Введение к работе
Актуальность исследования
Самой распространенной, неконтролируемой и длительное время существующей в организме преимущественно в латентной форме среди вирусных инфекций человека считается герпетическая. Её возбудитель — вирус простого герпеса (ВПГ) выявляется у 95-98% взрослого населения. Герпетическая инфекция может приобретать крайне тяжелые формы, создавать благоприятную основу для внутриутробного инфицирования плода, если она протекает на фоне иммунодефицита, который характеризует беременность (Лавров В.Ф. и др., 2006; Маматказина Р.Р. и др., 2007). В период имплантации и раннего эмбриогенеза при негативном воздействии ВПГ возникает первичная плацентарная недостаточность, которая приводит к самопроизвольному прерыванию беременности, задержке внутриутробного развития плода (Нисевич Л.Л. и др., 2007). Инфицирование плода в более поздние сроки не вызывает формирования грубых дефектов развития, тем не менее, в этих случаях может произойти нарушение функциональных механизмов дифференцировки клеток и тканей. Наличие активной герпес-вирусной инфекции у матери после 32 недель беременности приводит к инфицированию плода в 40-60% случаев. В это время регистрируется также развитие плацентарной недостаточности. Появляются нарушения функционального состояния плода, многочисленные органические изменения во всех отделах плаценты: развиваются патологические процессы в ее различных ферментных системах, изменения маточно-плацентарно-плодового кровотока (Тютюнник В.Л. и др., 2003; Вареница А.Н. и др., 2006; Башмакова Н.В. и др., 2007; Курманалиева З.Б., 2007; Haun L. et al., 2007; Anzivino E.et al., 2009; Pinninti S.G. et al, 2010). Подобная ситуация привела к пересмотру взглядов на герпетическую инфекцию, и заставила признать ее роль в развитии различных акушерских и перинатальных патологических состояний.
Несмотря на значительное число научных исследований, полученные в них данные являются неполными, порой противоречивыми. Прежде всего, это касается этиопатогенетической роли ВПГ в развитии недостаточности фетоплацентарной системы, практически всегда сопровождающейся нарушением гормонального баланса. На наш взгляд, недостаточно зарегистрировать изменения, происходящие в гормональном фоне, необходимо раскрыть причины найденного патологического состояния. Так как предшественником всех стероидных гормонов является холестерин, то было бы целесообразно проанализировать его содержание и обмен, включая исследование ферментов стероидогенеза, их регуляторов и коферментов. Оценив доступную современную литературу, нами не было обнаружено исследований холестеринового метаболизма при беременности, осложненной обострением герпес-вирусной инфекции, и работ, посвященных изучению факторов, приводящих к изменениям концентрации стероидов при инфекционных процессах у матери.
На основании вышеизложенного целью нашей работы являлось раскрытие основных закономерностей синтеза и превращения холестерина в плаценте при беременности, осложненной обострением герпес-вирусной инфекции.
Задачи исследования
-
Оценить процессы синтеза холестерина в фетоплацентарной системе при нормально протекающей беременности и выявить их нарушения при гестации, осложненной обострением герпес-вирусной инфекции.
-
Проанализировать влияние изменений холестеринового обмена на содержание стероидных гормонов при беременности, осложненной обострением герпес-вирусной инфекцией, в сравнении с физиологически протекающей гестацией.
-
Выявить процессы деградации холестерина и стероидогенеза в плаценте при беременности, осложненной обострением герпес-вирусной инфекции.
-
Установить взаимосвязь изменений холестеринового обмена и ферментативного метаболизма путем определения гистохимической картины тканей плаценты.
-
Разработать модель, позволяющую рассмотреть изменения конформационной структуры стероидов в плацентарном барьере и отметить ее вариабельность в физиологических условиях и при поражении организма вирусной инфекцией.
Научная новизна и научная значимость
Выявлена динамика изменения содержания холестерина в плаценте в зависимости от тяжести инфекционного процесса (герпес-вирусного) на различных этапах беременности, заключающаяся в том, что наибольшее уменьшение концентрации стероида было обнаружено при титре антител класса Ig G к ВПГ 1:12800.
Установлено, что при изменении содержания холестерина снижается концентрация половых стероидных гормонов: прогестерона, дегидроэпиандростерона, эстриола, эстрадиола в периферической крови беременной и в плаценте во время обострения герпес-вирусной инфекции.
Изучены этапы биосинтеза холестерина в плаценте и получены гистохимические доказательства его нарушения при обострении герпес-вирусной инфекции во время беременности.
