Содержание к диссертации
Введение
1.0. Обзор литературы 8
1.1. Химический состав, биологические свойства и применение прополиса в медицине и в ветеринарии 8
1.2. Криптоспоридиоз (вопросы эпизоотологии, патогенеза, патоморфологии и иммунитета) 25
2.0.Собственные исследования 39
2.1. Материал и методы исследований 39
2.2. Результаты собственных исследований 48
2.2.1. Иммунитет и его коррекция при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 48
2.2.1.1. Показатели естественной резистентности и их коррекция при колибактериозно - криптоспоридиозном заболевании поросят 48
2.2.1.1.1. Динамика изменения бактерицидной активности сыворотки крови 48
2.2.1.1.2. Динамика изменения лизоцимной активности сыворотки крови 52
2.2.1.1.3. Динамика изменения содержания бета-лизинов в сыворотке крови 55
2.2.1.2. Показатели фагоцитоза и их коррекция при ассоциативном колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 59
2.2.1.3. Коррекция показателей Т - и В систем иммунитета при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 66
2.2.1.3.1. Динамика изменения содержания в крови поросят Т - Е - РОК - лимфоцитов, Т - хелперов и Т - супрессоров 66
2.2.1.3.2. Динамика изменения содержания в крови поросят В - ЕАС - лимфоцитов 76
2.2.2. Обмен витаминов и их коррекция при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 80
2.2.2.1. Динамика изменения содержания водорастворимых витаминов в печени (Вь В2,С) 80
2.2.2.2. Динамика изменения содержания жирорастворимых витаминов в печени (А, Е) 86
2.2.3. Состояние ферментативного обмена и его коррекция при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 90
2.2.3.1. Динамика изменения содержания лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят 90
2.2.3.2. Динамика изменения содержания амилазы в сыворотке крови поросят 94
2.2.3.3. Динамика изменения содержания аспартатаминотрансферазы в сыворотке крови поросят 98
2.2.4. Микробиоценоз кишечника и его коррекция при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят 102
2.2.4.1. Динамика изменения содержания нормофлоры (бифидобактерий и лактобацилл) 102
2.2.4.2. Динамика изменения содержания условно - патогенных микроорганизмов 109
3.0. Экономическая эффективность проводимых мероприятий 119
4.0. Обсуждение исследований 121
Выводы 130
Практические предложения 132
Библиографический список 133
- Химический состав, биологические свойства и применение прополиса в медицине и в ветеринарии
- Показатели фагоцитоза и их коррекция при ассоциативном колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят
- Динамика изменения содержания лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят
- Обсуждение исследований
Введение к работе
Актуальность работы. Заболевания молодняка сельскохозяйственных животных продолжают оставаться одной из серьезнейших причин, сдерживающих развитие животноводства и наносящих ему ущерб. Ведущее место среди них отводится желудочно-кишечным заболеваниям инфекционной и паразитарной этиологии. В последние годы в ряду кишечных заболеваний, обуславливающих диарею паразитарной этиологии, особое внимание исследователей привлекают криптоспоридиозы (Тайчинов У. Г., 1996, 1997, 1999; Шагимухаметов Р. Б., Ман-напова Р. Т., 1999; Калюжный С. И., Ларионов С. В., 2002; Никитин В. Ф. 2001, 2003; Мальцев А. В., Сковородин Е. Н., 2003).
У поросят - сосунов энтериты паразитарной этиологии зависят от целого ряда энтеропатогенов и, прежде всего, от колибактериоза. В наших исследованиях эти два заболевания более чем в 90% случаях имели ассоциативное взаимообуслав-ливающее течение.
В этой связи целью наших исследований явилось - изучить состояние иммунного статуса, витаминно-ферментативной активности организма и микробиоценоза кишечника при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят и разработать наиболее эффективные методы их коррекции.
