Введение к работе
Актуальность темы. Алтей лекарственный относится к группе лекарственных растений, содержащих полисахариды. Корни алтея применяются в виде настоя в качестве отхаркивающего и противовоспалительного средства. Алтей лекарственный как лекарственное растение известен давно, он входит во многие Фармакопеи мира. Действующая в настоящий момент в России нормативная документация (НД) на корни алтея имеет ряд недостатков, отсутствует показатель, характеризующий содержание действующих веществ, что существенно затрудняет стандартизацию сырья.
Одной из важных задач стандартизации являются разработка и внедрение современных методов количественного определения. В последние годы широкое распространение в анализе лекарственного растительного сырья (ЛРС) получил метод высокоэффективной жидкостной хроматографии, позволяющий с высокой степенью точности определять качественно и количественно отдельные компоненты в суммарных растительных препаратах, а также в исходных видах сырья.
Настой корней алтея - экстемпоральная лекарственная форма, разрешенная для приготовления в домашних условиях. Сырье для его изготовления поступает на фармацевтический рынок России от большого числа производителей. В связи с чем вопрос о стандартности выпускаемой продукции приобретает особую актуальность, так как качество настоя напрямую зависит от качества используемого сырья.
Цель настоящей работы заключается в проведении комплекса исследований по стандартизации корней алтея и его настоев.
Задачи исследования:
Провести микроскопическое исследование корней алтея разных форм переработки с целью изучения вариабельности диагностически значимых признаков при измельчении сырья.
Провести углубленное сравнительное изучение химического состава биологически активных веществ (БАВ) травы и корней алтея лекарственного с помощью современных физико-химических методов анализа.
Разработать методики качественной и количественной оценки БАВ корней алтея, отвечающие современным требованиям стандартизации.
Провести исследования по разработке показателя качества «содержание действующих веществ» лекарственного растительного сырья «Корни алтея».
Провести анализ водных извлечений корней алтея.
Диссертационная работа выполнена в соответствии с тематикой и планом НИР кафедры фармакогнозии фармацевтического факультета ГОУ ВПО Московская медицинская академия им. И.М.Сеченова по теме: «Разработка новых и совершенствование существующих методов получения, оценки качества и стандартизации лекарственного растительного сырья, лекарственных средств природного, биотехнологического и синтетического происхождения» (регистрационный номер темы 01.200302927).
Научная новизна результатов исследований заключается в получении научно-обоснованных данных при экспериментальном изучении состава биологически активных веществ корней алтея лекарственного: свободных и связанных сахаров, аминокислот, органических кислот и др. Дана их количественная характеристика с использованием современных физико-химических методов (ВЭЖХ, УФ-спектрофотометрия, РАМАН-спектроскопия). Проведена количественная оценка распределения клеток со слизью по тканям корня алтея. Получен идентификационный КР-спектр крахмала, корней алтея лекарственного (измельченное сырье), настоя корней алтея. Разработана ВЭЖХ-методика для количественного определения связанных сахаров в корнях и препаратах алтея. Изучено влияние некоторых технологических факторов на качество получаемого настоя корней алтея для установления оптимального режима настаивания и возможности выпуска корней алтея, фасованных в фильтр-пакеты.
Практическая значимость полученных результатов состоит в проведении визуализации анатомических признаков корней алтея различной формы переработки (цельное, измельченное сырье и порошок). Выявлены диагностически значимые признаки при идентификации цельного и измельченного ЛРС: лубяные волокна, клетки со слизью, друзы оксалата кальция. Показано, что способ обработки сырья не оказывает существенного влияния на количество клеток со слизью в корнях алтея.
На основании проведенных исследований по стандартизации лекарственного растительного сырья разработан проект фармакопейной статьи (ФС) «Корни алтея», который включает новые разделы «Микробиологическая чистота» и «Количественное определение». Также в проекте предложено расширить уже существующие разделы «Микроскопия», «Качественные реакции» и «Числовые показатели». В проект пояснительной записки включены фотографии, иллюстрирующие раздел «Микроскопия». Изучено влияние дисперсности сырья на качество настоев корней алтея, установлены оптимальные размеры частиц сырья. Материалы по изучению настоя корня алтея включены в проект ОФС «Настои» для Государственной фармакопеи ХII издания. Разработана ВЭЖХ-методика определения связанных сахаров в корнях алтея. Разработанная методика модифицирована для количественного определения действующих веществ в субстанции препарата «Мукалтин» и настое корней алтея.
Апробация диссертации. Основные положения диссертации доложены на конференции студенческих научных работ «Татьянин день» (М. 2006г), научной конференции кафедры фармакогнозии и межкафедральной конференции кафедр фармацевтической химии и фармакогнозии фармацевтического факультета ГОУ ВПО Московской Медицинской Академии имени И.М. Сеченова (2007-2008г).
Публикации. Материалы диссертационной работы опубликованы в 5 печатных работах.
Основные положения, выносимые на защиту.
Результаты изучения вариабельности диагностически значимых признаков при измельчении корней алтея лекарственного.
Результаты углубленного сравнительного изучения качественного состава БАВ сырья (трава, корни) и водных извлечений корней алтея лекарственного.
Данные по разработке ВЭЖХ-методики количественного определения связанных сахаров корней алтея.
Результаты использования РАМАН-спектроскопии в анализе сырья и настоев корней алтея.
Результаты исследований по стандартизации сырья «Корни алтея».
Результаты исследований водных извлечений корней алтея.
Объем и структура диссертации. Работа изложена на 159 страницах, введения, обзора литературы, экспериментальной части, включающей 6 глав, выводов, списка литературы, состоящего из 215 источников, из них 35 - на иностранных языках, и приложения. Диссертация содержит 25 таблиц, 32 рисунка, в том числе 9 фотографий.
Во введении раскрыта актуальность темы, определены цель и задачи исследования, сформулирована научная новизна и практическая значимость работы. В первой главе на основании литературных данных обобщены сведения о ботанико-морфологической характеристике видов алтея, химическом составе, методах анализа основных биологически активных веществ в растительном сырье; нормативной документации на сырье алтея; фармакологической активности и использовании сырья алтея в производстве лекарственных препаратов. Вторая глава посвящена описанию объектов и методов исследований, используемых в разработке методик и комплексном изучении химического состава сырья алтея (полисахариды, сахара, аминокислоты, органические кислоты и др.). В третьей главе представлены результаты изучения вариабельности диагностически значимых признаков при измельчении корней алтея лекарственного. В четвертой главе излагаются результаты исследований состава и содержания гидрофильной фракции БАВ алтея лекарственного: полисахаридов, дубильных веществ, органических кислот. Представлены данные . В пятой главе приведены результаты изучения образцов крахмала, сырья «Алтея корни» и их настоя методом РАМАН-спектроскопии. Шестая глава посвящена исследованиям по стандартизации сырья «корни алтея» и разработке проекта ФС. Приведены результаты исследования по разработке и применению ВЭЖХ-методики для количественного определения связанных сахаров в корнях алтея. В седьмой главе обобщены результаты изучения водных извлечений корней алтея: исследования микробиологической чистоты ЛРС и водных извлечений, данные по влиянию некоторых технологических факторов на качество полу
чаемого настоя корней алтея и результаты анализа сырья «Алтея корни», реализуемого в аптечной сети города Москвы и Московской области. Приложение включает проект ФС «Корни алтея».
