Содержание к диссертации
Введение
ГЛАВА 1. Обзор литературы. И
1.1 .Фармакологическая коррекция дезадаптационных нарушений. 12
1.2.Общая характеристика адаптогенов. 12
1.3. Общая характеристика антиоксидантов . 14
1.4.Фармакологические свойства препаратов СЭГБ, 16
1.5,Фармакологические свойства препаратов АЛК. 19
Гб.Эпидемиология, этиология и патогенез ХСН. 20
1,7.Эпидемиология, этиология и патогенез НМК у больных с ХСН. 23
1.8.Резюме. 25
ГЛАВА 2. Материалы и методы 27
2.1.Характеристика условий проведения эксперимента и объектов 27
исследования.
2.2.Методы воспроизведения воздействий и состояний. 29
2.2.1 .Методы исследования адаптогенных свойств. 29
2.2.2. Метод моделирования хронической сердечной недостаточности . 31
2.2.3.Метод моделирования хронической недостаточности мозгового 31
кровообращения.
2.2.4.Метод моделирования хронической сердечной недостаточности, 31
осложненной недостаточностью мозгового кровообращения, 2.3.Биохимические методы. 32
2.3.1.Определение содержания катехоламинов. 32
2.3.2.Определение содержания серотонина и гистамина. 32
2.3.3.Определение содержания 11 -оксикортикостероидов. 33
2.4.Методы статистической обработки. 33
ГЛАВА 3. Исследование адаптогенных свойств препаратов сэгб (мемоплант, билобил, танакан, ревайтл гинкго) и АЛК (Берлитион, ЭСПА-ЛИПОН).
3.1.Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на переносимость крысами нормобарической нормокапнической гипоксической гипоксии.
3.2.Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на переносимость крысами физических нагрузок.
3.3. Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на течение иммобилизационного стресса у крыс .
3.4.Резюме. 38
ГЛАВА 4. Влияние препаратов сэгб (мемопланта, билобила) и алк (берлитиона, эспа-липона) на гормоналыю-медиаторный обмен интактных крыс .
4.1.Влияние мемопланта и билобила на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце, КБП интактных крыс.
4.1.1. Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце, КБП интактных крыс .
4.2.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце, КБП интактных крыс.
4.2.1 .Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание ГТ и СТ в крови, сердце, КБП интактных крыс.
4.3.Влияние мемопланта и билобила, берлитиона и эспа-липона на содержание П-ОКС в крови интактных крыс.
ГЛАВА 5. Влияние препаратов сэгб (мемопланта, билобила) и алк (берлитиона, эспа-липона) на течение недостаточности мозгового кровообращения .
5.1 .Содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП животных с НМК. 48
5.1.1 .Содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП животных с НМК. 50
5.2.Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на смертность крыс с НМК. 51
5.3.Влияние препаратов СЭГБ на содержание АД НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с НМК.
5.3.1.Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с нмк.
5.3.2.Влияние мемопланта и билобила на содержание 11-ОКС в крови крыс с НМК.
5.4.Влияние препаратов АЛК на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с НМК.
5.4.1.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс С НМК.
5.4.2.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание 11-ОКС в крови крыс с НМК.
ГЛАВА 6. Влияние препаратов сэгб (мемопланта, билобила) и алк (берлитиона, эспа-липона) на течение хронической сердечной недостаточности.
6.1 .Содержание АД, НА и ДА в крови, сердце И КБП крыс с НМК. 61
6. J. 1 .Содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН. 62
6.2.Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на смертность крыс с ХСН. 62
б.З.Влияние мемопланта и билобила на содержание АД НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с ХСН.
6.3Л .Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН.
6.4.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с ХСН.
6.4.1.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН.
6.5.Влияние препаратов СЭГБ (мемопланта, билобила) и АЛК.(берлитиона, эспалипона) на содержание 1 l-окс в крови крыс с ХСН,
ГЛАВА 7. Влияние препаратов сэгб (мемопланта, билобила) и алк (берлитиона, эспа-липона) на течение хронической сердечной недостаточности, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения .
7.1.Содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с ХСН, осложненной нмк.
7.1,1 .Содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН, осложненной НМК.
7.2.Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на смертность крыс с хсн, осложненной нмк.
7.3.Влияние мемопланта и билобила на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с хсн, осложненной нмк.
7.3.1.Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН, осложненной НМК.
