Введение к работе
-]-
Актуальность темы диссертации. Особенности биологического развитая клеточных пушных зверей и необходимость защиты их от инфекционных болезней в возможно короткие сроки поставили перед учеными задачу по разработке новых высокоэффективных методол контроля за иммунным состоянием животных и группового применения биологических препаратов,
Эффективных, относительно нс длительных но времени, иммунологических методов оценки ностнакшнгалытого иммунитета против чумы плотоядных в настоящее время еще ие разработано.
Немаловажной проблемой, с которой сталкиваются при иммунизации животных против чумы плотоядных, является наличие материнских (колос гралышх) антител в организме молодых животных. По мнению многих исследователей (W. Chalmes and W. Baxcndale, 1994 и др.) материнские антитела, с одной стороны обеспечивают защиту молодняка от заболевания, а с другой, при их высоком уровне, препятствуют выработке антител в ответ на введение ваганні, Для решения этой проблемы одни авторы (S. Burtonboy, S. Charlier, et al., 1991) рекомендуют вводить вакцины щенкам в более высоких титрах или вводить ее дважды, другие (J. Gillespie, 1966) предлагают определять сроки вакцинации по титрам антител у матерей и времени элиминации колосгральных антител в организме молодых животных или использовать в качестве вакцинного штамма вирус кори (J, Baker, 1970; J, Wilson et al,, 1976).
Для групповой вакцинации пушных зверей против чумы плотоядных рядом авторов предложен аэрозольный метод (Jonhson et al., 1957; G. Chappuis, J. Terre, 1973; Г. А. Сафонов с соавт., 1976 и др.).
Этот метод отличается высокой производительностью, но имеются трудности в определении дозы вакцины, необходимы специальное оборудование, соответствующая подготовка помещений и при этом создается угроза рассеивания вакцинных штаммов во внешнюю среду.
Многие отечественные и зарубежные ученые для проведения массовых вакцинаций животных и птицы отдают предпочтение пероральной иммунизации Применение вакцин с водой или кормом (нероралъная иммунизация) метод простой, не требует специального оборудования, малотрудосмок, сводит до минимума ноз-
-2-можность рассеивания возбудителей вакцинных штаммов, доступен для применения в любых хозяйственных условиях и в дикой природе.
В медицинской практике показана возможность пероралыюй иммунизации людей против полиомиелита (М. П. Чумаков, 1960; М. И. Чумаков, М. К. Ворошилова, С. Т. Дзагуров, 1963 и др.), брюшнотифозной инфекции (А. II. Мешадова, 1974; Б. Б. Перший, 1976) и др.
В ветеринарии имеются данные по пероралыюй вакцинопрофклактике коли-бактериоза и сальминеяяеза телят и поросят (М. Л. Сидоров с соавт., 1979, 1981, 1981; В. С. Прудников, 3990), рожи свиней (Р. В. Душук и соавт., 1982), рожи и классической чумы (И. И. Кулеско, 1966), классической чумы диких свиней (А. С. Шашенъко, И. И. Добродеревец, Н. А. Ковалев, 1979; Е. М. Хрипунов, В. А. Мищанин, А, Н. Егоров и др., 1995), диких плотоядных животных против бешенства (G. Baer et.al., 1971; G. Debbie et. а!., 1974; G. Winkler et al„ 1975; А. С. Шашенъко, H. А. Ковалев, В. П. Да-выденко, 1986; и др.) и других болезней сельскохозяйственных животных и типы.
Сведений о пероралыюй имы^т-шзашш пушных зьерей, в частности норок, против чумы плотоядных в отечественной и доступной иностранной литературе нет.
Поэтому разработка методов ретроспективной диагностики и пероралыюй иммунизации норок против чумы плотоядных является актуальной проблемой (В. II. Сю-рин, Р. В. Белоусова и др,, 1991; G. Chappuis et, al, 1995).
Связь работы с крупными научными программами, темами. Работа выполнялась в БсдНИИЭВ им С. Н. Вышелесского в рамках темы 04 научных исследований лаборатории острых вирусных инфекций "На основе биотехнологических методов разработать и усовершенствовать средства диагностики и профилактики наиболее распространенных инфекционных болезней, позволяющие обеспечить стойкое благополучие хозяйств и сохранность животных до 95 - 98%" (Xs госрегистрации 142 от 6.12.93г.).
Цель и задачи исследования. Целью данной работы явилась разработка методов определения поствакципального противочумного иммунитета и пероралыюй иммунизации клеточных пушных зверей (норок) против чумы плотоядных. Для реализации поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1.Разработать метод контроля поствакщшального иммунитета против чумы плотоядных у животных С помощью РНГА;
-
Адаптировать вакцинный штамм чумы плотоядных "ЭПМ" к культуре клеток куриных эмбрионов я разработать метод пероральной иммунизации норок против чумы плотоядных;
-
Отработать дозы вакцинного штамма "ЭПМ"' при пероральной иммунизации корок против чумы пгогоядчых;
-
Изучить сроки формирования и продолжительность противочумного иммунитета у норок при пероральной иммунизации;
-
Изучить протавоэшпоотическую эффективность перорального метода иммунизации норок против чумы в производственных условиях;
6. Изучить экономическую эффективность пероральной иммунизации тюрок
против чумы плотоядных и метода определения поствакцинального противочумного
иммунитета с помощью РИГА.
