Введение к работе
Актуальность темы. Проблема нарушений сердечного ритма остается
одной из актуальных в кардиологии. Антиаритмики на сегодняшний день являются внушительной частью спектра сердечно-сосудистых лекарственных средств. Хорошо зарекомендовали себя в клинической практике препараты алкалоида аймалина и его четвертичных производных, в частности, Нео-гилуритмал (Германия).
С целью расширения арсенала отечественных антиаритмических препаратов в СПХФА ведутся исследования по поиску перспективных субстанций среди четвертичных производных аймалина, выделяемого из биомассы культуры ткани раувольфии змеиной. Ресинтезировано четвертичное производное алкалоида - М(4)-пропилаймалиния бромид (1ЧПАБ), которое в 6-8 раз превосходит аймалин по противоаритмическои активности и обладает более стабильным и продолжительным действием (С.А. Минина, 1987). Постановлением Фармакологического Государственного Комитета Минздрава России от 14.11.96 года разрешен к медицинскому применению препарат 1ЧПАБ в виде таблеток по 0,02 г. Показано, что ЫПАБ может стать исходным сырьем для получения нового водорастворимого четвертичного производного алкалоида - М(4)-пропилаймалиния бензолсульфоната (ЫПАБС) (Е.И. Молохова, 1993). гШАБС обладает ярко выраженным противофибрилляторным действием, а его удовлетворительная растворимость в воде позволяет рекомендовать к внедрению в клиническую практику инъекционную лекарственную форму для купирования фибрилляции желудочков в острую фазу инфаркта миокарда (Е.М. Сергеева, 1997).
В настоящее время основным промышленным источником для выделения аймалина служат корни раувольфии змеиной Rauwolfia serpentina Benth., культивируемой в Индии, и кора корней раувольфии рвотной Rauwolfia vomitoria Afz. Однако, на вывоз сырья из Индии наложено эмбарго, а африканское сырье - кора корней раувольфии рвотной - малоперспективно, т.к. нестабильно по содержанию аймалина. Конкуренцию вышеуказанному сы-
рью могут составить вьетнамские виды раувольфии, как дикорастущие, так и культивируемые. Содержание аймалина в коре корней культивируемых растений раувольфии рвотной и раувольфии седоватой Rauwolfia canescens L. достигает 3% (Л.А. Николаева, 1990).
В СПХФА на протяжении более 20 лет ведутся исследования по разработке технологии получения аймалина и его более активных полусинтетических производных, базирующейся на биотехнологическом использовании высокопродуктивных штаммов каллусной культуры ткани раувольфии змеиной. Способы получения аймалина и высокоэффективных четвертичных производных на его основе многостадийны, длительны и характеризуются использованием больших количеств токсичных экстрагентов и сравнительно низким выходом конечного продукта. Все они основаны на выделении аймалина из растительного сырья в чистом виде и его последующем алкилирова-нии.
В связи с вышеизложенным, актуальными являются исследования, направленные на поиск новых промышленных источников аймалина, усовершенствование технологии получения четвертичных производных аймалина из различных источников сырья, минуя стадию выделения и очистки аймалина, а также получение водорастворимого четвертичного производного аймалина NriABC в условиях, пригодных для промышленного применения.
Цель и задачи исследования. Основная цель исследования - сравнительное изучение различных источников ценного противоаритмического алкалоида аймалина и совершенствование способов получения четвертичных производных на его основе.
Для достижения поставленной цели необходимо было реализовать следующие задачи:
Изучить морфолого-анатомические признаки коры корней раувольфии рвотной и раувольфии седоватой;
Разработать методику количественного определения алкалоидов раувольфии с помощью высокоэффективной жидкостной хроматографии;
Исследовать особенности накопления алкалоидов в культуре ткани раувольфии змеиной;
Изучить свойства сопутствующих веществ биомассы культуры ткани раувольфии змеиной;
Выделить сумму алкалоидов, максимально очищенную от балластных веществ;
Выбрать алкилирующий агент и провести детектирование продуктов алкилирования алкалоидов;
Разработать способ алкилирования субстанций из биомассы культуры ткани раувольфии змеиной и коры корней раувольфии рвотной без выделения и очистки индивидуального аймалина.
Разработать технологию водорастворимого производного аймалина.