7.3.2.Влияние мемопланта и билобила на содержание 11-ОКС в крови крыс с ХСН, осложненной нмк.
7.4.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание АД, НА и ДА в крови, сердце и КБП крыс с хсн, осложненной НМК.
7.4.1.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание ГТ и СТ в крови, сердце и КБП крыс с ХСН, осложненной НМК.
7.4.2.Влияние берлитиона и эспа-липона на содержание 11-ОКС в крови крыс с ХСН, осложненной НМК.
Заключение. 82
Выводы. 104
СПИСОК ЛИТЕРАТУРЫ
- Общая характеристика антиоксидантов
- Метод моделирования хронической сердечной недостаточности
- Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на течение иммобилизационного стресса у крыс
- Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце, КБП интактных крыс
Введение к работе
Одним из основных свойств организма является способность к адаптации, т.е. изменение реактивности и поддержание гомеостаза в соответствии с постоянной сменой условий внутренней и внешней среды [74]. Снижение адаптационных возможностей или перенапряжение механизмов адаптации, в ответ на патогенные воздействия, сопровождается ростом патологических состояний, обусловленных дисрегуляцией адаптивных механизмов, проявляющихся в виде так называемых "болезней цивилизации". Примерами дис-метаболической и дезадаптационной патологии являются хроническая сердечная недостаточность (ХСН), недостаточность мозгового кровообращения (НМК) и, особенно, сочетание патологии сердца и мозговых сосудов, в патогенезе которых важное место занимает нарушение активности центральных и периферических нейроэндокринных системам, перекисное окисление липи-дов (ПОЛ) и снижение адаптивных возможностей организма [8,62].
Для повышения устойчивости организма к воздействию неблагоприятных факторов используются лекарственные препараты различных групп, наиболее универсальными из которых являются адаптогени. Адаптогены обладают широким спектром фармакологического действия и повышают резистентность организма к широкому кругу повреждающих воздействий. Ведущую роль в механизме их действия играет способность регулировать гормо-нально-медиаторный баланс и ПОЛ [13, 94].
С развитием современного представления о перекисном окислении ли-пидов как об одном из универсальных патогенетических механизмов повреждения клеток и тканей связано формирование новых подходов в лечении заболеваний дисметаболической природы. Это послужило основной причиной для применения антиоксидантов в кардиологической и неврологической практике [56].
В последние годы получены убедительные экспериментальные и клинические подтверждения терапевтической эффективности адаптогенов при ХСН [98, 101, 134]. Однако, несмотря на успехи в фармакотерапии сердечнососудистых заболеваний, вопрос эффективного лечения ХСН и НМК остается до конца не решённым, поэтому поиск эффективных препаратов из группы адаптогенов является актуальным, а их назначение при данных заболеваниях патогенетически, экспериментально и клинически обоснованно.
Предпосылкой для нашего экспериментального исследования стал тот факт, что одной из важных сторон в механизме действия адаптогенов является антиоксидантная активность [12, 49, 47, 51, 58, 91]. В настоящее время одними из широко применяемых антиоксидантних средств стали препараты стандартизированного экстракта гинкго билоба (СЭГБ) и альфа-липоевой кислоты (АЛК). Большой спектр фармакологической активности СЭГБ и АЛК обуславливает их сходство с адаптогенами, что определило выбор лекарственных средств для данной работы.
В медицинской практике хроническая сердечная недостаточность, как правило, сопровождается сопутствующими заболеваниями, наиболее частое из которых недостаточность мозгового кровообращения. Это диктует необходимость разработки модели экспериментальной хронической сердечной недостаточности, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения наиболее приближенной к клинике (ХСН, осложненная НМК).
Учитывая данные ряда клинических испытаний, доказывающих не равноценную фармакологическую активность препаратов разных производителей, актуальным является сравнение фармакологической активности основных препаратов СЭГБ и этилендиаминовой соли АЛК, представленных на отечественном фармацевтическом рынке.
8 ЦЕЛЬ РАБОТЫ
Оценка адаптогенной активности и терапевтической эффективности препаратов стандартизированного экстракта гинкго би л оба и альфа-липоевой кислоты при экспериментальной хронической сердечной недостаточности и недостаточности мозгового кровообращения.
