Введение к работе
Актуальность проблемы
Дикорастущие лекарственные растения до настоящего времени являются важной сырьевой базой для производства многих лекарственных препаратов. По прогнозам Всемирной Организации Здравоохранения доля фитопрепаратов в общем объеме лекарственных средств будет увеличиваться. Поэтому поиск новых сырьевых источников природных биологически активных соединений является актуальной проблемой.
Флора Кавказа отличается богатством, разнообразием и уникальностью видового состава. Среди них большой интерес представляют растения семейства яснотковые (Lamiaceae), содержащие такие биологически активные соединения, как терпеноиды, фенольные и полифенольные соединения.
На их основе созданы лекарственные препараты разнообразного
фармакологического действия: спазмолитического, желчегонного,
антимикробного, седативного, иммуномодулирующего и др. Однако многие виды изучены не достаточно, среди которых представители рода Mentha L. Научный интерес представляет мята длиннолистная (Mentha longifolia L.), так как широко распространена на территории России, а в предгорных и горных районах Кавказа образует заросли. Растение имеет значительную сырьевую массу, устойчиво к болезням и вредителям. Среди видов негибридного происхождения мята длиннолистная является наиболее полиморфным видом, что может проявляться как на морфологическом уровне, так и в значительной изменчивости содержания основных биологически активных соединений. В настоящее время мята длиннолистная применяется только в народной медицине в виде настоев и отваров для лечения заболеваний печени. Для внедрения данного вида мяты в медицинскую практику необходимо проведение исследований химического состава и разработка нормативной документации на сырьё. Поэтому фармакогностическое изучение мяты длиннолистной и стало предметом наших
исследований, поскольку создаёт предпосылки для обоснования возможности использования сырья мяты длиннолистной в официальной медицине как желчегонного средство.
Цель и задачи исследования
Целью настоящего исследования явилось фармакогностическое изучение мяты длиннолистной для расширения сырьевой базы потенциальных источников лекарственных средств, обладающих желчегонным действием.
Для достижения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
Провести фитохимический анализ травы мяты длиннолистной и изучить основные группы биологически активных соединений (БАС).
Выявить места произрастания и определить ориентировочные запасы сырья мяты длиннолистной травы в некоторых районах РСО-Алания.
Изучить возможность интродукции мяты длиннолистной в ботаническом саду Пятигорской ГФА.
Провести морфолого-анатомические исследования и выявить диагностические признаки сырья (травы) мяты длиннолистной.
Установить показатели качества сырья.
Определить острую токсичность и желчегонное действие извлечений из травы мяты длиннолистной.
Научная новизна полученных результатов.
В результате проведённых исследований установлен химический состав основных групп биологически активных соединений (БАС) мяты длиннолистной. Установлено наличие и количественное содержание в траве мяты длиннолистной эфирного масла, флавоноидов, полисахаридов, фенолокислот, дубильных веществ, тритерпеновых соединений, изучен аминокислотный состав, определены макро- и микроэлементы.
Методом газожидкостной хроматографии изучен качественный состав эфирного масла мяты длиннолистной, произрастающей на территории РСО-Алания. В эфирном масле найдено 39 компонентов, из них идентифицированы по стандартным образцам 6 компонентов - терпинеол, лимонен, линалилацетат, цитраль, кариофиллен, ментол. Методами химического и хроматографического анализа установлено наличие 14 соединений фенольной природы: флавоноиды (рутин, гесперидин, лютеолин-7 гликозид, кверцетин, дигидрокверцетин, кемпферол, апигенин), фенолкарбоновые кислоты (галловая, кофейная, цикориевая, феруловая), кумарины (умбеллиферон, кумарин) и танин. Из них дигидрокверцетин, гесперидин, цикориевая и феруловая кислоты в траве мяты длиннолистной идентифицированы впервые.
Найдены оптимальные условия идентификации флавоноидов (метод ТСХ) и определения их количественного содержания (метод дифференциальной УФ-спектрофотометрии) в траве мяты длиннолистной.
Из надземной части мяты длиннолистной выделены полисахариды, определено их количественное содержание, изучен качественный моносахар идный состав. Изучена динамика накопления эфирного масла и флавоноидов в траве мяты длиннолистной по фазам вегетации; определены оптимальные сроки заготовки сырья.
Впервые для данного вида сырья - мяты длиннолистной травы -установлены диагностические признаки, числовые показатели, нормы качества сырья и срок его годности. Для стандартизации сырья осуществлён выбор оптимальных методик для количественного определения эфирного масла и флавоноидов. Оптимизированы условия экстракции флавоноидов из травы мяты длиннолистной.
Проведены ресурсоведческие исследования в ряде районов РСО-Алания, составлены карты-схемы размещения зарослей мяты длиннолистной, определены запасы сырья - травы мяты длиннолистной в четырех районах
(Алагирском, Кировском, Моздокском, Правобережном). Установлен объем возможных ежегодных заготовок данного лекарственного растительного сырья в 3-х районах республики - до 3 т сухого сырья. В результате фенологических наблюдений за развитием мяты при интродукции в условиях ботанического сада Пятигорской ГФА составлены фенологические спектры и установлено преимущество вегетативного размножения растения.
Предварительными фармакологическими исследованиями извлечений из травы мяты длиннолистной доказано желчегонное действие и определена острая токсичность. В эксперименте на животных установлено, что водные и спиртовые извлечения из травы мяты длиннолистной относятся к 4 классу токсичности (LD5o>250Mr/Kr) по степени воздействия на организм.
Практическая значимость. Для нового вида эфирно-масличного лекарственного растительного сырья «Мяты длиннолистной трава» определены диагностические признаки, установлены нормы качества и разработаны методики определения основных действующих веществ. Прикладное значение работы заключается в разработке проекта ФСП на мяты длиннолистной траву и составлении инструкции по её заготовке и сушке. Показана возможность применения травы мяты длиннолистной в медицинской практике в качестве желчегонного средства.
Внедрение результатов исследования. По результатам исследований составлен проект ФСП «Мяты длиннолистной трава». Методики анализа, включенные в проект ФСП, апробированы в лаборатории ГУП Ростовской области «Фармацевтический центр» (акт апробации от 11.11.2009г.).
Связь задач исследования с проблемным планом фармацевтических наук. Диссертационная работа выполнена в соответствии с планом научно-исследовательских работ ГБОУ ВПО Пятигорской ГФА Минздравсоцразвития России (номер государственной регистрации 01200112164).
Апробация работы и публикации. Основные результаты диссертационной работы доложены и обсуждались на ежегодных конференциях Пятигорской государственной фармацевтической академии в 2007-20Пг.г., Всероссийской научно-практической конференции «Актуальные проблемы фармацевтической науки и практики» (г. Владикавказ, 2009г). По материалам диссертации опубликовано 9 научных работ, из них 4 статьи в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Положения, выносимые на защиту:
- результаты фотохимического изучения основных групп БАС надземной
части мяты длиннолистной;
результаты ресурсоведческих и интродукционных исследований мяты длиннолистной;
- показатели подлинности и нормы качества сырья мяты длиннолистной;
- результаты изучения острой токсичности и желчегонной активности
извлечений из травы мяты длиннолистной.
Структура и объем диссертации. Работа изложена на 177 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы (1 глава), главы, посвященной материалам и методам исследования, 3-х глав собственных исследований, включает 39 таблиц, 35 рисунков, список литературы, состоящий из 141 источников, в том числе 7 иностранных авторов.