В задачи исследований входило:
1 Установить влияние на иммунный статус при ассоциативном колибактери-озно-криптоспоридиозном заболевании поросят комплексной антикокцидантной и антибиотикотерапии монензином и колимицином на фоне иммуностимуляции прополисом и пробиотикотерапии препаратами ветом - 1.1. и лактобифид со сравнительной оценкой- а) динамики бета-лизинов в сыворотке крови, б) активности фагоцитарных реакций в организме, в) динамики Т - Е - РОК - лимфоцитов, Т - хелперов, Т - супрессоров и В - ЕАС - лимфоцитов в крови.
2. Определить влияние комплексной терапии при ассоциативном колибактери-
озно-криптоспоридиозном заболевании поросят на состояние витаминно-
ферментативного обмена с изучением:
а) динамики содержания водорастворимых витаминов в печени,
б) динамики содержания жирорастворимых витаминов в печени,
в) динамики в сыворотке крови ферментов углеводного обмена,
г) динамики в сыворотке крови ферментов белкового обмена.
3. Изучить состояние микробиоценоза кишечника поросят при ассоциативном
колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании, а также на фоне антикокци
дантной и антибиотикотерапии, иммуностимуляции и пробиотикотерапии с оп
ределением:
а) динамики нормофлоры (бифидобактерий и лактобацилл),
б) динамики условно-патогенных микроорганизмов (эшерихий, псевдомонов,
клостридий).
Научная новизна исследований заключается в следующем: - впервые изучено состояние естественной резистентности, динамики бета-лизинов, фагоцитарных реакций, Т Е - РОК, R - рАГ пимфпнитгтп и их попу-
І ІИМИОТЄКА ,. I
ляций в крови, показатели витаминно-ферментативного обмена и естественного микробиоценоза кишечника больных ассоциативным колибактериозно - криптос-поридиозным заболеванием поросят и на фоне комплексной антикокцидантной и антибиотикотерапии, иммуностимуляции и пробиотикотерапии.
Для профилактики иммунодефицитов и дисбактериозов, восстановления вита-минно-ферментативных реакций, с целью повышения сохранности поголовья, среднесуточных приростов живой массы предложена комплексная терапия с применением кокцидиостатика монензин, антибиотика колимицин, прополиса и пробиотиков ветом-1.1. и лактобифид.
Практическая значимость работы. Данные о влиянии прополиса, пробиотиков ветом- 1.1. и лактобифид, на фоне антикокцидантной и антибиотикотерапии, при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят на состояние иммунного статуса, витаминно-ферментативного обмена и микробиоценоза кишечника, способствующие выздоровлению животных, повышению среднесуточных приростов живой массы и сохранности поголовья, позволяют рекомендовать их производству как эффективное средство для комплексного лечения.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту:
-
Колибактериозно - криптоспоридиозное заболевание поросят приводит к развитию глубоких вторичных иммунодефицитов, дисбактериозов и нарушению витаминно-ферментативного обмена в организме животных.
-
Комплексное лечение кокцидиостатиком монензин, антибиотиком колимицин на фоне иммуностимуляции прополисом и пробиотикотерапии ветом- 1.1. и, особенно, лактобифид способствует восстановлению иммунного статуса, витаминно-ферментативного обмена, микробиоценоза кишечника при ассоциативном колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят.
Апробация работы. Материалы диссертационной работы доложены на ежегодных конференциях Башкирского государственного аграрного университета (2001-2004 г г), на международной научно-практической конференции «Современные проблемы иммуногенеза, теории и практики борьбы с паразитарными и инфекционными болезнями сельскохозяйственных животных» (Уфа, 2004), на расширенном заседании кафедры паразитологи, микробиологии и вирусологии (протокол №11 от 04.07.05).
Публикация результатов исследований. Основные положения диссертационной работы опубликованы в 3 научных статьях.
Структура и объем работы. Диссертация изложена на 159 страницах компьютерного текста, включает введение, обзор литературы, собственные исследования, обсуждение результатов исследований, выводы и практические предложения. Работа иллюстрирована 23 таблицами и 17 рисунками. Библиографический список включает 205 наименований, в том числе 34 иностранных автора.