ЗАДА ЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ
1. Провести фармакологический скрининг при однократном и 30- дневном введении препаратов стандартизированного экстракта гинкго било- ба (мемоплант, бил об ил, танакан, ревайтл гинкго) и этилендиаминовой соли альфа-липоевой кислоты (берлитион, эспа-липон) на наличие адаптогенных свойств.
Изучить влияние мемопланта, билобила, берлитиона и эспа-липона при 60-дневном применении на показатели гормонально-медиаторного баланса (адреналин, норадреналин, дофамин, гистамин, серотонин, 11 -оксикортикоиды) крови, сердце, мозге у интактных крыс.
Разработать модель хронической сердечной недостаточности, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения.
Оценить терапевтическую эффективность мемопланта, билобила, берлитиона, эспа-липона у белых крыс на модели изолированной хронической сердечной недостаточности и недостаточности мозгового кровообращения, а также при хронической сердечной недостаточности, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения.
НА УЧНАЯ НОВИЗНА Доказано наличие адаптогенных свойств у препаратов стандартизированного экстракта гинкго билоба (СЭГБ). Показано, что адаптогенная активность у препаратов СЭГБ различных производителей (мемоплант, Dr. Schwabe; билобил, KRKA; ревайтл гинко, Ranbaxy Laboratories; танакан, Ip-sen International) не равнозначна. Её наличие, сопоставимое с суммарной защитной активностью жидкого экстракта элеутерококка (ЭЭ), отмечалось
9 только у 2-х представителей СЭГБ: мемопланта и б ил обил а. У танакана и ре-вайтл гинкго не обнаружено адаптивных свойств. Препараты альфа-липоевой кислоты (берлитион, эспа-липон) повышали защитные возможности организма животных только при хроническом введении.
При 2-х месячном введении исследуемые препараты (мемоплант, би-лобил, эспа-липон, берлитион) оказывали минимальное влияние на биохимические показатели (катехоламины, гистамин, серотонин, 11-оксикортикостеройды) интактных животных.
Была разработана комбинированная модель, характеризующаяся более глубокими, чем при хронической сердечной недостаточности и недостаточности мозгового кровообращения изменениями гормонального и медиатор-ного баланса и отражающая реальные условия развития патологии у человека, и поэтому являющаяся оптимальной экспериментальной моделью для изучения лекарств, эффект которых направлен на коррекцию сочетанных сердечно-сосудистых и сосудисто-мозговых нарушений.
Впервые показано, что препараты стандартизированного экстракта гинкго билоба и альфа-липоевой кислоты проявляли эффективность в условиях сочетай ной патологии - хронической сердечной недостаточности, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения.
Установлено, что терапевтическая активность препаратов СЭГБ и АЛК связана с их нормализующим влиянием на гормонально-медиаторный баланс, и проявлялась в достоверном повышении выживаемости подопытных животных.
В данной работе впервые проведено сравнительное исследование терапевтической эффективности препаратов СЭГБ и этилендиаминовои соли АЛК.
10 ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНА ЧИМОСТЬ
В результате проведенного скрининга выявлены новые адаптогены из группы стандартизированного экстракта гинкго билоба - мемоплант и билобил. Положительные результаты (снижение летальности опытных крыс, нормализация показателей гормонально-медиаторного баланса), полученные в ходе эксперимента, с участием препаратов стандартизированного экстракта гинкго билоба (мемоплант, билобил) и альфа-липоевой кислоты (берлитион, эспа-липон), а также расширение спектра фармакологической активности це-ребропротективных препаратов за счет адаптогенных свойств, позволяют использовать их в клинической практике у больных с дезадаптационной патологией; хронической сердечной недостаточностью, недостаточностью мозгового кровообращения и хронической сердечной недостаточностью, осложненной недостаточностью мозгового кровообращения.
Общая характеристика антиоксидантов
В основе механизма действия адаптогенов лежит их способность предупреждать гормонально-медиаторный дисбаланс в центральных и периферических структурах, возникающий при воздействии неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды.
Следующей чертой защитного механизма действия адаптогенов является мембранопротективное влияние, в основе которого лежит способность регулировать перекисное окисление липидов - ПОЛ [10, 24, 47, 85, 98, 105, 134].
Много работ доказали наличие у адаптогенов антиоксидантной и анти-гипоксической активности [1, 26, 36, 40, 44, 49, 51, 58, 77, 95, 98], способности препятствовать развитию стресс-синдрома, что в итоге можно квалифицировать как увеличение периода активной жизнедеятельности в условиях экстремальных воздействий [100, 161]; иммуномодулирующей активности, приводящей к увеличению активности специфических и неспецифических факторов иммунной защиты; кардиопротективного [13, 32] и церебропротек-тивного [43, 75, 76,95, 98, 101, 134] действий.
