Введение к работе
Актуальность темы. В последние годы значительно возрос интерес к препаратам растительного происхождения, что объясняется их комплексным воздействием на организм человека, малой токсичностью и возможностью длительного применения без риска возникновения побочных явлений. Вместе с этим повышаются требования к доброкачественности как лекарственного растительного сырья, так и препаратов на его основе, что, в свою очередь, обусловливает процесс непрерывного развития и совершенствования способов их аналитического контроля.
В качестве объектов исследования нами выбраны растительное сырье чабреца (Herba Thymi serpylli) и тимьяна обыкновенного (Herba Thymi vulgaris), экстракты из них и препарат Пертуссин, которые находят широкое применение в медицинской практике, особенно в педиатрии, для лечения заболеваний верхних дыхательных путей. Действующая в настоящее время нормативная документация на них требует дальнейшего совершенствования, так как не регламентирует содержание основных действующих веществ. Отсутствие единого объективного показателя качества сырья и препаратов чабреца и тимьяна, а также унифицированных методик анализа создает значительные трудности при контроле процесса производства экстрактов чабреца, тимьяна и Пертуссина.
Критическое изучение данных литературы о химическом составе и фармакологической активности отдельных групп биологически активных веществ сырья и препаратов чабреца и тимьяна обыкновенного показало, что фармакологическое действие изучаемых объектов в значительной степени обусловлено наличием флавоноидов, а также фенолов эфирного масла (тимола и карвакрола). Поэтому актуальной" является аналитическая
оценка качества сырья и препаратов чабреца и тимьяна по со держанию этих действующих веществ.
Однако методики анализа флавоноидов, тимола и карвакр» ла; в препаратах и сырье чабреца и тимьяна недостаточно сі вершенны. В настоящее время в анализе производных феноле растительного происхождения предпочтение отдается физико-хі мическим методам. Это соответствует современным требования!, предъявляемым к фармацевтическому анализу. Наибольшие вое можности при стандартизации флавоноидов и фенолов эфирног масла в растительном сырье и препаратах на его основе имею различные варианты УФ-спектрофотометрии и хроматографии.
Цель и задачи исследования. Целью нашего исследовани. является разработка унифицированных методик количественное определения действующих веществ в растительном сырье и препаратах чабреца и тимьяна, пригодных для объективной оценга их качества и контроля процесса производства экстрактов чабреца и тимьяна, а также препарата Пертуссин.
Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1. Осуществить выбор оптимальных условий ГЖХ-анализа тимола
и карвакрола с целью разработки методики ГЖХ-определения
: их в траве чабреца и тимьяна.
2. Обосновать возможность использования УФ-спектрофотометрии
для определения тимола и карвакрола в объектах исследова
ния. Разработать методики количественного определения
суммы тимола и карвакрола в растительном сырье и препара-
тах чабреца и тимьяна.
-
Разработать унифицированную методику количественного определения флавоноидов в сырье и препаратах чабреца.
-
Провести выбор оптимальных параметров и сравнительную оценку качества экстрактов чабреца, полученных по разным технологиям.
-
Разработать проекты изменений НТД на траву чабреца, экстракт чабреца жидкий и Пертуссин с включением дополнительного показателя "Содержание действующих веществ".
Научная новизна. Найдены оптимальные условия ГЖХ-анализа тимола и карвакрола в растительном сырье чабреца и тимьяна. Теоретически показана возможность количественного определения тимола и карвакрола при неполном разделении их пиков. Изучены условия экстракции тимола и карвакрола из растительного сырья.
Для выбора условий спектрофотометрического определения изучены УФ-спектры поглощения растворов тимола и карвакрола в этаноле и гептане и определены их основные спектральные характеристики. Показана возможность использования гептана в качестве растворителя для спектрофотометрического определения тимола и карвакрола. Впервые обоснована возможность использования спектрофотометрии по второй производной УФ-спектра поглощения для определения тимола и карвакрола в объектах исследования. Оптимизированы условия экстракции суммы тимола и карвакрола из экстракта чабреца и Пертуссина.
