Введение к работе
1.1. Актуальность темы. Инфекционные болезни конечностей крупного и
мелкого рогатого скота занимают одно из ведущих мест в патологии этих
животных.
Некробактериоз КРС, широко распространившийся в нашей стране с середины 70-х годов, достиг своего пика заболеваемости к началу 90-х годов (Пыталев П.Н., 1996.) До настоящего времени является одной из важнейших болезней у этого вида животных в большинстве экономических районов России, Наметившийся на настоящее время некоторый спад заболеваемости, по мнению автора, связан с снижением поголовья, разукрупнением хозяйств и внедрением в практику средств специфической профилактики некробактериоза.
Копытная гниль по-прежнему остается одной из важнейших проблем инфекционной патологии овец. Ее доля в общей инфекционной патологии достигает 49%. Только по официальной, явно заниженной, статистике в период 1986-95 гг. ежегодно копытной гнилью заболевало до 190 тыс. голов овец (Шатохин Ю.Е., 1996).
При этих заболеваниях инфекционный процесс осложняется достаточно широкой ассоциацией микроорганизмов, и проявляется в виде гнойно-некротических поражений, локализующихся в области копыт. В последние годы в России разработаны и применяются вакцины против некробактериоза крупного рогатого скота и копытной гнили овец. Однако имеющиеся на ветеринарном снабжении препараты еще не совершенны. Существует необходимость в повышении их иммуногенной активности, оптимизации антигенной структуры, усовершенствовании технологии изготовления самих препаратов. При инфекционных болезнях конечностей перспективными представляются препараты на основе включения в антигенный состав кроме специфических возбудителей, ряда других микроорганизмов: стафилококков, стрептококков, актиномицет, клостридий, учитывая большое количество исследований указывающих на полиэтиологичность этих болезней.
1.2. Цель и задачи исследований. Целью настоящей работы явилось
усовершенствование ряда технологических приемов изготовления вакцин против
некробактериоза и копытной гнили и изучение факторов патогенное
возбудителя некробактериоза.
В соответствии с этим в задачи исследований входило:
1. Изучить некоторые биологические свойства (культурально-
морфологические, дермонекротические, гемагглютинирующие свойства,
фагоцитарную активность) культур возбудителя некробактериоза, используемых в
качестве производственных штаммов.
-
Приготовить питательные среды на основе гидролизатов соевой муки и кормового концентрата лизина и оценить их ростовые свойства стандартными методами.
-
Испытать указанные среды в сравнении со стандартными, с целью получения антигенов для ассоциированных вакцин, на примере вакцины против некробактериоза.
4. Отработать режимы инактивации антигенов стафилококков в процессе
промышленного изготовления вакцин.
5. Провести сравнительную оценку иммуногенности стафилококкового
бактерина и анатоксина на лабораторных животных.
1.3. Научная новизна. Доказана пригодность в качестве основ питательных
сред гидролизатов сои и сухого кормового концентрата лизина [СККЛ] для
приготовления вакцин против некробактериоза КРС - "Нековак" и копытной гнили
овец - "Овикон". Отработан ряд технологических параметров изготовления
данных вакцин, режим инактивации и оценена иммуногенность различных
антигенов из S.aureus. Изучены биологические свойства культур F.necrophorum и
A.pyogenes для оценки культур в процессе отбора и селекции производственных
штаммов и для оценки их иммуногенности.
Впервые проведены исследования по изучению фагоцитарной активности изолированных популяций нейтрофилов и лимфоцитов крови крупного рогатого скота и овец методами хемотаксиса и миграции в агарозе и установлен феномен коагуляции (аггрегации) нейтрофилов под воздействием культуры F.necrophorum. Указанный феномен может служить одним из объяснений механизма патогенеза и иммуногенеза при некробактериозе.
1.4. Практическая значимость работы. Усовершенствована технология
изготовления вакцин против некробактериоза КРС и копытной гнили овец.
Предложены заменители мясных основ питательных сред для культивирования
производственных штаммов - гидролизаты соевой муки и кормового концентрата
лизина. Усовершенствована методика получения стафилококкового антигена для
ассоциированной вакцины.
Результаты исследований использованы при переработке нормативной документации: "Инструкции по изготовлению и контролю вакцины против некробактериоза конечностей КРС - Нековак" и "Инструкции по изготовлению и контролю вакцины против заболеваний конечностей овец - Овикон".
1.5. Основные положения, выносимые на защиту:
1. Результаты изучения роста культур-продуцентов антигенов для
ассоциированных вакцин на питательных средах на основе гидролизатов соевой
муки и кормового концентрата лизина.
2. Усовершенствование режимов получения и оценка иммуногенности
стафилококковых антигенов.
' 3. Изучение фагоцитарной активности изолированных лимфоцитов и нейтрофилов с использованием реакций хемотаксиса, миграции в агарозе и опсоно-фагоцитарной реакции (ОФР).
4. Изучение свойств культур F.necrophorum и A.pyogenes с целью использования полученных результатов для оценки патогенеза и иммуногенеза некробактериоза.
1.6. Апробация работы и публикации. Материалы диссертации доложены
на научной конференции, посвященной 50-летию Воронежского ГАУ (Воронеж.
1996), 2-й международной научно-практической конференции "Актуальные
проблемы ветеринарно-санитарного контроля сельскохозяйствен-ной продукции (Москва, 1997), Ученых советах МГАВМиБ по итогам НИР в 1995-97 г.г., заседании Ветфармбиокомиссии при Департаменте ветеринарии МСХ РФ в 1997 г. и опубликованы в 4 научных работах (в т.ч. 1 - в печати).
1.7. Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 158 стр. машинописного текста и включает: введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения, список литературы и приложения.