В медицинской практике на сегодняшний день широко применяются следующие препараты, обладающие адаптогенным действием: жидкий экстракт элеутерококка (ЭЭ), дибазол, пантокрин, сапарал, настойки женьшеня, заманихи, лимонника, аралии, родиолы розовой, левзей [61, 86].
Традиционными областями применения адаптогенов являются: повышение умственной и физической работоспособности, сопротивляемости организма в трудных и экстремальных условиях жизни и работы, профилактика и снятие явлений переутомления и перенапряжения, сокращение сроков ре-конвалесценции и восстановление нормальной дееспособности, профилактика синдромов гиподинамии и гипердинамии в обычной жизни, трудовой дея тельности и спорте. Наряду с традиционными областями применения адапто-генов известны факты их использование в терапии заболеваний эндокринной, нервной, дыхательной системы, желудочно-кишечного тракта, онкологических заболеваний и в кардиологической практике [46, 61, 98].
В экспериментальных и клинических исследованиях доказана терапевтическая эффективность адаптогенов при ХСН. Они препятствуют прогрес-сированию ХСН, уменьшают выраженность гипертрофии миокарда, повышают работоспособность экспериментальных животных. Кроме того, применение адаптогенов в терапии больных с хронической сердечной недостаточностью достоверно улучшает гемодинамические и биохимические показатели, усиливает эффективность дигоксина при одновременном снижении его побочных эффектов. В основе терапевтического действия адалтогенов при ХСН лежит умеренное инотропное действие и уменьшение постнагрузки. Известно, что их применение препятствует нарушению углеводного и ли-пидного обмена, снижает уровень тканевой гипоксии и приводит к улучшению энергетического обмена в миокарде [98, 101, 134].
С развитием современного представления об «окислительном» стрессе как об универсальном патогенетическом механизме повреждения клеток и тканей связано формирование новых подходов в лечении заболеваний дисме-таболической природы, в частности нашло широкое применение использование лекарственных веществ из группы антиоксидантов [150].
Анализ имеющихся литературных данных позволяет сгруппировать антиоксид анты в пять основных категорий: доноры протона, полиены, катализаторы, ловушки радикалов, комплексообразователи.
1. Доноры протона - это вещества с легкоподвижным атомом водорода. Основным механизмом их антиоксидантного действия является взаимодействие с образующимися в ходе ПОЛ перокси- (ROO ) и ал кокс и-радикалами (RO ) [120, 148, 166] за счет легко подвижного атома водорода в составе мо лекулы АО. С радикальными активными формами кислорода (АФК) они взаимодействуют очень слабо [21, 120], поэтому, защищая липиды они практически неспособны предупреждать окислительное повреждение белков и нуклеиновых кислот [148, 162, 201]. Некоторые представители группы (например, часть флавоноидов и тиолов) способны хелатировать катионы металлов [154], выступая в роли АО-ком плексообразовател ей. К основным представителям донаторов протонов относят группу фенолов: токоферолы [148, 173], ионол [173], пробукол [120, 162], флавоноиды, в том числе гинкго билоба [7, 146, 178, 180], катехины [154, 176], фенолкарбоновые кислоты [7, 167], эстрогены [163]; группу азотсодержащих гетероциклических веществ: мелатонин [164]; тиолы: глутатион [173], цистеин, гомоцистеин, N-ацетилцистеин [173], альфа-липоевую кислоту [201]; группу а,р-Диенолов: аскорбиновую кислоту [33].
2. Полиены - это вещества с несколькими ненасыщенными связями. Они легко окисляются, конкурируя за АФК и радикалы с биомолекулами и тем самым, защищают последние от окисления [37, 43]. Пол иены в большей степени защищают липиды, чем белки и нуклеиновые кислоты. Основные представители: ретиноиды и каротиноиды [171, 179].
3.Катализаторы- это вещества, способные катализировать элиминацию АФК и промежуточных продуктов свободнорадикального окисления без образования новых свободных радикалов. Известны также под названием «имитаторы ферментов» [122]. Наибольшие перспективы в медицинской практике имеют имитаторы супероксиддисмутазы и глутатионпероксидазы, например эбсилен.
