Введение к работе
Актуальность темы исследования
В последние годы проясняются механизмы атерогенеза, связанные с цитокин-ной активностью ряда белковых факторов. Выявлена роль ферментов класса ами-ноацил-тРНК-синтетаз — ключевых для обмена веществ. В частности - тирозил-тРНК-синтетаза (АРСаза), обладает цитокинной активностью и стимулирует ангио-генез, способствуя, тем самым, атерогенезу [Tzima Е. et al, 2003; Wakasugi К., Slike В.М., Hood J., 2002]. Модифицированная путем эндогенного частичного протеолиза триптофанил-тРНК-синтетаза (ТРСаза), наоборот, обладала сильным антиангио-генным и, следовательно, антиатерогенным действием [Ibba М. and Soil D., 2001]. АРСазы являются ключевым звеном в обеспечении точности трансляции генетического кода, катализируя реакцию специфического аминоацилирования тРНК соответствующей аминокислотой. АРСазы обеспечивают реализацию генетического кода, обеспечивая соответствие аминокислот с их гомологичными тРНК. Следовательно, актуальность исследования ферментов внерибосомного этапа белкового синтеза связана и с дополнительными неканоническими функциями АРСаз. В этой связи на передний план выходят вопросы регуляции этих функций фермента и возможность коррекции последней с применением медикаментозных методов.
Факт, что «триаду Селье» составляют изменения в надпочечниках и тимусе (иммунной, эндокринной системах) и желудке. Наряду с этим, бурное развитие иммунологии и кардиофармакологии в последние годы привело и к новому пониманию состояния «стресс», и к новым интерпретациям связи между изменениями в сердечно-сосудистой системе и развитием адаптационного синдрома [Селье Г., 1969, По-рядин Г.В., 2001; 2003]. При этом в последние годы получены данные, послужившие базой для выделения основных принципов патогенетической терапии состояния «стресс»: защита мембраны и коррекция энергетического обеспечения клетки, а также нормализация механизмов трансмембранного переноса и внутриклеточного распределения ионов и жидкости [Dimmeler S., Zeiher A.M., 2004]. Это значит, что эффективность антиатеросклеротических препаратов определяется их способностью защищать сосудистую стенку [Агеев Ф.Е. и соавт., 2001; Намаканов Б.А., Расулов М.М., 2009]. Следовательно, изучение клинической эффективности препаратов, способных влиять непосредственно на метаболические процессы актуально. Одним из таких препаратов является адаптоген широкого спектра действия трекрезан, обладающий антиокислительной активностью, т.е. действующий на одно из звеньев метаболизма липидов [Расулов М.М., Воронков М.Г., 2001]. Однако, несмотря наотме-
ченныи интерес, в кардиологической практике препарат ранее не применялся, что и определило главную цель настоящего исследования.
Цель исследования. Выявление механизма нарушений обмена протеолипидов в цитоплазме эндотелиоцитов при развитии атеросклероза и раскрытие новых возможностей его коррекции на практике.
Для достижения цели необходимо было решить следующие задачи. Задачи исследования:
-
Освоить способы получения участка гена ТРСазы и геномной ДНК человека, пригодные для дальнейших скрининговых исследований.
-
Определить физико-химические и физиологические характеристики ТРСазы.
-
Выявить изменения характеристик ^РСазы при развитии атеросклероза в эксперименте под влиянием трекрезана.
-
Установить возможности коррекции развития экспериментального атеросклероза с помощью адаптогенного препарата трекрезан.
Научная новизна. В результате проведенных исследований впервые:
подобраны и освоены способы получения участка гена ТРСазы и геномной ДНК человека, пригодные для скрининговых исследований;
изучены характеристики ТРСазы;
установлено, что трекрезан стимулирует активность ТРСазы;
установлено, что трекразан обладает противоатеросклеротическим действием;
— предложена новая методика профилактики и коррекции атеросклероза.
Практическое значение работы
-
Подобрана методика выделения участка гена ТРСазы и геномной ДНК человека, пригодные для скрининговых исследований;
-
ТРСаза существует в следующих формах: с молекулярной массой 60 кД, молекулярной массой 51 кД, молекулярной массой 40 кД и молекулярной массой 24+14 кД. При этом, наиболее активно тормозит развитие атерогенеза форма с молекулярной массой 40 кД.
-
Активность ТРСазы под влиянием трекрезана увеличивается на 20-35% в зависимости от дозы и пути введения препарата.
-
Результаты исследования указывают на возможность использования в установленном порядке новой методики профилактики и коррекции атеросклероза в практической медицине.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
-
ТРСаза является одним из ведущих звеньев в сложной цепи синтеза белка, как в норме, так и при развитии атеросклероза.
-
Активность ТРСазы увеличивается при воздействии трекрезана.
-
Атеросклеротические бляшки служат показателем дезадаптации функции эндотелия крупных сосудов.
-
Применение трекрезана в условиях экспериментального атеросклероза тормозит развитие атеросклеротических бляшек.
Организация и методы исследования. Исследования проводились на базах следующих организаций: МГЛУ хим-биофак, ИрИХ СО РАН.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и обсуждены:
на 2-ой всероссийской научно-практической конференции (Волгоград, 2010).
на IV международной конгресса. «Фитотерапия и народная медицина эпохи Авицены» (Душанбе, 2010).
Публикация работы. По теме диссертаций опубликовано 2 научные работы в изданиях списка ВАК РФ и получено 2 патента на изобретения.
Внедрение результатов работы в практику. Результаты работы внесены в курс чтения лекций по общей и частной патологии ГОУ ВПО МГЛУ.
Объем и структура диссертации. Работа построена по классическому образцу и состоит из следующих разделов: введение (6 страниц), обзор литературы (25 страниц), материалы и методы исследований (9 страниц), результаты собственных исследований (28 страниц), обсуждения результатов (29 страниц), выводов, списка литературы (241 источник, из них 61 отечественных и 180 иностранных). Вся работа занимает 132 страницы машинописного текста, иллюстрирована 12 таблицами, 25 рисунками.