Изучены УФ-спектры поглощения водно-этанольного извлечения из травы чабреца, растворов экстракта чабреца и Пертуссина. Обоснована возможность применения ДЕ-варианта диф-
ференциальнои спектрофотометрии с использованием реакции комплексообразования с алюминия хлоридом для качественного и количественного определения флавоноидов в растительном сырье и лекарственных препаратах чабреца. Изучены факторы, влияющие на извлечение флавоноидов из лекарственного растительного сырья чабреца. Осуществлен выбор оптимальных параметров качества растительного сырья и препаратов чабреца..
Комплексом методов, в том числе спектрофотометрии и хроматографии, показана идентичность качественного и количественного состава экстрактов чабреца, полученных по существующей и ресурсосберегающей технологиям.
Практическая ценность работы. Разработаны методики ГЖХ определения тимола и карвакрола в траве чабреца и тимьяна, которые позволяют одновременно проводить идентификацию и количественное определение данных соединений.
Разработаны унифицированные спектрофотометрические методики определения тимола и карвакрола в растительном сырье чабреца и тимьяна, экстрактах из них и Пертуссине, которые отличаются хорошей воспроизводимостью, быстротой и простотой выполнения и могут быть использованы для контроля технологического процесса получения препаратов на основе чабреца -и тимьяна.
С целью совершенствования НТД на траву и препараты чабреца в соответствии с современными требованиями внесены изменения в ФС "Трава чабреца" (ГФ XI,ст.60), ФС 42-1399-89 "Экстракт чабреца жидкий" и ФС 42-1430-87 "Пертуссин" по разделам "Подлинность" и "Количественное определение" с включением разработанных методик определения действующих ве-
ществ - флавоноидов. Определены обоснованные нормы содержания флавоноидов в растительном сырье и лекарственных препаратах чабреца.
Разработанные методики определения действующих веществ использованы для обоснования ресурсосберегающей технологии экстракта чабреца жидкого и внесения изменения в ФС 42-1399-89 "Экстракт чабреца жидкий" по разделу "Состав".
Внедрение результатов работы. Методики количественного определения суммы тимола и карвакрола в траве чабреца и тимьяна, экстракте чабреца и Пертуссине апробированы на базе ОТК Одесского ПХФО и НПО ВИЛАР.
Методики количественного определения суммы флавоноидов в растительном сырье, экстракте чабреца и Пертуссине апробированы на базе НПО ВИЛАР, внедрены в практику работы ОТК фармацевтической фабрики г.Пятигорска и включены в проекты изменений К! "Трава чабреца" (ГФ XI,ст.60), ФС 42-1399-89 "Экстракт чабреца жидкий" и ФС 42-1430-87 "Пертуссин".
Основные положения, которые выносятся на защиту:
результаты исследований по выбору оптимальных условий ГЖХ-анализа тимола и карвакрола в траве чабреца и тимьяна;
унифицированная методика количественного определения суммы тимола и карвакрола в растительном сырье и препаратах чабреца и тимьяна с использованием метода производной спектрофотометрии;
унифицированная методика количественного определения
флавоноидов в сырье и препаратах чабреца;
результаты сравнительной оценки качества экстрактов чабреца, полученных по разным технологиям;
проекты изменений НТД на траву чабреца, экстракт чабреца жидкий и Пертуссин с включением дополнительного показателя "Содержание действующих веществ".
Апробация работы. Основные результаты исследований доложены на научных конференциях Пятигорской государственной фармацевтической академии в 1991, 1993, 1995, 1996 годах, в материалах научного конгресса "Традиционная медицина: теоретические и практические аспекты" (Чебоксары,1996).
Публикации. По теме диссертации опубликовано 9 печатных работ.
Личный вклад автора. Диссертация представляет собой самостоятельный труд и включает исследования автора за период с 1990 по 1996 годы. Во всех работах, выполненных в соавторстве, вклад автора выражается личным участием в постановке и выполнении экспериментальных исследований и обобщении полученных результатов.
Работа выполнена на кафедре фармацевтической химии Пятигорской государственной фармацевтической академии в соответствии с планом научно-исследовательских работ (N государственной регистрации 01910008623) в рамках проблемы "Фармация" МНС N 47 РАМН.
. Структура и объем работы. Диссертационная работа представляет собой рукопись, изложенную на 165 страницах машинописного текста. Она состоит из введения, четырех глав, выводов, списка литературы. В диссертации приводится 11 рисун-
- 9 -коз, 42 таблицы. Библиографический указатель включает 177 источников, из них 36 на иностранных языках.