4. Ловушки радикалов - это группа соединений, образующих при взаимодействии со свободными радикалами аддукты радикальной природы с ограниченной реакционной способностью [122].
Метод моделирования хронической сердечной недостаточности
Хроническая сердечная недостаточность по тотальному типу моделировалась введением крысам в обе плевральные полости по 3 мл силиконового масла по методу Н.Н. Пятницкого и Ю.А. Блинкова [80]. Через 30 дней производилась перевязка левой общей сонной артерии [87]. В день наложения лигатуры на левую сонную артерию начинали применение препаратов гинкго билоба (мемоплант, билобил) и альфа-липоевой кислоты (берлитион, эспа-липон).
Биохимические методы
Изучение биохимических показателей осуществлялось при помощи спектрофлюориметрического (спектрофл кюри метр "Hitachi" MPF-4] метода. Для исследования у крыс брали кровь, органы (сердце, кору головного мозга). Определяли концентрацию АД, НА, ДА, 11-ОКС, ГТ и СТ. Вычисляли коэффициенты АД/НА (концентрация АД, деленная на концентрацию НА); (АД+НА)/ДА (сумма концентраций АД и НА, деленная на концентрацию ДА); суммарное содержание КА (сумма концентраций АД, НА и ДА); ГТ/СТ (концентрация ГТ, деленная на концентрацию СТ).
Определение содержания катехоламинов Уровень адреналина, норадреналина, дофамина в плазме крови определялся дифференциально-флюориметрическим методом В.О.Осинской [72], основанном на окислении йодом адреналина, норадреналина и дофамина с образованием флюоресцирующих продуктов. Флюоресценция адреналина и норадреналина измерялась при волне возбуждения 360 нм и флюоресценции 520 нм, дофамина - при 330 и 376 нм соответственно. Флюоресценцию опытных проб сравнивали с флюоресценцией определенных разведений кристаллического адреналина, норадреналина и дофамина. Концентрация катехоламинов в крови выражалась в мкг/мл, в тканях - мкг/г.
Определение содержания серотонина и гистамина Определение содержания гистамина и серотонина в крови проводилось методом, основанном на измерении флюоресценции продуктов конденсации гистамина с ортофталевым альдегидом, а серотонина с нингидрином. Флюоресценция гистамина измерялась при длине волны 470 нм при возбуждении светом с длиной волны 365 нм, серотонина при 490 и 365 нм соответственно. Расчет производился по флюоресценции стандартных растворов. Для приготовления стандартов использовали гистамина дигидрохлорид фирмы "ICN" (США) и серотонина креатинсульфат фирмы "Reanal" (Венгрия). Содержание гистамина и серотонина в крови и тканях выражалось в мкг/мл и мкг/г [67,73].
Определение содержания 11-оксикортикостероидов
Применялась методика Ю.А.Панкова и И.Я.Усватовой, которая основана на том, что экстрагированные из плазмы крови 11-ОКС обнаруживают флюоресценцию после обработки проб смесью концентрированной серной кислоты и этилового спирта. Флюоресценция измерялась при длине волны 550 нм и возбуждении светом длиной волны 475 нм Концентрация 11-ОКС выражалась в мкг/мл. Для определения концентрации 11-ОКС (в мкг/мл) использовалась стандартная проба, которая обрабатывалась, как и опытная [45, 73].
Все вычисления производились на персональном компьютере в программе БИОСТАТИСТИКА для Windows, версии 4.03. Для вычисления средних значений и ошибок среднего пользовались однофакторным дисперсионным анализом. Для межгрупповых сравнений использовался критерий Стьюдента, для множественных сравнений использовался критерий Стью-дента с поправкой Бонферрони. Достоверность внутригрупповых различий определялась по парному критерию Стьюдента. Различия считали достоверными при р 0,05. Использовался %- квадрат [27].
Адаптогенная активность препаратов гинкго билоба и альфа-липоевой кислоты исследовалась в острых и хронических опытах. При моделировании острых опытов исследуемые вещества вводили однократно внутрибрюшинно за 60 минут до начала эксперимента в дозах: мемоплант, билобил, танакан, гинкго ревайтл - 40 мг/кг, берлитион эспа-липон - 10 мг/кг. При постановке хронического эксперимента исследуемые препараты вводили в течение 30-суток один раз в день внутрижелудочно в дозах: мемоплант, билобил, танакан, гинкго ревайтл - 40 мг/кг, берлитион эспа-липон - 10 мг/кг.