Химический состав, биологические свойства и применение прополиса в медицине и в ветеринарии
Прополис (пчелиный клей, уза, смола) - это натуральный продукт, который вырабатывают пчелы. Название его происходит из двух терминов: латинского «про» - спереди и греческого «полис» - крепость, город. Пчелы используют его как строительный материал для шпаклевки щелей в улье и между потолочинами, сокращения леткового отверстия на зиму. Приклеивания плечиков рамок к фальцам улья (отсюда другая версия происхождения его названия от греческого слова «прополисо» - заделывать, заклеивать, замазывать), полировки ячеек сотов и придания им прочности и стерильности.
Другое предназначение прополиса в улье - выполнять роль антисептического и дезинфицирующего средства. Известно, что трупы зажал енных «чужеземцев» (других насекомых, улиток, слизняков, ящериц, мышей и пр.), замурованных в прополис, не подвергаются процессу гниения.
Пчелы различного происхождения по-разному относятся к сбору прополиса. Больше всех его заготавливают горные кавказские, меньше - среднерусские и украинские, индийские вообще не заготавливают (М. Ф. Шеметков с соавт., 1987). Сигналом для сбора и откладывания прополиса служит потеря тепла через верхние щели и усиленный приток свежего воздуха через леток. Поэтому в середине июля - начале августа пчелы начинают заделывать сначала щели, а затем уменьшают леток. За сезон, при благоприятных условиях, пчелиная семья может принести в улей до 150-200 г прополиса (С. А. Поправко, 1975, 1976). Из этого количества можно отбирать без ущерба для жизнедеятельности пчелиной семьи до 80 г., чтобы увеличить сбор прополиса и сохранить качество этого естественного продукта, необходимо выполнять правила заготовки прополисного сырья. Целесообразно собирать прополис с периферии пчелиного гнезда, где он содержит меньше примеси воска. Эту операцию осуществляют многократно без разборки гнезда: прополис очищают с верхних брусков рамок и фальцев улья, при этом с крайних двух рамок по всей длине их верхнего бруска, а с остальных -на расстоянии 3-Ю см от плечиков рамки.
Чтобы прополис содержал минимальное количество механических примесей, надо беречь этот ценный пчелиный продукт от загрязнения: не допускать попадания пчелиного клея на землю, в загрязненную тару. После извлечения клея из гнезда, его надо складывать в чистый ящичек, противень или на вощеную бумагу. Не допускается извлечение и очистка прополиса с помощью химических реактивов и воды, или нагреванием, так как при этом теряются активные вещества, ухудшается лечебное действие по причине снижения качества. Не допускаются в прополисе примеси гудрона, краски, металла, сахарного сиропа, сахарно-белковой подкормки и др. Прополис упаковывают в вощеную бумагу или пергамент, а затем в пакеты из пищевого полиэтилена и укладывают в сухую, чистую, без посторонних запахов тару. Хранить прополис надо в хорошо проветриваемых и затемненных помещениях при температуре не 25 С. Срок хранения прополиса 10 лет, в течение которого сохраняются биологически активные компоненты пчелиного продукта (Т. В. Вахонина с соавт., 2000).
Натуральный прополис имеет горьковато - жгучий вкус и обладает очень стойким приятным специфическим запахом, напоминающий запах тополиных почек, березы, хвои, меда, воска и ванили. Окраска прополиса - от темно - зеленой до желто-бурой и коричневой. В состав прополиса входит воск (до 30-35%) и частицы пыльцы (Н. И. Кривцов, В. И. Лебедев, 1993; А. Ф. Загретдинов, 2001).
Вопросу происхождения прополиса посвящены исследования многих авторов (С. А. Поправко, 1969, 1984, 1985; И. Чижмарик, И. Ма-тель,1980). С одной стороны прополис представляет собой смолистый осадок, получаемый при переваривании пыльцы, с другой - пчелы могут собирать его с почек тополя, березы, ольхи и других деревьев.
Пчелы не собирают прополис в готовом виде, а создают из предшественников растительного происхождения. Часть химических компонентов -предшественников в организме пчелы изменяется, к ним добавляются продукты биосинтеза самой пчелы и вследствие этого химический состав прополиса не идентичен химическому составу предшественников. В своем составе прополис содержит воск (до 30-35%) и частицы пыльцы (Н. И. Кривцов, В. И. Лебедев, 1993).
