Введение к работе
Актуальность проблемы злокачественных лимфом кожи (ЗЛК) обусловлена как высокой частотой (в мире ежегодно регистрируется 0,3 случая на 10 тысяч населения) (Weinstock, Gardstein B., 1999(, так и сложностью ее ранней диагностики и лечения (Burg G., at al 2008).
Особенно высок уровень заболеваемости Т-клеточной лимфомой кожи (ТКЛК), доля которой в общей структуре злокачественных лимфом кожи достигает 60-65% (Самцов А.В., Белоусова И.Э 2006; Burg G., 2000).
Сложность установления диагноза ЛК обусловлена полиморфизмом клинической картины, имитирующей различные хронические доброкачественные заболевания кожи. Начало развития большинства лимфом кожи нередко бывает медленным, и длительное время они клинически сходны с экземой, псориазом, псевдолимфомами, атопическим дерматитом и другими дерматозами, однако диагностика ТКЛК на ранних стадиях развития сложна не только для клиницистов, но и патоморфологов – из за не специфичности в этот период ее гистологических (включая отсутствие эпидермотропизма) и иммуногистохимических характеристик. В частности, не подтвердились, казавшиеся многообещающими данные о возможности раннего выявления Т- клеточных лимфом кожи по отрицательному окрашиванию Т-лимфоцитов опухолевого инфильтрата на иммуногистохимический маркер CD7 (Willemze R., et al 1998.).
Не дало желаемых результатов и молекулярно-биологическое исследование, направленное на выявление перестройки Т-клеточного рецептора (TCR), так как на начальной стадии элементы ТКЛК демонстрируют моноклональную перестройку гена TCR лишь в 50% случаев. Более того, при некоторых доброкачественных дерматозах (например при красном плоском лишае, склероатрофическом лихене) лимфоцитарный инфильтрат также может быть представлен моноклональной популяцией Т-лимфоцитов (Citarella L., Massonc C, Kerl H., Cerroni L. 2003).
Таким образом даже использование всей совокупности вышеперечисленных методов исследования не всегда обеспечивает установление диагноза Т- клеточной лимфомы кожи на раннем сроке ее развития (в частности на фоне так называемых «прелимфом» кожи, таких как крупно- и мелкобляшечный парапсориаз), а также дифференциальной диагностики этого заболевания с доброкачественными лимфопролиферативными заболеваниями(Burg G. 2005). В результате остается достаточно большое количество не диагностированных ЛК и зачастую между первыми клиническими проявлением и постановкой окончательного диагноза может пройти до 10 лет. Врач поликлинического звена может подозревать ЛК, но методами лабораторной диагностики диагноз подтверждается только через несколько лет. Вышеуказанное объясняет актуальность поиска новых эффективных методов диагностики.
В связи с этим, исходя из важной роли в развитии Т- клеточных лимфом кожи ультрафиолетового излучения, наше внимание было обращено к изучению функционирования белков клеток кожи, обладающих фоточувствительностью и иммуномодулирующим действием, а также принимающих участие в регуляции клеточной пролиферации и апоптоза. К группе таких белков относятся периферические бензодиазепиновые рецепторы (PBR (TsPO). Их выраженная экспрессия в различных слоях кожи, способность регулировать пролиферацию клеток требуют дальнейшего изучения функционирования рецептора в коже в норме и при патологии, а также позволяет рассматривать периферический бензодиазепиновый рецептор как возможную терапевтическую мишень и маркер интенсивности клеточной пролиферации при злокачественных новообразованиях кожи (Gavish М., 1999, Stoebner Р.Е., 2001).
Учитывая значимую роль TsPO в механизмах клеточной пролиферации и апоптоза, а также способность к структурным и функциональным изменениям данного белка, индуцируемым УФО, представляется перспективным дальнейшее изучение их участия в развитии лимфопролиферативных заболеваний, сопровождающихся нарушениями данных процессов.
Цель исследования:
Изучить интенсивность экспрессии периферического бензодиазепинового рецептора (TsPO), PCNA и цитохрома P450scc в коже при Т-клеточной лимфоме кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваниях кожи (парапсориазе) с целью установления роли TsPO в этиопатогенезе Т-клеточных лимфом кожи, а также для использования этого показателя в дифференциальной диагностике между ними.
Задачи исследования.
Оценить эффективность применяющегося в настоящее время комплекса диагностических мероприятий (клинических, морфологических и молекулярно-биологических) для дифференциальной диагностики Т-клеточной лимфомы кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний кожи.
Определить интенсивность экспрессии TsPO, PCNA и цитохрома P450scc в коже у больных Т-клеточной лимфомой кожи и доброкачественными лимфопролиферативными заболеваниями кожи (парапсориазом)
Оценить возможность использования экспрессии TsPO, PCNA и цитохрома P450scc в дифференциальной диагностике Т-клеточной лимфомы кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний кожи (парапсориаз) и разработать на основе полученных данных метод дифференциальной диагностики Т-клеточной лимфомы кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний кожи.
