Введение к работе
Актуальность выбранной темы
Классическая чума свиней (КЧС) - вирусная болезнь, характеризующаяся быстрым распространением, высокой контагиозностью и смертностью среди заболевших свиней. Она наносит большой экономический ущерб, особенно в условиях промышленного свиноводства. Борьба с КЧС базируется на быстрой и точной диагностике, специфической профилактике и ветеринар-но-санитарных мероприятиях.
До настоящего времени в России и странах СНГ для специфической профилактики КЧС широко применяются три вирусвакцины из штамма "К": "АСВ", "ВГНКИ", "ЛК-ВНИИВВиМ" (Н. К. Мищенко, Н. В. Лихачев 1968 г.; В. А. Сергеев и др. 1969г.; И. Ю. Хухоров, В. В. Куриннов, И. Ф. Вишняков и др. 1992 г.). Массированное применение этих вакцин в течение 70-х начале 80-х годов, с одной стороны, позволило стабилизировать эпизоотическую ситуацию по КЧС, значительно снизить заболеваемость и потери от КЧС, с другой стороны, делает невозможным серологический мониторинг, выделение и идентификацию изолятов вируса.
Использование вирусвакцин небезопасно с точки зрения возможной реверсии (непредсказуемой селекции штамма в сторону усиления вирулентных свойств), контаминации материала другими биоагентами в процессе приготовления вирусного сырья, длительности вирусоносительства у вакцинированных животных и тератогенного действия, сопровождающегося высокой перинатальной смертностью, что значительно осложняет применение вирус-вакцин в репродуктивных хозяйствах для иммунизации супоросных свиноматок.
Инактивированные тканевые препараты против КЧС, используемые в прошлом, не нашли широкого применения ввиду нетехнологичности и экологической опасности производственного процесса, несовершенства методов
контроля вакцин, слабого иммунологического эффекта и дороговизны получаемого препарата. Тем не менее, необходимость надежной и безопасной инактивированнои вакцины против КЧС очевидна.
Во ВНИИВВиМ разработана культуральная инактивированная вакцина против КЧС, технология изготовления которой основана на использовании вирулентного вирусного штамма "Ши-Мынь" и перевиваемой культуры клеток линии РК-15 (авторы Жестерев В.И., Балышева В.И., Устаров Р.Д., Чур-бановаГ.Н. 1995 г.).
Последние два обстоятельства (использование в производстве вирулентного штамма, невысокая технологичность культуры клеток) создают определенную эпизоотическую угрозу при обработке вирусного сырья и значительно усложняют (технологически и экономически) производство биопрепарата при его масштабировании. Цель н задачи исследований
В связи с вышеизложенным целью данной работы явилось усовершенствование технологии изготовления и методов контроля инактивированнои вакцины против КЧС и тактики ее применения.
Исходя из вышеперечисленного были поставлены следующие задачи:
-
Оценить существующие средства и методы процесса изготовления инактивированного препарата и выбрать технологически перспективную схему производства.
-
Усовершенствовать технологию изготовления инактивированнои вакцины против КЧС для промышленного производства.
-
Усовершенствовать методы технологического контроля инактивированнои вакцины против КЧС,
4. Оценить иммунобиологическую эффективность инактивированнои
вакцины против КЧС и разработать схему ее применения
5. Разработать научно-техническую документацию на инактивированный
препарат против КЧС.
Научная новизна результатов
Научная новизна работы, заключается в том, что:
В результате проведенных исследований экспериментально обоснована и практически апробирована технология изготовления эффективной инактивированнои вакцины против классической чумы свиней из вакцинного штамма без предварительного концентрирования вируса.
Изучена генетическая стабильность вакцинного штамма "ЛК-К" вируса КЧС, используемого для изготовления инактивированнои вакцины, на разных уровнях пассажей;
Впервые показано, что сернокислая медь в качестве инакгиванта способствует разрушению вирионной РНК до низкомолекулярньгх фрагментов нуклеотидов;
Впервые разработан и предложен способ оценки полноты инактивации вируса КЧС сернокислой медью, заключающийся в определении целостности вирионной РНК амплификацией различных участков генома вируса КЧС;
Разработана технология изготовления ВКПВ КЧС и изучены его иммунобиологические свойства в процессе длительного хранения и в составе инактивированнои вакцины против КЧС;
Впервые проведены исследования иммунореактивности трансгенных по гену соматотропного гормона свиней при вакцинации инактивированнои вакциной против классической чумы свиней. Практическая значимость результатов
Разработана безвредная, экологически безопасная и высокоэффективная инактивированная вакцина против КЧС из вакцинного штамма "ЛК-К" вируса КЧС, позволяющая рекомендовать ее для применения в племенных и репродуктивных свиноводческих хозяйствах;
Разработана к практическому применению НТД на инактивированную вакцину, утвержденная Департаментом ветеринарии МСХиП 28 декабря 1998г.;
Разработана технология изготовления ВКПВ КЧС для длительного хранения и экспресс изготовления из него инактивированнои вакцины;
Экспериментально разработан и предложен экспресс-метод оценки полноты инактивации вируса с использованием метода ПЦР, позволяющий в 8-Ю раз снизить время контроля остаточной инфекционности готового препарата;
Изучены иммунобиологические свойства инактивированнои вакцины против КЧС и предложена схема ее применения. Апробация работы и публикация результатов исследований Результаты исследований доложены на заседании ученого совета ВНИИВВиМ в апреле 1998г., научной конференции ВНИИВВиМ г. Покров, декабрь 1998г.
По результатам исследований опубликовано 11 печатных работ. Основные положения диссертационной работы выдвигаемые на защиту
1.Экспериментальное обоснование перспективности использования вакцинного штамма для производства инактивированнои вакцины против КЧС.
2.Технологические процессы изготовления инактивированнои вакцины против КЧС и методы контроля биопрепарата.
З.Обоснование перспективности использования метода ПЦР для оценки полноты инактивации вируса КЧС.
4.Технология получения ВКПВ КЧС для длительного хранения и перспективы его использования в производстве инактивированнои вакцины.
5.Схема применения инактивированнои вакцины против КЧС и ее эпизо-отологическая эффективность.
Объем и структура работы