Как видно из таблицы З.1., при гипоксии на фоне однократного введения препаратов гинкго билоба и альфа-липоевой кислоты продолжительность жизни в большей степени повышали мемоплант (на 19%) и билобил (на 12%). Остальные препараты на устойчивость крыс к гипоксической гипоксии значимого влияния не оказывали.
Влияние препаратов СЭГБ и АЛК на течение иммобилизационного стресса у крыс
Содержание адреналина в миокарде животных с хронической недостаточностью мозгового кровообращения при использовании мемопланта и билобила достоверно снижалось на 47% (р 0,05). Также регистрировалось достоверное падение уровня нейромедиатора. Концентрация дофамина в миокарде достоверно возрастала при введении мемопланта и билобила относительно интактных крыс в 1,8-2,1 раза. Введение обоих препаратов СЭГБ приводило к росту суммарного уровня КА в миокарде по сравнению с нормой в 2,4-2,7 раза. В сердце действие мемопланта и билобила характеризовалось снижением соотношений АД+НА/ДА (на 56% и 39% соответственно) и АД/НА на 23% (мемоплант) и 18% (бил оби л).
В непораженной (правой) части коры головного мозга концентрация адреналина достоверно уменьшалась относительно контроля в 3,2 (мемоплант) и 2,6 (билобил) раза, а в пораженном (левом) только при лечении ме-моплантом - в 2,3 (р 0,05) раза. Содержание норадреналина в правой половине коры больших полушарий под воздействием мемопланта достоверно уменьшалось относительно контроля в 1,4 раза. В пораженном полушарии введение мемопланта и билобила вызывало достоверное снижение уровня НА в 2,1 (мемоплант) и 1,4 раза (билобил). Концентрация дофамина при применении мемопланта возрастала в том и другом полушариях относительно контроля и интактных в 2,3 (р 0,05), 2 (р 0,05) и в 2,1 (р 0,05), 1,9 раза (р 0,05) раза. Суммарное содержание катехоламинов (табл. 5.5.) в правом и левом отделах коры больших полушарий снижалось на 17% (мемоплант) и 46% (билобил), на 19% (мемоплант) и 35% (билобил) соответственно. При -применении препаратов из группы СЭГБ на фоне недостаточности мозгового кровообращения у животных соотношение АД+НА/ДА снижалось относи 54 тельно контроля в правом отделе коры больших полушарий на 80% и 48%, и на 78% и 29% в левом полушарии. В правом полушарии адреналиновый коэффициент уменьшался относительно контроля на 43% и 21%, в левой же части КБП его значение нормализовалось. (билобил), в правом полушарии на 16% (мемоплант) и 12% (билобил), в левом полушарии на 27% (р 0,05) и 30% (р 0,05) соответственно.
Содержание серотонина в крови и сердце подопытных животных на фоне НМК при применении мемопланта и билобила достоверно снижалось на 49% и 41%, на 25% и 29% соответственно. В непораженной части коры головного мозга при введении мемопланта и билобила концентрация серотонина не изменялась. В пораженной половине КБП его уровень возрастал на 27% (мемоплант) и 1 7% (билобил).
Соотношение ПУСТ в крови и миокарде повышалось относительно контроля на 63% (мемоплант) и 22% (билобил), 22% (мемоплант) и 27% (билобил). В правом и левом отделах КБП при введении мемопланта и билобила значение соотношения ГТ/СТ снижалось относительно контроля на 9% и 12%, 43% и 40% соответственно. В крови крыс с экспериментальной патологией содержание 11-ОКС достоверно увеличилось в 3,7 раза (таблица 5.7.).
В результате применения мемопланта и билобила отмечалась нормализация уровня 11-оксикортикостероидов (достоверное снижение в 3 и 2,7 раза по отношению к контролю) в крови.
Как видно из таблица 5.8., в плазме крови подопытных крыс при применении берлитиона и эспа-липона отмечалось падение уровня АД - в 3,7 раза (р 0,05) и в 1,4 раза (р 0,05); НА - в 2,7 (р 0,05) и 1,5 (р 0,05) раза; кроме того, под влиянием берлитиона и эспа-липона, было выявлено одинаковое снижение концентрации дофамина в крови - на 45% (р 0,05), что отразилось в снижении соотношения АД+НА/ДА (таблица 5.9.) относительно контроля в 1,4 и 1,8 раза, а значение коэффициента АД/НА в крови при применении берлитиона уменьшалось на 26%, однако эспа-липон вызывал нарастание значения коэффициента АД/НА на 16%. Суммарное содержание ка-техоламинов в крови под воздействием обоих препаратов АЛК снижалось на 43% и 45%.