Оценить клиническую эффективность включения метода определения интенсивности экспрессии TsPO в комплекс диагностических мероприятий при дифференциальной диагностике Т-клеточной лимфомы кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний кожи.
Научная новизна
-
В работе впервые дополнительно к клиническим, морфологическим и молекулярно-биологическим методам исследования было проведено определение уровня экспрессии TsPO, PCNA и цитохрома P450scc при доброкачественных и злокачественных лимфопролиферативных заболеваниях кожи.
-
Впервые оценена взаимосвязь между уровнем экспрессии TsPO и интенсивностью клеточной пролиферации в очаге поражения у больных ТКЛК и доброкачественными лимфопролиферативными заболеваниями кожи.
-
Впервые определялась роль TsPO, PCNA и цитохрома P450scc в развитии лимфопролиферативных заболеваний.
-
Впервые разработан метод дифференциальной диагностики Т-клеточных лимфом кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний кожи, основанный на уровне экспрессии периферического бензодиазепинового рецептора.
Научно-практическая значимость работы
В работе получены данные, позволяющие оценить участие TsPO, PCNA и цитохрома P450scc в функционировании нормальной кожи, а также в развитии лимфопролиферативных заболеваний кожи. Доказано наличие корреляционной связи между уровнем экспрессии периферического бензодиазепинового рецептора и интенсивностью клеточной пролиферации, что позволит использовать периферический бензодиазепиновый рецептор в качестве маркера выраженности пролиферативных процессов в опухолевых клетках Т-клеточной злокачественной лимфомы кожи, что может применяться как для дифференциальной диагностики с доброкачественными лимфопролиферативными заболеваниями кожи, так и для оценки биологического поведения опухоли и возможности появления рецидивов.
Основные положения, выносимые на защиту
-
Использование комплекса современных исследований, включающее общепринятые на сегодняшний день клинические, морфологические и молекулярно-биологические методы не позволяет установить диагноз мелкобляшечного парапсориаза, крупнобляшечного парапсориаза и Т-клеточной лимфомы кожи у 100% пациентов.
-
Уровень экспрессии TsPO в различных слоях кожи при ранних стадиях Т-клеточной лимфомы кожи достоверно отличается от такового при доброкачественных лимфопролиферативных новообразованиях кожи, что позволяет предположить роль периферического бензодиазепинового рецептора в регуляции клеточной пролиферации и рассматривать его в качестве специфического маркера пролиферации при злокачественных лимфопролиферативных новообразованиях, в отличие от PCNA, позволяющего оценить только скорость пролиферации в зависимости от скорости роста как злокачественных, так и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний.
-
Оценка уровня экспрессии TsPO может рассматриваться как метод дифференциальной диагностики доброкачественных и злокачественных лимфопролиферативных новообразований.
-
Включение в комплекс общепринятых диагностических мероприятий (клинических, морфологических, молекулярно-биологических методов исследования) метода определения уровня экспрессии TsPO повышает точность диагностики ТКЛК кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний
Внедрение результатов исследования в практику
Результаты исследования внедрены в отделении дерматовенерологии и дерматоонкологии МОНИКИ им. М.Ф. Владимироского и в областном кожно-венерологический диспансере г.Калуги. Результаты используются в учебном процессе на кафедре дерматовенерологии и дерматоонкологии ФУВ ГУ МОНИКИ им. М.Ф.Владимироского
Апробация работы
Основные материалы диссертации доложены на Заседании Московского областного общества дерматовенерологов в МОНИКИ им. М.Ф. Владимирского, Москва, сентябрь 2010г.
Апробация диссертационной работы состоялась на совместной научно-практической конференции кафедры и отделения дерматовенерологии и дерматоонкологии МОНИКИ им. М. Ф. Владимироского (1 марта 2011г.).
Личное участие автора в получении научных результатов.
Автору принадлежит ведущая роль, в выборе программы и составлении плана исследования, наборе группы пациентов из 60 человек, сборе анамнеза и их обследования с целью уточнения диагноза, взятии и анализе биопсийного материала, статистической обработке, анализе и интерпретации полученных данных на основе иммуногистохимического исследования. Автором подробно изучена современная литература по проблеме. Им также разработан алгоритм диагностики и дифференциальной диагностики Т-клеточных лимфом кожи и доброкачественных лимфопролиферативных заболеваний. Совместно с научными руководителями сформулированы цели и задачи диссертации, обсуждены и сформулированы выводы и даны важные практические рекомендации.
Публикации:
По теме диссертации опубликовано 5 печатных работ, в том числе 3 в журналах рекомендованных ВАК РФ для публикации результатов диссертационных исследований.
Структура и объем диссертации:
