Введение к работе
Актуальность исследования. Ишемическая болезнь сердца я атеросклероз занимают ведущее место в структуре сердечно-сосудистой патологии, в связи с чем вопросы этиологии и патогенеза атеросклероза находятся в центре внимания клиницистов, патофизиологов и в настоящее время, прежде всего, специалистов в области биохимии и клеточной биологии, поскольку, несмотря на многочисленные исследования остается открытым вопрос о ключевых этапах нарушения метаболизма в патогенезе атеросклероза.
В последнее десятилетие приоритетное место занимают исследования, посвященные изучению клеточно-молекулярных механизмов участия липопротеидов в развитии атероматозного поражения, среди которых наибольшее внимание привлекают исследования, выполненные на культурах фибробластов и клеток интимы аорты человека в культуре (Репин B.C.,1985-1987; ffoldatein , Brown, 1975-1984; dhazov , ?mimoY , 1982-1986; Orekhov ,1983-1988; langhton, 1988) .
Однако, хотя и установлено, что источником холестерина в атеросклеротических бляшках являются ЛПНП, поступающие в клетки путем рецептор-опосредованного и/или рецептор-независимого эндоцитоза, детально изучен их биосинтез и транспорт, процессы деградации этой группы "атерогеняых" липопротеидов изучены далеко не полно. В этом аспекте привлекают внимание отдельные сообщения (Шпикитер В.0.,1987; Sasahmra ,1988), свидетельствующие об участии лизооомального аппарата клеток интимы аорты и, в частности, протеолитических ферментов лизосом, в регуляции катаболизма ЖШП и указывающие на взаимосвязь между функциональным состоянием лизосом клеток эндотелия артерий и атероге-
- 2 -незом. Имеющиеся сведения позволяют рассматривать лизосомаль-дай аппарат клетки как одно из лимитирующих звеньев, регулирующих накопление ЛПШ в сосудистой стенке, а совокупность соответствующих биохимических характеристик функционального состояния ферментных систем лизосом и развития атероматозного поражения клеток интимы аорты человека как адекватные маркеры атероскле-ротического процесса. Вместе с тем поиск информативных критериев развития атеросклероза предполагает и возможность разработки системы оценки антнатероскдеротического и атерогенного действия отдельных компонентов пища, различных биологически активных соединений природного и синтетического происхождения, что будет в значительной мере способствовать разработке лечебных и профилактических мероприятии при поиска наиболее эффективных путей борьбы с данной патологией.
Цапь и задачи исследования. Целью работы явилось выяснение роли лизосоаального аппарата клеток интимы аорты человека а регуляции катаболизаа нативных а модкфацарозашшх форм ЛПШ; изучение взаимосвязи мезду функциональным состояние» протеоли-тзгческой системы лизосом интимы аорты д развитием атероматозного поражения; разработка многофакторясй система оценка анти-атерооклеротического действия различных синтетических и природных веществ, в том числе входящих в состав пищевых продуктов.
рсновные задачи исследования;
I» Изучить взаимосвязь между различныаг структурными ыо-дафшсациями ЛПНП и их атерогенностьо.
2. Исследовать роль аутофагоцитоза в регуляции рецептор-независимого эндоцитоза ШШ к развитии атероматозного поражения.
-
Исследовать роль протеолитической системы лизосом в катаболизме ЛПНП и развитии атерогенеза.
-
Разработать систему многофакторной оценки антиатеро-склеротического действия отдельных компонентов пищевых продуктов, некоторых природных и синтетических соединений по выявленным и существующим биохимическим маркерам атеросклероза.
Научная новизна. Впервые на культуре клеток интимы аорты человека установлено, что нарушение в функциональном состоянии лизосомального аппарата на уровне процессов аутофагоцитоза приводит к развитию атеросклеротического поражения клеток. Впервые выявлен факт обратной взаимосвязи между степенью накопления внутриклеточного холестерина в составе ЛИШ, пролиферативной активностью клеток и активностью комплекса карбоксильных и тио-ловых протеиназ лизосом. Впервые предложена и апробирована в эксперименте и клинике схема многофакторной оценки глтиатеро-склеротического и антиатерогенного действия отдельных компонентов пищи (белков, жиров, углеводов растительного и животного происхождения), индивидуальных природных и синтетических препаратов (всего свыше 100 видов: продукты, ЭПК, катехин, ализол, феонол, феонифлорин, пропранолол и др.), включающая первичный скрининг на культуре клеток интимы аорты человека; вторичный скрининг в эксперименте на животных с послппующей клинической апробацией.
Практическая значимость.
На основе полученных результатов разработаны комбинации различных индивидуальных соединений растительного происхождения, обладающие высокой антиатеросклеротической активностью; показана целесообразность использования в терапии сердечно-сосудистых заболеваний в -блокаторов в комплексе с препаратами анти-
--4-атеросклеротического действия; представлены рекомендации по использованию ряда природных соединений в качестве пищевых добавок с целью создания диетических продуктов для лечения и профилактики атеросклероза.
Апробация диссертации состоялась 9 июня 1989 года на межлабораторной научной конференции лабораторий энзимологии питания, углеводного и белкового обмена, липидного обмена и клинической биохимии Института питания АМН СССР. Диссертация рекомендована к защите.
Основные положения диссертации были доложены на: У-м Всесоюзном симпозиуме по биохимии липидов (Алма-Ата, 1987), 1-м Республиканском съезде кардиологов ТССР (Ашхабад, 1987), УШ Международном симпозиуме по атеросклерозу (Рим, 1988), Ж Международном симпозиуме по питанию и атеросклерозу (Капри,1988), П-м Республиканском съезде кардиологов Узбекистана (Ташкент, 1988), Ш-м Всесоюзном совещании по химии и применению комплек-сонов (Челябинск, 1988); ХШ Международном конгрессе Всемирной ассоциации сердца (Мичиган,1989), I Международном симпозиуме по сердечной недостаточности - механизму и лечению (Иерусалим, 1989); Всесоюзном симпозиуме "Лечение и профилактика инфаркта миокарда" (Гагра, 1989 ).
Публикации,: по материалам диссертации опубликовано 28 печатных работ, из которых 19 - в центральных и международных журналах.
Структура диссертации: Работа состоит из введения, обзора литературы, характеристики материала и методов, 5 глав раздела собственных исследований, заключения, выводов, списка литературы и приложения. Текст изложен на страницах машинописи, включая 25 рисунков и 49 таблиц. Список литературы содержит
- 5 -названия 555 работ.
