Введение к работе
Актуальность проблемы. Рстровирусы — семейство РНК—содержащих вирусов, две группы которых вызывают болезни человека: вирусы иммунодефицита человека (HIV—1 и HIV—2) - вочбудіпелн СПИДа и вирусы Т-клеточного лейкоза взрослых (HTLV— 1 и HTLV—2). Основной мишенью действия этих вирусов являются Т—лимфоциты, при этом инфекция HIV приводит к их гибели. Протеолитичсскис ферменты, закодированные в геноме рстровирусов, осуществляют специфический протеолиз вирусных пашбелков—предшественников, которьві1 абсолютно необходим для формирования зрелого инфекционного вируса. Протеиназа HIV способна также расщеплять кальмодулим и белки цитоскелета клетки-хозяина IShoeman ct al., 1993; Tomassclli & HeirHkson, 1994], что позг-щяет предположить, что она может вносить вклад в цитопатогсішость HIV.
Наличие в крови HIV—инфицированных пациентов антител к вирусной протеїпіазе [Boucher et al., 1989] указывает на возможность присутствия протеиназы вне инфицированной клетки. Поэтому, рассматривая роль протеиназы в патогенезе инфекции НГ', следует изучить её действие не только на внутриклеточные белки, но и на Пелки плазмы крови. В сравнительном аспекте также представляет интерес способность протеиназы нецнтопатогенного ретровируса HTLV расщеплять белки организма—хозяина. Наконец, представляется интересным сравнить эффективность пиролиза белковых субстратов . аспартилыплми протсиназами HTV и HTLV и другими протеолмт». іескими ферментами этого же класса.
Цлль работы состояла в поиске новых субстратов протеиназы HIV— 1 (в дальнейшем обозначается HIV) среди белков плазмы человека, в сравнении действия протяшаз HIV и HTLV—1 (в дальнейшем обозначается HTLV) на белки клетки—хозяина и плазмы крови, а также в сопоставлении их активности по этим белковым субстратам с активностью пепсина.
Научная новизна г практическая значимость работы. Показано, что протеиназа HIV способна расщеплять ряд физиологически вахшлх белков плазмы крови человека: оц-ингибитор протсиназ, антитромбин ПІ и
некоторые факторы системы комплемента, а также быстро взаимодействовать в плазме с с^-макроглобуллном с образованием ховалентных комплексов. Проведено сравнение действия на ряд невирусных белков протсинази HtV л протенназы другого рстровируса человека — HTLV, а также пепсина; показано, что эти три фермента обладают различной активностью ло невирусным белковым су*чпратам. Разработана % лодика выделения и очистки протеиназы HTLV в количествах, достаточных для проведения структурных исследований. _
Апробация работы. Материалы диссертации докладывались на XX Симпозиуме Европейской группы опухолевых вирусов, г.Иннсбрук, 1993 г., на IX Международном конгрессе но проблемам СПИДа, г. Берлин, 1993 г., на Кейстоуновском симпозиуме. "Структура и молскулярн.' і биология функций и ингибирования иротеиназ", г.Санта-Фс, 1994 г., на годичном собрании Немецкого вирусологического общества, Г.Франкфурт—на— Майне, 1994 г., и на конференции "Структура и функция протсолитических фермсіггов", посященной 90-лстию со дня рождения В.Ь.Орсховича, г.Москва, 1995 г.
Объём ц структура работы. Диссертация обіщш объемом страшад состоит из введения, обзора литературы (посвящен протеиназе HIV), обсуждения результатов, экспериментальной части и выводов. Она содержит 9 таблиц, 24 рисунка и список цитируемой литературы ( ссылок).