Паучнаи новизна полученных результатов. Впервые предложен высокоэффективный способ изготовления эритроцитарного диагностикума, основанный на сен-сибилиззуции стабилизированных акролдеином, тонизированных эритроцитов крупного рогатого скота вирусам чумы плотоядных с помощью коныогярующих веществ хло-рида хрома с трипанояым синим для диагностики и контроля ноствакцинадьного иммунитета у животных с помошыо РИГА. Впервые разработан метод пероральной иммунизации клеточных пушных зверей (норок) против чумы плотоядных, проведена адаптация вакцинного штамма ВЧП "ЭПМ" к культуре клеток КЭ. Определены долы пероральной вакцинации зверей, сроки формирования и продолжительность противочумного иммунитета. Изучены некоторые морфологические и биохимические показатели крови норок при пероральной иммунизации против чумы плотоядных.
Практическая значимость полученных результатов. На основания проведенных исследований разработаны:
3. Нормативно-техническая документация на набор жидкого эритроцитарного диагностикума чумы плотоядных для определения гуморального иммунитета е РИГА (ТУ РК 00028493,105-95; временная инструкция но изготовлению контролю и временное наставление по применению набора жидкого цветного эритроцитарного диагностикума чумы плотоядных).
2. Рекомендации по пероральной иммунизации порск против чумы плотоядных. (Утверждены департаментом ветеринарии МСХиП РФ).
Экономичсская значимость полученных результатов. Разработанный набор жидкого эритроцитарного диапюстикума чумы плотоядных животных для определения гуморального иммунитета в РНГА повышает производительность груда петерипарных специалистов и сокращает сроки исследований при снижении затрат труда и материалов в 7 раз. Экономический эффект РНГА для диагностики чумы плотоядных на один рубль затрат составил 7,8 рубля.
Псроральная иммунизация норок против чумы плотоядных позволяет в 6 раз повысить производительность труда ветеринарных специалистов и обслуживающего персонала и при этом снизить затраты труда и материалов на 45%. Экономическая эффективность пероральной иммунизации норок против чумы плотоядных составляет 548,7 руб. на один рубль затрат.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
материалы по разработке эритроцитарного диапюстикума с антигеном ВЧП для выявления антител в РНГА, позволяющей выявлять в короткие сроки колостраль-ные, пэствакциналыпле п постшіфекцношіьіе противочумные антитела у плотоядных животных;
материалы по разработке метода пероральной иммунизации норок против чумы плотоядных, показывающие его преимущество перед общепршіятими методами вакцинации зверей в условиях промышленного звероводства;
результаты определения иммунологической перестройки организма порок при пероральной иммунизации против 'гумы плотоядных, показывающие
изменения в состоянии иммунной системы животных в ответ на пероральное введение вакцины;
- результаты производственной проверки методов определения противочумных
антител с помощью РНГА и пероральной иммунизации норок против чумы плотояд
ных, показывающие их высокую противоэшиоотическую и экономическую эффектив
ность.
Личный вклад соискателя. Разработка набора жидкого эритроцитарного диагиостикума чумы плотоядных для определения гуморального иммунитета в РНГА и НТД па него проведена в соавторстве с академиком ААН РБ Н. А. Ковалевым, д.в.н. А. С. Шашеиько, К.В.Н. П. А. Красочко, м.н.с. М. М. Усеней.
Материалы яо изучению дозы, сроков формирования и продолжительности иммунитета, определению клинических, гематологических и биохимических показателей у перорально иммупизироьанних животных получены лично автором.
Работа по адаптации вакцинного штамма ВТШ "ЭПМ" к культуре клеток КЭ, разработке метола пероралыгой иммунизации норок против чумы плотоядных проведена совместно с д.в.н. А. С. Шашсиько.
Иммуноморфоло) ичеехпе изменения в лимфатических узлах и внутренних органах иероралыю иммунизированных норок изучены совместно с д.в.н. Л. С. Шашсиько, зав. вирусологическим отделом Витебской облветлабораюрии И, В. Шаденко, зав. диагностическим отделом Смоленской облветлаборатории Г. Л. Белоусовой.
Апробация результатов диссертации. Результаты исследований доложены и обсуждены:
1. На Ученом Совете Смоленской научно - исследовательской ветеринарной
станции (1994, Смоленск).
-
На международной научно - практической конференции (1995, Смоленск),
-
На Ветбиофармкомиссии МСХ РБ (1995, Минск)
4. На производственном совещании ветеринарных специалистов АОЗТ
"Гагаринский звероплемхоз"(1996, Гагарий).
5. На заседании лаборатории острых вирусных инфекций Белорусского научно-
исследовательского института экспериментальной ветеринарии им. С. Н. Вышелесеко-
го(] 996, Минск).
6. На международной научно - практической конференции (1996, Витебск).
Оиубликованпость результатов. По теме диссертации опубликовано 3 науч
ных работ, в которых изложены основные положения выполненных исследований.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 139 страницах машинописи и включает: введение, общую характеристику работы, основную часть, выводы, список использованных источников. Работа иллюстрирована 18 таблицами, 15 рисунками, 20 страницами приложений. Список использованной литературы включает 224 источника, в том числе 113 иностранных авторов.