Обнаружено, что в нарушении биосинтеза холестерина в плаценте, возможно, важную роль играют изменения конформационной структуры молекул под влиянием токсических продуктов герпес-вирусной инфекции.
Новым является и нарушение адекватности регуляторных механизмов ферментативных реакций, участвующих в обмене холестерина в плаценте при обострении герпес-вирусной инфекции. На основании комплексной оценки гистохимических реакций, доказано изменение активности вторичных мессенджеров: гуанилатциклазы и аденилатциклазы, NO-синтазы, поставщиков кофермента НАДФ, а также источников свободных радикалов.
Разработаны новые модификации способов, позволяющих на гистохимическом уровне оценить в плаценте активность процесса биосинтеза холестерина на различных его этапах.
Практическая значимость работы
Результаты работы пополняют фундаментальные знания, позволяющие прогнозировать нарушения продукции основных стероидных гормонов, на основании изменения холестеринового метаболизма во время беременности, протекающей на фоне обострения герпес-вирусной инфекции.
Установленные закономерности изменения содержания холестерина при обострении герпес-вирусной инфекции, оказывающее влияние на синтез гормонов фетоплацентарного комплекса (прогестерона, эстрадиола, эстриола, дегидроэпиандростерона и кортизола) могут служить основой для разработки эффективных методов прогнозирования и профилактики плацентарной недостаточности.
Полученные данные о закономерностях синтеза холестерина в плаценте позволяют спрогнозировать не только течение беременности, рост и развитие плода, но и сформировать представление о первых годах жизни ребенка.
Положения, выносимые на защиту
-
При обострении герпес-вирусной инфекции уменьшается активность биосинтеза холестерина в плаценте в сопоставлении с физиологической беременностью, что доказывается гистохимической оценкой этапов образования холестерина.
-
В плаценте и в периферической крови на разных сроках осложненной обострением герпес-вирусной инфекции беременности происходят существенные сдвиги содержания стероидных гормонов: снижение концентрации прогестерона, дегидроэпиандросерона, эстрогенов и повышение концентрации кортизола.
-
Нарушение биосинтеза холестерина в плаценте при активации герпес-вирусной инфекции оказывает прямое влияние на интенсивность процессов синтеза гормонов.
-
Изменение метаболизма холестерина в фетоплацентарной системе при осложненной герпес-вирусной инфекцией беременности сопровождалось нарушением регуляторных процессов, таких как активность вторичных мессенджеров, источников свободных радикалов, поставщиков кофермента НАДФ.
-
Биосинтез холестерина в плаценте изменяется под воздействием лазерного облучения и при добавлении взвеси вируса герпеса в инкубационный раствор реакции на выявление ферменов, участвующих в данном процессе.
Апробация работы
Основные положения диссертации представлены на областной конференции «Фетоплацентарная система при герпесной инфекции» (Благовещенск, 2003); на II съезде врачей-пульмонологов Сибири и Дальнего Востока, сателлитном симпозиуме (Благовещенск, 2007); III Всероссийской научно-практическая конференция с международным участием «Фундаментальные аспекты компенсаторно-приспособительных процессов» (Новосибирск, 2007); на VI Сибирском физиологическом съезде (Барнаул, 2008); на Всероссийской научно-практической конференции "Здоровье девочки, девушки, женщины" (Томск, 2008); на Всероссийской научно-практической конференции, посвященной 55-летию образования ЧГМА «Актуальные проблемы клинической и экспериментальной медицины» (Чита, 2008); на Научном симпозиуме «Механизмы формирования фетоплацентарной недостаточности при вирусном повреждении организма беременных» (Благовещенск, 2008); на II Международной конференции «Ранние сроки беременности: проблемы, пути решения, перспективы» (Москва, 2009); на Международной научной конференции «Фундаментальные и прикладные исследования» (Бразилия, 2009); на Межведомственной научно-практической конференции с международным участием «Современные проблемы исследований в биологии» (Благовещенск, 2009).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 44 печатных работы, из них в журналах, рекомендованных ВАК Минобразования и науки РФ – 19, монография – 1 (в соавторстве).
Структура и объем диссертации
Диссертация изложена на 273 страницах, состоит из введения, 10 глав собственных данных, обсуждения полученных результатов, выводов и списка цитируемой литературы. Работа иллюстрирована 2 схемами, 41 рисунком и 15 таблицами.
Библиографический список включает 567 литературных источников: 227 отечественных и 340 зарубежных авторов.
