Введение к работе
изучении физиологии и патологии системы гемостаза и патогенеза тромбозов, а акже внедрение в практическое здравоохранение антиагрегантов, антикоагулянтов и ибринолитических средств, эта проблема по прежнему остается актуальной. Таким бразом, возникает необходимость поиска новых эффективных и удобных в римснешш средств коррекции функций гемостаза, влияющих на различные звенья зертывашы крови.
В последнее время внимание исследователей всего мира было обращено на эзможное применение п-3 шшпненасьпценньгх жирных кислот в качестве средств тучшения микроциркуляция и предотвращения тромбозов. Предпосылками для зучения влияния этих агентов на функции системы гемостаза послужили сообщения ада авторов, занимающихся эпидемиологическими исследованиями, о низком уровне :рдечно-сосудистых заболеваний и тромбозов у коренных жителей прибрежных шонов Японии, Севера Америки и других регионов, население которых употребляет в ищу большое количество рыбы и морепродуктов (Bjerregaard Р./1988, Dyerberg J./1979, yerbcrg J./ 1987, Hamazaki Т./1986, Innis S.M./1989, Naughton J.M./ 1986, Pisa Z.I 1982).
представителей этих этнических групп концентрация триглицеридов, тромбоксана 2, холестерина в лнпопротеидах низкой и очень низкой плотности, функциональная пгпвность тромбоцитов ниже, а уровень холестерина в липопротеидах высокой ютности, соотношение эйкозапентаеновая кислота/ арахидоновая кислота выше, по >авнснию с лицами, придерживающимися традиционной европейской диеты (Bang .0./1971, Dyerberg J./1979, Harris W.S./1989, Schmidt E.B./1991). Кроме того, включение
в рацион больших количеств морских продуктов приводит к экскреции метаболитов простаглавднпа Із и тромбоксаяа Аз, что также свидетельствует о более низкой степени риска развитая у них тромбозов (Fisher S./1986, Hamazaki Т./1986).
Показано, что подобные особенности связаны с различиями в составе потребляемых жиров, а именно со сниженным содержанием в рыбе и морепродуктах насыщенных, мононенасыщенных и п-6 полиненасыщенных (особенно арахидоновой) жирных кислот и большим содержанием в них п-3 полиненасыщенных жирных кислот (п-3 ПНЖК) (Bang Н.О./1976, Nordoy А./1992).
Опыт применения п-3 ПНЖК, в клинике также свидетельствует о возможности их использования с превентивной и лечебной целью при ИБС (Борников В.Т./ 1989, Карагодина З.В./ 1992, Пыж М.В./ 1993, Самсонов М.А./ 1992, Mehta J.L./ 1988), стенокардии (Калинкина О.М./1990), гипертонической болезни (Карагодина З.В./1992, Самсонов М.А./ 1992, Schmidt Е.В./ 1994), гипертриглицеридемии (Harris W.S./ 1993, Liebich Н.М./ 1991), атеросклерозе (Hay C.R.M./ 1982, Levine Р.Н./ 1989) и других заболеваниях (Burns СР./ 1994, Henneickevonsepelin Н.Н./1993).
Эти данные послужили основой для проведения работ по созданию лекарственных препаратов, в состав которых включены п-3 полиненасыщенные жирные кислоты, обладающих способностью предупреждать развитие и снижать степень выраженности тромбофилических проявлений атеросклероза, ишемической болезни сердца, нарушений мозгового кровообращения, сахарного диабета и других заболеваний. Следует, однако, отметить, что в России и других странах СНГ нет подобных лекарств, так как выпускаемые концентраты п-3 ПНЖК (полцен, эйконол, и некоторые другие) являются пищевыми добавками. Таким образом, представляется чрезвычайно важным поиск новых отечественных высокоэффективных лекарственных препаратов на основе п-3 ПНЖК для коррекции гемостазиологических нарушений.
Цель работы: Целью работы явилось определение специфической фармакологической активности и изучение механизма действия нового отечественного концентрата п-3 полиненасыщенных жирных кислот "Эпадсва".
Основные задачи исследования: Для достижения поставленной цели предусматривалось решение следующих задач:
1. Оценка влияния нового отечественного концентрата п-3 ПНЖК 'Эпадена" на агрегационную функцию тромбоцитов in vitro.
2. Изучение влияния "Эпадена" на высвобождение стимулированными
ромбоцитами тромбоцигарного фактора 4 и ингибитора активатора плазмпногена
каневого типа in vitro.
