Введение к работе
Актуальность проблемы
Частота бесплодных браков на территории России колеблется от 8% до 17,8%, в отдельных регионах превышая определенный ВОЗ критический уровень 15%, при котором бесплодие может рассматриваться как фактор, значительно влияющий на демографические показатели и представляющий собой государственную проблему. Важнейшим достижением в лечении бесплодия явилось внедрение в клиническую практику методов экстракорпорального оплодотворения (ЭКО). Эффективность ЭКО в настоящее время не превышает 35-40%, и около трети всех беременностей прерывается на ранних сроках (Кулаков В.И., Корнеева И.Е., 2001; Адамян Л.В., Торганова В.А., 2002). Причины отрицательных результатов часто остаются неизвестными.
Стимуляция суперовуляции в цикле ЭКО проводится на фоне существующих структурно-функциональных изменений женской репродуктивной системы и других хронических заболеваний. При этом происходит созревание гораздо большего количества фолликулов, чем во время физиологического менструального цикла. Эти факторы могут являться причинами того, что не у всех женщин созревание фолликулов в цикле ЭКО происходит нормально и, следовательно, далеко не всегда удается получить ооциты надлежащего качества, а затем добиться наступления беременности и рождения ребенка (Кулаков В.И., Корнеева И.Е., 2001).
В фолликуле существует гематотканевой барьер, функцией которого является высокое сопротивление диффузному потоку и избирательная проницаемость. В доступной литературе найдены единичные сведения о его строении и функционировании.
Фолликулярная жидкость синтезируется фолликулярным эпителием, расположенным вокруг ооцита второго порядка и является микроокружением развивающегося ооцита. В нее адсорбируются из крови и синтезируются клетками гранулёзы гормоны, факторы роста и другие вещества. Избыток или недостаток биологически активных веществ в фолликулярной жидкости оказывает негативное влияние на развитие ооцита (Яманова М.В. и соавт., 2004). Фолликулярная жидкость представляет большой интерес для исследователей, поскольку она легко может быть получена в достаточном количестве во время процедур вспомогательной репродукции и является единственной натуральной средой для ооцитов, обладающей всеми необходимыми компонентами (Грищенко В.И и
соавт., 1999). Чаще всего в фолликулярной жидкости определяют содержание половых гормонов и других биологически активных веществ (Хонина Н.А. и соавт., 2005; Anifandis G., Koutselini Е., Louridas К. Et al., 2005; Costa L.O., Mendez M.S., Ferriani R.A. et al., 2004; Mendoza C, Ruiz-Requena E., Ortega E. et al., 2002; Айзикович И.В., Айзикович Б.И., Леплина О.Ю. и др., 2006). Эти исследования сложны и дороги, что затрудняет их внедрение в повседневную клиническую практику. Данных об уровне веществ низкой и средней молекулярной массы и показателей свободнорадикального окисления в ФЖ в доступной литературе не обнаружено. Также нет сведений об исследовании морфологической картины фолликулярной жидкости методом клиновидной дегидратации.
Цель исследования: исследование местных и системных условий созревания ооцитов при стимуляции суперовуляции и их влияния на результаты
эко.
Задачи исследования:
-
Изучить показатели свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности в плазме крови и фолликулярной жидкости женщин, проходивших лечение бесплодия методом ЭКО.
-
Исследовать уровни веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови и фолликулярной жидкости и определить проницаемость для них гематофолликулярного барьера при различных видах бесплодия.
-
Изучить морфологическую картину плазмы крови и фолликулярной жидкости у женщин с бесплодием.
-
Выявить особенности реакции женской репродуктивной системы на стимуляцию суперовуляции.
Научная новизна
Впервые исследованы показатели свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности в плазме крови и фолликулярной жидкости женщин с бесплодием, и показаны возможности их влияния на результаты лечение методом ЭКО.
Впервые изучено содержание веществ низкой и средней молекулярной массы в плазме крови и фолликулярной жидкости женщин с различными видами бесплодия и проницаемость для них гематофолликулярного барьера. Установлено, что хронические воспалительные заболевания придатков матки и эндокринные нарушения могут приводить к патологическому повышению проницаемости гематофолликулярного барьера.
Впервые исследована морфологическая картина плазмы крови и фолликулярной жидкости у женщин с бесплодием, проходивших лечение методом ЭКО. Выделены основные типы фаций - нормальные и патологические.
Впервые показано, что фолликулы средних размеров в наибольшей степени соответствуют характеристикам преовуляторных фолликулов - и по размерам, и по свойствам фолликулярной жидкости.
Практическая значимость работы
Разработан способ прогнозирования результатов лечения бесплодия методом ЭКО на основе исследования показателей свободнорадикального окисления и антиоксидантной активности в фолликулярной жидкости (Патент РФ на изобретение №2357673 от 10.06.2009).
Обоснована возможность использования метода клиновидной дегидратации фолликулярной жидкости для оценки качества ооцитов.
Показано прогностическое значение размеров фолликулов на момент пункции для результатов ЭКО.
Основные положения, выносимые на защиту:
1. У женщин с неудачным исходом программы ЭКО наблюдаются признаки
эндогенной интоксикации и повышение уровня свободно-радикального окисления
в плазме крови, что приводит к повышению проницаемости
гематофолликулярного барьера и создает неблагоприятный фон в организме для
наступления беременности.
2. Стимуляция суперовуляции в цикле ЭКО приводит к созреванию
большого количества фолликулов, которые к концу цикла оказываются разных
размеров, и в отличие от нормального менструального цикла, преовуляторными
фолликулами являются не самые большие, а средние.
3. Вследствие повышенной проницаемости гематофолликулярного барьера
могут образовываться фолликулы объемом 5 мл и более (диаметром более 20 мм),
в которых созревают некачественные ооциты.
Внедрение в практику
Разработанный способ прогнозирования результатов лечения бесплодия методом экстракорпорального оплодотворения используется в работе клиники «АИСТ-НН».
Апробация работы
Материалы и основные положения диссертации доложены и обсуждены на научно-практическом семинаре «Новые технологии в медицине и биологии» (Саров, 18-19 апреля 2007 г.), межинститутской конференции молодых ученых, посвященной
100-летию акад. В.Н.Черниговского «Механизмы регуляции и взаимодействия физиологических систем организма человека и животных в процессах приспособления к условиям среды» (Санкт-Петербург, 25-27 сентября 2007 г.), П Международном молодежном медицинском конгрессе «Санкт-Петербургские научные чтения-2007» (Санкт-Петербург, 5-7 декабря 2007 г.), на совместном заседании кафедр патологической физиологии, патологической анатомии, нормальной анатомии, биологии ГОУ ВПО «Нижегородская государственная медицинская академия» (Нижний Новгород, 6 октября 2010 г., протокол №6).
Автором лично обследовано 70 пациенток, выполнено 70 трансвагинальных пункций, обработано 230 проб фолликулярной жидкости и 70 проб плазмы крови, выполнена статистическая обработка данных, проанализированы полученные результаты.
Публикации
По материалам диссертации опубликовано 7 научных работ, в том числе 2 -в журналах, рекомендованных ВАК РФ, получен 1 патент на изобретение.
Объем и структура диссертационной работы