Прополис хорошо растворяется в спирте, эфире, жирах. При температуре 15 С он становится твердым, хрупким, при температуре - 36 С - мягким и пластичным, при 80-100 С - плавится (В. Г. Макарова с соавт., 2000). Чистоту и качество прополиса определяют по органолептическим показателям и по таким физико-химическим свойствам, как окисляемость, механические примеси, фенольные соединения, йодное число, качественные реакции на флавоноидные соединения (М. Ф. Шеметков с соавт., 1987).
В состав прополиса входит более 50 веществ. Они объединены в четыре группы: смолы (55%), бальзамы (15%), эфирные масла (8%) и воск (22%) (Т. В. Вахонина, 1976; Bankova V., Christov R. et al, 1995). Соотношения этих компонентов могут варьировать в зависимости от того, какие растения преобладают в данной местности, от природно-климатических условий и времени года.
Смолы представлены, главным образом, органическими кислотами: коричная, 4-окси-З - метоксикоричная, феруловая, кофейная, кумаровая, ванилиновая, бензойная, обладающие выраженными антибактериальными свойствами. Выделен также коричный, п -кумаровый, конифиловый спирт.
Бальзамы представляют собой сложные продукты, в состав которых входят эфирные масла, дубильные вещества, терпеноиды, ароматические альдегиды (ванилин, изованилин). Эфирные масла обуславливают аромат и вкус прополиса. Их состав зависит от вида растений и района их произрастания (С. А. Поправко с соавт., 1984, 1975,1976; A. Derevici, 1976). Воск прополиса мягкой консистенции, светло-коричневого цвета.
В составе прополиса выделены флавоны (хризин, тектохризин, апеге-нин, лютеин и др.), флавонолы (кварцетин, кемпферол, рамноцитрин, галантин, изальпинин), флавононы. Установлено наличие терпеноидов - ацетокси-бетумнола, бисаболола и ароматического изованилина (4-окси-З-метоксибензальдегида). В прополис выделениями мандибулярных желез рабочих пчел всегда попадает жирная ненасыщенная кислота (10-окси-2-деценовая), которая обуславливает его противоокислительные свойства.
Минеральный состав прополиса очень разнообразен (А. К. Кудашев, 1970; В. П. Карданова с соавт., 1980; 3. Г. Чанышев, А. К. Кудашев, 1988). В нем найдены: калий, кальций, фосфор, натрий, магний, сера, хлор, железо, марганец, цинк, медь, селен, фтор, кобальт и многие другие. Особенно много в прополисе цинка и марганца. Цинк, медь и марганец способствуют процессам роста, развития и размножения, выполняют важные функции в процессе кроветворения, регулируют обмен веществ, позитивно влияют на функции половых желез. Цинк продлевает действие инсулина, повышает остроту зрения. Установлено, что темный прополис содержит больше минеральных веществ. (В. Д. Шашкова с соавт., 2000).
В небольших количествах в прополисе содержатся витамины: А, Е, тиамин (В і), рибофлавин (В2), пиридоксин (В6), никотиновая и пантотеновая кислота.
В малых концентрациях обнаружены в прополисе азотсодержащие соединения: белки, амиды, амины, аминокислоты. В состав прополиса входит 17 аминокислот: аспарагиновая, глютаминовая, вален, аргинин, аланин, лизин, триптофан, лейцин, фенилаланин, цистин, метионин, серии, треонин, гликокол, пролин, гистидин, тирозин.
Биологические свойства прополиса очень разнообразны. Это объясняется, прежде всего, наличием значительных количеств фенольных соединений (флавоноидов и фенолоксикислот). Кислоты, которые входят в состав прополиса, проявляют выраженное антибактериальное действие (Dimov - V., Ivanovska, 1992, Scheller - S.,1992; А. Ф. Загретдинов, 2001). Например, феруловая кислота угнетает рост грамположительных и грамот-рицательных микроорганизмов. Кроме того, фенолоксикислоты обладают вяжущим действием, что способствует заживлению ран и язв, а также желчегонным, мочегонным, капиляроукрепляющим и противовоспалительным действием. (М. Ф. Шеметков с соавт., 1987).