Научная новизна. Изучены особенности накопления алкалоидов в культуре ткани раувольфии змеиной и установлена зависимость их накопления от сезона.
Разработана методика количественного определения алкалоидов раувольфии (аймалина, аймалицина, йохимбина, серпентина и резерпина) с использованием ВЭЖХ, позволяющая определять содержание алкалоидов в различном растительном сырье и субстанциях. Исследован алкалоидный состав коры корней раувольфии рвотной и раувольфии седоватой, культивируемых во Вьетнаме, а также биомассы культуры ткани раувольфии змеиной.
Обнаружено, что в ряду алкилирующих агентов с пропильным радикалом и различными галогенид-ионами (Г, Вг", СГ) реакционная способность увеличивается от СГ через Вг' к Г. Выбран алкилирующий агент для получения четвертичных производных аймалина, обеспечивающий высокий выход целевого продукта.
Установлен характер сопутствующих веществ и найден способ очистки экстракта, позволяющий получать ЫПАБ алкилированием суммы алкалоидов, минуя стадию выделения и очистки аймалина.
Впервые получен гШАБ путем алкилирования аималина из коры корней раувольфии рвотной.
Предложен способ получения водорастворимого производного аималина NIIABC с помощью ионообменной смолы в статических условиях, без использования токсичных органических растворителей.
Практическая ценность. Разработана методика количественного определения алкалоидов раувольфии с использованием высокоэффективной жидкостной хроматографии.
В результате сравнительного морфолого-анатомического и фотохимического изучения различного растительного сырья в качестве промышленных источников для получения четвертичных производных аималина наряду с культурой ткани раувольфии змеиной предложены вьетнамские виды раувольфии рвотной и раувольфии седоватой. Разработан проект ФСП на кору корней раувольфии рвотной.
Установлена зависимость накопления аималина в культуре ткани раувольфии змеиной от сезона и предложено основную наработку биомассы проводить в зимне-весенний период.
В результате сравнительного изучения ряда алкилирующих агентов с пропильным радикалом и различными галогенид-ионами (Г, Вг", СГ) предложено для получения четвертичных производных использовать бромистый пропил, обеспечивающий максимальный выход целевого продукта высокого качества.
Разработан оригинальный способ получения полусинтетического производного гШАБ путем алкилирования суммы алкалоидов, минуя стадию выделения индивидуального аималина. Предложенный способ позволяет снизить потери целевого продукта, исключить ряд стадий и удешевить процесс получения препарата. Специфическая чистота ЫПАБ, полученного новым методом, удовлетворяет требованиям ВФС и позволяет рассматривать данный продукт как источник для получения других четвертичных солей ай-
малина, в частности, имеющих выраженное противофибрилляторное действие и перспективы применения в инъекционной лекарственной форме.
Разработана технология водорастворимого четвертичного производного аймалина - NnABC на основе субстанций, выделенных из различного растительного сырья.
Апробация работы. Основные результаты диссертации доложены на междисциплинарной научной конференции молодых ученых «Актуальные проблемы внутренней медицины и стоматологии» (Санкт-Петербург, сентябрь 1997 г.), на научно-практической конференции «Профилактика и лечение сердечно-сосудистых заболеваний» (Санкт-Петербург, ноябрь 1998 г.), на VI Российском Национальном Конгрессе «Человек и лекарство» (Москва, 1999), на международном симпозиуме по медицинской химии AIMECS 97 (Seoul, Korea, 1997), на международном симпозиуме по медицинской химии AIMECS 99 (Beijing, China, 1999).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 7 работ.
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ Санкт-Петербургской государственной химико-фармацевтической академии по проблеме «Фармация».
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, обзора литературы, 4 глав экспериментальных исследований, выводов, списка литературы и приложения. Она изложена на >-J /стр. машинописного текста, содержит 27 таблиц, 28 рисунков. Библиографический указатель включает 195 источников литературы, из них 98 на иностранных языках.
![Совершенствование методов стандартизации лекарственных средств на основе корневищ радиолы розовой [Электронный ресурс]](/i/i/4381/176171.png "Совершенствование методов стандартизации лекарственных средств на основе корневищ радиолы розовой [Электронный ресурс] Петрова Елена Сергеевна")
