Введение к работе
Актуальность тегш. Изучение лектиков является одной ва актуальних проблем современной биохимии. Лектини широко ррспрост-раиенц в растительном я ягаюткоа карз, но к сожалении, до настоящего времени не? исчерпывающих-сведений об их функциональной роля з .-твой клетко. В большей степени это касается растительных лентинов. Лектшщ нашій широкое применение а медицине, биотехнологии, биохимиЕр сельском хозяйства а а других отраслях паунк и. гехники. Наметаются болыаиа перспективы а использовшіик дектшюв в активации иммунной системы, лечении и диагностике рака а инфекционных болезней. С применением лектиков удалось разработать:целый ряд методов зондирования биомембран специфк-чесюздз терминальными углеводами, выделения гликопротеннов в др. (Королев II.П. ,1978, Луцик М.Д. к др., 1981). Несмотря ла такие перснектиш список-применяемых утлеводспецифнчках коммерческих лектинов не богат. Следовательно„ выявление нових источников-лектвнов, кхвыделение, очистка к -изучение функционально* роли является одной из ваетейзйх задач.
Цель и задача'исследования. Цель наотояаеЗ работы заклвча-егся а заявлении,.очистке й биохимической характеристике двкти-яа растения Coriarrdrua sativum , широке применяемого з виде пищевого продукта, преимущественно без предварительной -термической обработки. .'..'.
Перед нами были поставлены слэдутпдае задача:
-
Выявление дектннноЗ активности в грубых экстрактах листьев И СТВблеЗ Uoriandrum sativum, .
-
Фракционирование белковых экстрактов листьев я стоолои Coriandrum sativum сульфатом шмоння к изучение лентганс* ак-
! тивности в их отдельных фракциях.
3. Установление углеводспецифичности лекткиов листьев и
СТвблОЙ Coriondrum sativum.
-
Очистка белковых вкстрактов и выделение лектина аффинное хроматографией.
-
Электрофорегическая характеристика локтинов: установление субъединиц и их молекулярних масс.
-
Выявление лектйЯсвязывавдих белков в грубой митохондрн-альнои фракции головного мозга крыс и изучение влияния лектииа на Са , ыг+-ЛТФазную активность.
-
Изучение влияния лектина на миграционную способность лимфоцитов. ; *
Научная новизна работы. Впервые виявлена гемагглютинггрутоая активность экстрактов листьев и стеблей Coriandrum aativum. Установлено,- что лектинная активность в большей степепи проявляется' во фракции белков, высаливаемых при 40 насыщении сульфатом аммония. Лектин является галактозоспеци$ичннме что дало возможность его очистки более чем в 1000 pas иммобилизованной па трпс--акриле галактозой. Лектин состоим на двух субъвдиииц с молекулярными массами 66.83 кД и 74.98 кД. Лектинная активность-инги-бируется моносахаридом Д-галакїОзой. Яектпн термостабилок; лектинная активность полностью геряется посла 5-мпнутаого нагревания прв 70С. Лектин взаимодействует е белковой фракцией мемб- . рай ыаътв. крыс5 экстрагируемых Тритоном Х-100, s резко стикулк-pyes Са , Кб2+-АТФазнуш активность грубой шітохондрвальной фракции.
.Яектин Coriandrum sativum усиливает миграционную актив-. -;ость Т-клеток вплоть до 136$ в модели острого гдомерулонефрата. ::го дало основание для'заключения об актнгрихпг та -меток"и-
аозмояюстп целенаправленного использования лектшіа в игцуно-коррэкции дойного заболевания.
Впервые предложена технология получения лектина из Corion-drum sativum о высокой степенью чистоты для его массового производства.
Теоретическая и практическая значимость рпботи. Разработана технология получения галактсзоспеци.Тичного лектина из растения Coriandrum sativum . Исходя из тго положения, что Corian-druin aativum широко используется в качестве продукта питания, часто без предварительной термической обработки, представляет больной интерес изучение его влияния на функцию желудка^ китлеч-ннх эпителиальна клеток и на нврвно-мкшечпув ткань. Лектки mor-яо использовать в научных исследованиях с целью выявления наличия терминальной галактозы гликопротеинов клеточшпе и субклеточных мембран и для икмунокоррокции острого гломерулонефрита. В перспектива, выделенный нами лекгпп может стать объектом коммерческого бизнеса.
Апробация работы. Материалы диссертации апробированы на биохимическом семинаре кафедрі^, биодогли Тбилисского государственного университета (1989 г., 1991 г.),.на заседании биохимического общества Республики Грузия (1990 г.). Опубликована статья.-
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литература, объекта к їсттодов исследования полученных дашгах, их обсуждения н заключения. Работа содержит 4 таблицы, 7 рисунков и список цитируемой литератур»..