Уровень дофамина в миокарде достоверно повышался как относительно контроля, так и в сравнении с интактными животными в 2,6 (берлитион) и 2,3 (эспа-липон), 3,8 (берлитион) и 3,4 (эспа-липон) раза соответственно. На фоне данных изменений суммарный уровень КА в сердце снижался на 20% и 25%, при этом берлитион и эспа-липон приводили к снижению значений коэффициентов АД+НА/ДА и АД/НА относительно контрольной группы на 76% и 75%, 13% и 62% соответственно.
В непораженном (правом) и пораженном (левом) полушариях крыс берлитион и эспа-липон равнозначно действовали на обмен адреналина и но 58 радреналина: препараты приводили к достоверному снижению концентрации АД относительно контроля в 2,9 и 1,4 раза, в 4,6 и 1,6 раза. Содержание но-радреналина в коре головного мозга также достоверно снижалось под воздействием обоих препаратов относительно контроля (одинаково на 42%) и интактных (59% и 22%). Однако берлитион и эспа-липон оказывали разнонаправленное влияние на концентрацию ДА в коре головного мозга экспериментальных крыс. Так, уровень ДА в пораженном и здоровом полушарии при лечении берлитионом снижался в 2 и 2,2 раза (р 0,05) раза соответственно, а при введении эспа-липона концентрация ДА в обоих полушариях достоверно возрастала в 1,9 (берлитион) и 2,86 (эспа-липон) раза. Суммарное содержание катехоламинов на фоне применения препаратов альфа-липоевой кислоты снижалось в обоих полушариях (в правом на 50% и 32%, а в левом на 45% и 36%). В правой и левой половине коры головного мозга при использовании берлитиона соотношение АД+НА/ДА не изменялось, а лечение эспа-липоном характеризовалось снижением коэффициента в здоровом - на 82%, в пораженном полушарии - на 87%. На фоне применения обоих препаратов соотношение АД/НА в правом полушарии снижалось относительно контроля на 43% и 47% соответственно, однако оставалось неизменным в левом отделе.
Влияние мемопланта и билобила на содержание ГТ и СТ в крови, сердце, КБП интактных крыс
Препаратами, повышающими адаптивные возможности организма к широкому спектру неблагоприятных факторов внешней и внутренней среды, являются адаптогены [11, 13, 14, 17, 63, 98]. Это определяет их широкое применение в различных областях медицинской практики, в частности при дезадаптационной патологии, примерами которой являются хроническая сердечная недостаточность (ХСН) и сосудисто-мозговая недостаточность (НМК). Так, при ХСН снижается адаптация сердца к предлагаемым нагрузкам, а на фоне НМК нарушается нормальный процесс адаптации личности к воздействию факторов внешней и внутренней среды [2, 8, 9, 48, 62, 71]. Главный механизм действия адаптогенов связан с предупреждением гормонального и нейромедиаторного дисбаланса [98]. Кроме того, адаптогены обладают мембранопротективной активностью, которая является основной у антиоксидантиых препаратов [1, 26, 36, 40, 44, 49, 51, 58, 76, 95, 98]. Наличие этого эффекта, общего для антиоксидантов и адаптогенов, послужило причиной поиска лекарственных препаратов с адаптогенным действием в группе антиоксидантов.
Наиболее часто в медицине применяются следующие препараты с ан-тиоксидантным действием: токоферол, аскорбиновая кислота, препараты селена, альфа-липоевой кислоты и гинкго билоба [61, 86]. В отличие от селена, витаминов С и Е [98], препараты гинкго билоба и альфа-липоевой кислоты на наличие адаптогенной активности не изучались, поэтому были включены в наши исследования. Наш эксперимент проводился только с использованием препаратов стандартизированного экстракта гинкго билоба (СЭГБ) и производных этил енд нами новой соли альфа-липоевой кислоты (АЛК). Исходя из имеющихся в литературе данных о неравноценной фармакологической активности лекарственных средств различных производителей, была проведена попытка сравнительного изучения основных препаратов СЭГБ (мемоплант, билобил, танакан, гинкго ревайтл) и этилендиаминовой соли АЛК (берлити-он, эспа-липон) представленных на российском фармацевтическом рынке.
