Введение к работе
Актуальность проблемы. Одной из проблем медицинской науки является исследование влияния активных форм кислорода (АФК) на физиологические функции организма человека. Известно, что гиперпродукция АФК приводит к нарушению перекисного окисления липидов и, как следствие, к повреждению клеточных мембран. Это является причиной тяжелых функциональных расстройств, в частности: сердечно-сосудистые заболевания, атеросклероз; ишемия мозга, рассеянный склероз; токсический гепатит; острые и хронические воспалительные процессы; мутагенез, злокачественные опухоли и многие другие.
Такие явления могут быть устранены не только путем применения лекарственных веществ, но и добавлением к рациону биологически активных соединений. В 2004 году НИИ питания РАМН были проведены исследования ежедневного рациона питания и опубликованы рекомендуемые уровни потребления пищевых и биологически активных веществ, утвержденные главным государственным санитарным врачом РФ – Г. Г. Онищенко. К числу таких веществ следует отнести флавоноиды. В качестве одного из альтернативных источников полифенольных соединений, в том числе флавонов (лютеолина, апигенина, акацетина, диосметина) или С-гликозидов (витексина, изовитексина, ориентина, изоориентина) предложено использовать цветки хризантемы садовой (Chrysanthemum morifolium).
Известно, что широкий спектр действия флавоноидов объясняется их избирательностью по отношению к активным формам кислорода (АФК): при гиперпродукции АФК они проявляют антиоксидантные свойства, а при низком уровне генерации АФК – прооксидантные. Удачное сочетание низкой токсичности с высокой фармакологической активностью делает их чрезвычайно перспективными для профилактики и лечения многих заболеваний.
Однако сырьевые источники флавоноидов, которые могут быть использованы как лекарственные вещества, ограничены. В то же время известны растения, которые широко применяются в народной медицине. Например, в странах юго-восточной Азии растения рода Chrysanthemum используются в качестве средств, улучшающих коронарный кровоток; устраняющих симптомы вегетососудистой дистонии; снижающих артериальное давление; нормализующих обмен веществ; поддерживающих антитоксическую функцию печени; как успокаивающее и антиаллергическое средство.
Хризантема корейская широко культивируется в нашей стране как декоративное растение, но не используется в практических целях в качестве источника биологически активных соединений. Причиной этого является недостаточная изученность химического состава Chrysanthemum koreanum Makai и отсутствие исследований фармакологического действия препаратов, выделенных из этого растения.
С этой точки зрения углубленное изучение химического состава, а также разработка доступных и легковоспроизводимых способов получения суммарных фракций из хризантемы в качестве перспективных источников для создания новых лечебно-профилактических средств является актуальной проблемой.
Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы является исследование химического состава цветков хризантемы корейской и разработка рациональных путей получения из них суммарных фракций, обладающих биологической активностью.
Для достижения поставленной цели мы сочли целесообразным решение следующих задач:
изучить качественный и количественный состав основных групп биологически активных соединений цветков Chrysanthemum x koreanum Makai.;
выявить наиболее активные в фармакологическом отношении фракции, изучить их химический состав и определить содержание в них антиоксидантов;
разработать препаративные способы выделения индивидуальных соединений из цветков хризантемы корейской;
осуществить фармакологический скрининг индивидуальных веществ и отдельных фракций, полученных из хризантемы.
Научная новизна. Методами химического и физико-химического анализа доказано наличие биологически активных веществ в цветках хризантемы корейской, которые представлены флавоноидами, каротиноидами, витаминами, кумаринами, производными коричной кислоты, аминокислотами и полисахаридами. С целью полной характеристики сырья – цветков хризантемы корейской – проведено количественное определение основных групп БАВ и установлено содержание флавоноидов, каротиноидов, свободных аминокислот, витаминов (Е, С и -каротиноидов), а также макро- и микроэлементов.
Показано, что антиоксидантное действие определяется комплексом БАВ и найдена суммарная антиоксидантная активность в сухих экстрактах цветков хризантемы.
Изучен качественный и количественный состав фенольных соединений методом ВЭЖХ в экстракте цветков хризантемы корейской, полученном спиртом этиловым 40%.
Методом препаративной колоночной хроматографии из сухого экстракта цветков хризантемы корейской, получено 5 кристаллических веществ флавоноидной природы. Вещества, выделенные из фракций V и VI, на основании качественных реакций, хроматографического анализа, УФ-, ИК- и ПМР-спектроскопии идентифицированы как лютеолин и лютеолин-7-глюкозид.
Впервые изучены физико-химические свойства пектинового комплекса из цветков хризантемы.
Выявлены гипотензивная, антигипоксическая и актопротекторная активность лютеолин-7-глюкозида и суммарных фракций из хризантемы и впервые доказано их влияние на потенцирование желудочковой аритмии.
Практическая значимость работы. В результате химического и фармакологического исследования доказана возможность и перспективность использования цветков хризантемы корейской в качестве альтернативного сырья для получения БАВ и суммарных лекарственных средств.
Разработаны способы получения сухих экстрактов, полученных экстракцией сырья спиртом этиловым 70% и 40% концентрации, а также определена их фармакологическая активность.
Предложен препаративный способ выделения доминирующего флавоноида – лютеолин-7-глюкозида из цветков хризантемы, что может быть использовано для получения стандартного образца данного соединения.
Внедрение результатов в практику. По материалам диссертации составлено информационное письмо «Фармакотехнологическое исследование хризантемы корейской (Chrysanthemum koreanum Makai)», которое передано в НИИ питания РАМН для дальнейших совместных исследований, а также на кафедры фармакогнозии Пятигорской государственной фармацевтической академии и Курского государственного медицинского университета для включения полученных результатов в курс лекций. Наработанные сухие экстракты цветков хризантемы переданы ООО «МИП «Уником» для разработки экспериментальных серий фармакологических средств на их основе.
Положения, выдвигаемые на защиту:
обоснование использования цветков хризантемы корейской в качестве источника для получения биологически активных веществ;
результаты качественного и количественного исследования химического состава цветков хризантемы корейской;
препаративные методы получения отдельных фракций и результаты изучения их химического состава;
способ выделения лютеолин-7-глюкозида;
результаты предварительного фармакологического и биохимического исследования влияния лютеолин-7-глюкозида и полученных из хризантемы фракций.
Связь задач исследования с проблемами фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательской работы (НИР) ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава, а также в соответствии с соглашением о выполнении НИР между Федеральным агентством по здравоохранению и социальному развитию и ГОУ ВПО Пятигорской ГФА Росздрава (№06/1049).
Апробация работы и публикации. Основные положения диссертационной работы изложены на 62-й и 63-й научных конференциях «Разработка, исследование и маркетинг новой фармацевтической продукции» (Пятигорск 2008-2009 гг.). По теме диссертации опубликовано 7 работ, в том числе 2 статьи в журналах, рекомендованных ВАК.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на 155 страницах текста компьютерного набора и состоит из обзора литературы и 3 глав собственных исследований, общих выводов, списка литературы, включающего 156 источников, в том числе 61 иностранный; содержит 38 таблиц, 47 рисунков и приложение.
![Химическое исследование травы кориандра посевного (Coriandrum sativum) с целью получения фармакологически активных веществ [Электронный ресурс]](/i/i/4256/193791.png "Химическое исследование травы кориандра посевного (Coriandrum sativum) с целью получения фармакологически активных веществ [Электронный ресурс] Нерсесян Захар Мкртычевич")
