеме изучения механизмов развития вторичной иммунологической недостаточности с использованием параметров генетической стабильности иммуннокомпетентных клеток.
Впервые показано, что при инфекционных заболеваниях, сопровождающихся развитием иммунодефицитных состояний, — у больных хроническим бруцеллезом, у хирур-
гичсских больных с гнойно-септическими осложнениями и у больных с вирусным гепатитом В — наблюдаются вырыженные нарушения структуры ДНК лейкоцитов периферической крови, что позволяет рассматривать скорость щелочной денатурации ДНК D как важный прогностический признак при оценке иммунного статуса.
Обнаружена эффективность тимогексина при использовании в качестве иммуно-корректора у больных хроническим бруцеллезом, выявлена его способность повышать генетическую стабильность лимфоцитов in vivo и in vitro и защитное действие тимогексина в отношении перекисных соединений, отмечена высокая клиническая эффективность этого рпепарата, оцениваемая по исчезновению основных симптомов болезни. Использование бруцеллезной вакцины при лечении хронического бруцеллеза, напротив, приводило к сохранению низких показателей клеточного иммунитета.
Полученные результаты свидетельствуют о том, что изученные показатели — скорость щелочной денатурации ДНК лейкоцитов D и способность лимфоцитов к репарации ДНК — могут быть использованы для регистрации антигенных иммунотоксических нагрузок в клинической и экологической иммунологии.
Теоретическое и практическое значение работы заключается:
-
В разработке новых подходов в исследовании механизмов развития вторичной иммунологической недостаточности при бруцеллезе, хирургических больных и при вирусном гепатите В, основанных на определении повреждений в структуре ДНК ЛПК и их способности к репарации ДНК.
-
В установлении взаимосвязи между определяемыми показателями генетической стабильности лимфоидных клеток и клиническими проявлениями вторичной иммунологической недостаточности.
-
В оценке прогностической значимости исследуемых показателей у хирургических больных с гнойно-септическими осложнениями и у больных с вирусным гепатитом В.
, 1. При изученных заболеваниях, сопровождающихся вторичными иммунодефицит-ными состояниями, обнаруживаются повреждения структуры ДНК лимфоцитов и гра-нулоцитов периферической крови и снижение способности лимфоцитов к репарации-ДНК.
-
Действие тимогексина в качестве иммуномодулятора при бруцеллезе, в отличие от лечебной бруцеллезной вакцины, повышает генетическую стабильность лимфоцитов in vivo и in vitro, оцениваемую по степени повреждения ДНК, способствует быстрому и эффективному восстановлению иммунного статуса.
-
Сопоставление степени изменения величины D и показателей клеточного иммунитета при гнойно-септических осложнениях хирургических заболеваний и при вирусном гепатите В позволяет заключить, что снижение величины D в лимфоцитах и гранулоцитах периферической крови коррелирует с тяжестью клинического состояния в большей степени, чем снижение субпопуляций СГМ'-лимфоцитов и ммунорегуляторного индекса.
Материалы работы докладывались и обсуждались на: II Всесоюзном симпозиуме «Теоретические и прикладные аспекты молекулярной биологии» (Самарканд, 1S91); на I Всесоюзном симпозиуме «Повреждение генома клетки» (Ивано-Франковск, 1S91); Московском научном обществе иммунологов (Москва, 1992, 1997); на IV Международном конгрессе «Иммунореабилитация и реабилитация в медицине» (Сочи, 1998); на X Международном конгрессе иммунологов (Дели, І998).
По теме диссертации опубликовано 9 научных работ.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ
