Введение к работе
Ашпушішш'іпіі іііглін, І'еіфодукіиііті-рсеиираіоріїї.нї синдром сшиїсії (І'І'СС) и ііііршшіїруснаи инфекции сішпеіі (МІН 1С) - чиї іп.ісококошаї тгнімс заболснанші сішпеіі, коїормс характеризуются нарушением функции ііоспронзнодстна у смішомагок, «боргами, рождением мСршмх пли слабых порослі' с ш.ісокоіі их смертностью (Б.Г. Орлянкпм и др.,1987; Л.П. Папин и др.,1994; И.II. Сюрин и др., 1998; Christiansen W.T. ., 1994).
П'СС з.'ірспісгрнроїшін и конце 80-х годші сначала и хспяі'Ісінах США и Канаді,!, а зачем и «о многих других странах (Bolncr Л. ct al.,1994; Martlassi II. сі nl.,1994). К середине 90-х годоп им была охпачена почти вся Европа (Christiansen W.T.,1994; Joo II..S..I994; ЛІЬіпа І;., 1997.1998). 13 России и и некоторых других сіранах СНГ І'І'СС реііісірпрусіся с 1993 гола (U.A. Мищенко и др., 1994; М.Ф, ІЗіїїііііякон и др., 1997).
Возбудитель рсііродуктініїїо-рссіпіраторпоіо синдрома сшнісіі - РИК-содержащим ннрус, огііосліцпііся к роду Arlcrivirus ссмсистиа Aitcriviridac, ппсрпыс был пмделеп м 1991 г. н пазили "ннрус Лелпстлд" (А.А. Колонцоп,І998; Мигріїу 1".А., 1996).
Мнсеонмс не м і,і і її кі і І'РСС наносят болі.шоіі экономический урон сішнотідчсским хозиііствам. І Іо данным различных источппкои, юдиная продуктивное і ь нрп ocipoll іісін.нііке І'І'СС снижается на 5-20 % (Van Alstiiie W.C!.. 1991; Zimmerman J.J., 1991; Мої tciiscn S., 1992).
Ннрус І'І'СС обладает пммуііосуіірссіїиш.іміі свойствами (Мінцспко В.А., 1995, 1997; Gajccki M.ct al., 1996) н зі о создаст предпосылки для іюліикнонспия вторичных вирусных или бактериальных инфекции (II.Л. Мінцспко. 1995). Усіаііоїшсііо, чиї п большинстве свиноводческих холііісін, неблаїоііодучіп.іх по І'І'СС, одноііремсіпіо циркулирует п ііііріюішрус сшнісіі (С.Л. ІСукуїнкпп, 2000; Chrislianson W.T., 1994).
IJ настоящее мремя и ряде стран основным среде і ном борьбы с ІІІЗІІС и І'І'СС является специфическая нрофшінкіика, для коюроіі ііримспяіоіся пнактпмііронаїпи.ш вакцины (ІІ.Г. Оршпкнп и др., 1988, 2000; II.И. Скіїорцопа и др.,1989; І).А. Мінцспко н др., 1996). Следовательно, разработка оісчесіисіміоіі
4 инактивированной эмульсионной ассоциированной вакцины против РРСС и ПВИС является актуальной задачей ветеринарной науки, применение которой позволит значительно улучшить эпизоотическую ситуацию по этим заболеваниям в стране.
Цели и задачи исследования. Основной целью данных исследований являлось разработать технологию изготовления и контроля иммуногенной активности инактивированной эмульсионной ассоциированной вакцины против РРСС и ПВИС.
Для_ви«олнения_поставленной~целіпіеобх()димо_бяло"ірешить-следующие-" задачи:
разработать оптимальные условия культивирования вируса РРСС, штамма "БД", в перевиваемой линии культуры клеток Магс-145;
разработать режим инактивации вируса РРСС димером этиленимина и подобрать приемлемый масляный адьювант для изготовления вакцины против РРСС;
разработать непрямой вариант ИФА выявления антител против вируса РРСС в сыворотках крови свиней для оценки у них поствакциналыюго иммунитета;
- изучить иммуногенные свойства инактивированной ассоциированной
вакцины против РРСС и ПВИС в лабораторных условиях и дать оценку
эффективности ее применения в производственных условиях.
Научная новизна исследований. Разработан метод культивирования вируса РРСС роллерным способом, при использовании которого вирус репродуцируется в высоких титрах.
Разработан режим инактивации вируса РРСС, штамм "БД", димером этиленимина.
Установлено, что на одновременное введение антигенов вируса РРСС и парвовируса свиней в составе ассоциированной инактивированной вакцины у свиней вырабатываются специфические антитела против РРСС и ПВИС на достаточно высоком уровне.
Установлено, что оптимальным соотношением инактивированных антигенов вируса РРСС и парвовируса свиней при изготовлении ассоциированной вакцины является соотношение 2:1 соответственно.
Разработана методика постановки непрямого варианта ИФЛ для выявления специфических антител против вируса РРСС с целью изучения поствакциналыюго иммунитета.
Практическая значимость исследований. Впервые разработаны технология изготовления и контроля эмульсионной инактавированнои ассоциированной вакцины против РРСС и ПВИС, а также наставление по ее применению.
На основании проведенных исследований составлена и утверждена Департаментом ветеринарии Минсельхоза России нормативно-техническая документация на вакцину эмульсионную инактивированную против РРСС и ПВИС. Вакцина производится на базе ВНИИЗЖ и широко внедрена в ветеринарную практику, показана ее эффективность в неблагополучных хозяйствах.
Разработаны, одобрены ученым советом и утверждены директором ВНИИЗЖ 11.04.2000г.:
"Методика получения антигена вируса репродуктивно-рсснираторного синдрома свиней для использования в иммуноферментном анализе";
"Методика определения антител в сыворотке кровн свиней к вирусу репродуктивно-респнраторного синдрома свиней методом непрямого иммуноферментнго анализа".
Публикации научных исследований. Но теме диссертации опубликовано 14 научных работ.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены на научных конференциях "Современные аспекты ветеринарной патологии животных" (Владимир, 1998г.), "Научные основы производства ветеринарных биологических препаратов" (Щелково, 2000г.), "Достижения молодых ученых - в ветеринарную практику" (Владимир, 2000г.), а также на заседаниях ученого совета ВНИИЗЖ в 1998-2001гг.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 168 страницах и содержит следующие разделы: введение, обзор литературы, результаты собственных исследований, обсуждение результатов исследований, выводы,