На первом этапе работы методом фармакологического скрининга оценивались адаптогенные свойства препаратов стандартизированного экстракта гинкго билоба и альфа-липоевой кислоты при однократном (о/в) и 30-дневном (х/в) введении. Так, все исследуемые препараты подвергались изучению на 3-х моделях повреждающих воздействий: модель нормобарической нормокапнической гипоксической гипоксии (оценивалось время выживания крыс в условиях гипоксии) [10, 66, 82], предельных мышечных нагрузок (оценивалось время плавания крыс с грузом) [82, 98] и модель иммобилиза-ционного стресса (оценивалась способность препаратов предупреждать гипертрофию надпочечников, гипотрофию вилочко вой железы, язвообразова-ние) [69, 78]. Для стандартизации полученных результатов пользовались коэффициентом протекторного эффекта (КПЭ) и показателем отрицательной эффективности (ПОЭ) [98].
В условиях однократного введения, препараты по значимости антигипоксической активности (учитывая КПЭ, ПОЭ) можно расположить в следующей последовательности: мемо-плант (0,19), билобил (0,12), эспа-липон (0,08), танакан и берлитион (0,04), ревайтл гинкго (0,03). Достоверно продолжительность жизни увеличивали только мемоплант и билобил.
По силе актопротекторного действия препараты располагаются следующим образом: билобил (0,50), мемоплант (0,29), эспа-липон (0,14), берлитион и ревайтл гинкго (0,07); у танакан а КПЭ было отрицательным (-0,20). Лишь билобил и мемоплант показали достоверно положительные результаты.
По величине стресспротективного действия исследуемые препараты располагаются в данный ряд: мемоплант и билобил (0,15), танакан (0,13), эспа-липон (0), берлитион (-0,02), гинкго ревайтл (-0,14). Умеренный стресс-протективный эффект оказывали мемоплант, билобил и танакан. Введение ревайтл гинкго ухудшало показатели переносимости стресс синдрома. Препараты альфа-липоевой кислоты значимого влияния на течение стресс синдрома не оказали.
Средний коэффициент протекторного эффекта (сумма КПЗ по результатам плавания, гипоксии, стресса деленная на 3) при о/в убывает в ряду: билобил (0,26) мемоплант (0,21) эспа-липон (0,07) берлитион (0,03) ревайтл гинкго (-0,01) танакан (-0,03).
При 30-дневном применении препаратов, ряд характеризующий антигипоксическую изменялся следующим образом: билобил (0,23), эспа-липон (0,21), мемоплант (0,18), берлитион (0,15), танакан (0,14), ревайтл гинкго (0,10); актопротекторную активность: мемоплант и берлитион (0,88), билобил (0,63), эспа-липон (0,50), танакан (0,36), ревайтл гинкго (0,25); и стресспротективную активность: билобил (0,67), берлитион (0,66), мемоплант (0,57), эспа-липон (0,53), танакан (0,21) и гинкго ревайтл (0,16).
По выраженности адаптогенного эффекта (с учетом КПЗ, ПОЗ) все исследованные препараты при 30-дневном введении можно расположить в ряд: экстракт элеутерококка эспа-липон (0,66) мемоплант (0,54) берлитион (0,53) билобил (0,51) танакан (0,19) ревайтл гинкго (0,16).
Итак, длительное применение всех препаратов характеризовалось лучшей переносимостью крысами моделируемых в процессе скрининга повреждающих воздействий, но о наличии адаптогеннои активности препарата можно говорить, если он обладает, по крайней мере, сочетанием антигипок-сического, актопротекторного и стресспротективного эффектов, а его КПЭ 0,2 при ПОЭ=0 [98]. Поэтому, проанализировав данные, полученные в остром и хроническом эксперименте, можно утверждать об обнаружении адаптогеннои эффективности сопоставимой с активностью экстракта элеутерококка только у 2-х из 6 исследованных препаратов: мемопланта и бил обила
![Экспериментальное исследование нефропротекторных свойств глицина [Электронный ресурс]](/i/i/4506/184806.png "Экспериментальное исследование нефропротекторных свойств глицина [Электронный ресурс] Селиванова Ольга Сергеевна")