3. Исследование фармакодинамнки "Эпадена" в экспериментах на кроликах при
ведении внутримышечно или перорально высоких разовых доз.
4. Изучение фармакодинамики 'Эпадена" при длительном пероральном
зедении кроликам средних доз.
5. Исследование влияния "Эпадена" на процессы депонирования активатора
тазштогена тканевого типа в тканях.
6. Изучение способности "Эпадена" предупреждать развитие тромбофилических
тенений при моделировании иммобялизациониого шока.
Научная новизна: В соответствии с целями и задачами исследования впервые дло изучено влияние "Эпадена" на свертывающую систему крови. Было выявлено п-ибирующее воздействие этого средства на функциональную активность юмбоцитов in vitro и in vivo. Проведенные эксперименты позволили уточнить таиологическую роль п-3 полиненасыщенных жирных кислот в регуляции функций мостаза, а также дали возможность получить новые данные о механизме действия их биорегуляторов. Было изучено влияние одноразового введения больших доз п-3 мпшенасыщеявых жирных кислот на свертывающую систему крови. Впервые были щучены данные о влиянии п-3 ПНЖК на реакцию высвобождения из тромбоцитов твертого тромбоцигарного фактора и ингибитора активатора плазмнногена аневого типа in vitro. Впервые была показана способность п-3 ПНЖК вызывать понирование активатора плазмнногена тканевого типа в клетках эндотелия. Была [енена профилактическая активность "Эпадена", проявляющаяся в снижении [раженпости гемостазиологических нарушений, развивающихся при [мобилизационном шоке.
Практическая пенность: Настоящая работа является составной частью
индексных исследований по Государственной программе "Создание новых
карственных средств методами химического и биологического синтеза", проводимых
Гематологическом Научном Центре РАМН, Московском медицинском
эматологическом институте им. Н.А.Семашко и других учреждениях.
В результате проведенного исследования было показано, что новый счественный концентрат п-3 ПНЖК "Эпаден" обладает выраженным действием на нкциональную активность тромбоцитов in vitro и коагулологический потенциал
крови in vivo, препятствуя развитию активации процесса свертывания прі неблагоприятных воздействиях, а кроме того, вызывая накопление активаторі шіазминогена тканевого типа в клеточных депо и снижая плазменный уровеш фибриногена. Спектр выявленных фармакодипамических эффектов "Эпадена' позволил предполагать, что он явится эффективным средством профилактики и борьбь с предтромботическими состояниями.
Новый отечественный концентрат n-З полинснасыщенных жирных кислої "Эпаден" разрешен Фармкомитетом МЗ России для клинических испытаний протокол № 22 от 22 января 1996 г.
Апробация работы: Диссертационная работа доложена на заседанш Проблемной комиссии "Патология гемостаза" ГНЦ РАМН. Отдельные фрагменть работы были представлены на II (1995 г.) и III (1996 г.) Российском национально», конгрессе "Человек и лекарство", а также на других отечественных и международны? конференциях и симпозиумах, указанных в списке трудов по теме диссертации.
Объем и структура диссертапии: Диссертация объемом 129 страниц состоит и: введения, 4-х глав, в которые входят обзор литературы, материалы и метода исследования, результаты исследования и их обсуждение, выводы. Дисссртациошш работа содержит 28 таблиц и 10 рисунков. Список литературы включает 1Ї отечественных и 286 иностранных работ.
Публикации: По теме диссертации опубликовано 8 работ в отечественных і зарубежных журналах, сборниках, тезисах конференций.
Положения, выносимые на зашиту:
-
Новый отечественный концентрат n-З полиненасыщенных жирных кислої "Эпаден" обладает способностью снижать агрегацию тромбоцитов in vitro,
-
"Эпаден" in vitro способен предупреждать высвобождение тромбоцитарногс фактора 4 и ингибитора активатора шгазминогена тканевого типа из тромбоцитов при стимуляции их проагрегантами.
-
Разовое введение больших доз 'Эпадена" кроликам приводит к достоверные изменениям ряда коагулологических показателей, причем спектр и степеш вьфахенности этих изменений в определенной степени зависит от путей поступление и-3 ПНЖК в организм.
4. Хроническое введение кроликам "Эпадена" в эксперименте индуцирует
изменения как клеточного, так и плазменного звеньев гемостаза.
-
"Эпаден" способен вызывать накопление активатора плазминогена тканевого тша в клетках.
-
"Эпаден" может снижать выраженность тромбофиличеспк проявлений при юделировании иммобилизационного шока у животных, предварительно получавших тот концентрат n-З ПНЖК.