Показатели фагоцитоза и их коррекция при ассоциативном колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят
Динамика фагоцитарной активности нейтрофилов в крови поросят представлена в таблице 5, на рис. 4.
Фагоцитарная активность нейтрофилов крови поросят 1 контрольной группы, за период опытов, колебалась на уровне от 46,3 до 54,4%, увеличиваясь в возрастном аспекте до 30 дня исследований.
Фоновое значение фагоцитарной активности нейтрофилов крови больных животных 2-5 групп было понижено в 1,58-1,65 раза (на 17,1-18,4%).
Уровень фагоцитарной активности нейтрофилов крови животных 2 группы интенсивно падал и к 10 дню уступал исходному и контрольному значениям - в 1,21 раза (на 5,1%) и 2,01 раза (на 24,3%), к 20 дню - в 1,46 раза (на 9,2%) и 2,63 раза (на 32,6%), к 30 дню - в 1,57 раза (на 10,6%) и 2,93 раза (на 35,8%), к 60 дню - в 20,4 раза (на 14,9%) и 3,76 раза (на 39,5%).
У поросят 3 группы максимального значения фагоцитарная активность нейтрофилов крови достигла на 60 день опытов, составив 41,6%, и превысив фоновый показатель в 1,45 раза (на 12,9%), результаты 10, 20 и 30 дней — в 1,28 раза (на 9,0%), в 1,12 раза (на 4,3%) ив 1,03 раза (на 1,1%). Показатели поросят 3 группы превышали данные больных животных 2 группы: на 10 день - в 1,35 раза (на 8,5%), на 20 день - в 1,87 раза (на 17,3%), на 30 день - в 2,18 раза (на 21,9%) и на 60 день - в 2,91 раза (на27,3%). При этом они не достигали контрольного уровня и уступали ему: на 10 день - в 1,49 раза (на 15,8%), на 20 день - в 1,41 раза (на 15,3%), на 30 день - в 1,34 раза (на 13,9%) и на 60 день - в 1,29 раза (на 12,2%).
Фагоцитарная активность нейтрофилов крови животных 4 группы повышалась по срокам опыта более интенсивнее. По отношению к фону она увеличилась к 10 дню - в 1,32 раза (на 9,0%); к 20 дню - в 1,59 раза (на 16,6%);к 30 дню - в 2,26 раза (на 35,1%) и к 60 дню - в 2,18 раза (на 33,0%). Уровень исследуемой величины в 4 группе, во все сроки эксперимента, превышал значения его у поросят 2 и 3 групп: на 10 день - в 1,53 раза (на 12,8%) и 1,13 раза (на 4,3%), на 20 день - в 2,23 раза (на 24,5%) и 1,19 раза (на 7,3%о), на 30 день - в 3,39 раза (на 44,4%) и 1,56 раза (на 22,5%), на 60 день - в 4,26 раза (на 46,6%) и 1,46 раза (на 19,3%).
Самая высокая фагоцитарная активность нейтрофилов крови была зарегистрирована у поросят 5 группы. Она превышала показатели животных 2, 3 и 4 групп, соответственно: на 10 день - в 1,64 раза (на15,3%), в 1,21 раза (на 6,8%) и 1,07 раза (на 2,5%), на 20 день - в 2,43 раза (на 28,6%), в 1,3 раза (на 11,3%) и 10,9 раза (на 4,1%), на 30 день - в 3,69 раза (на 50,0%), в 1,69 раза (на 28,1%) и 1,09 раза (на 5,6%), на 60 день - в 4,48 раза (на 49,8%), в 1,54 раза (на 22,5%) и 1,05 раза (на 3,2%). Показатели фагоцитарной активности нейтрофилов крови поросят описываемой группы, на 10 и 20 дни, уступали контрольным цифрам в 1,23 раза (на 9,0%) и 1,08 раза (на 4,0%), а к 30 и 60 дням, напротив, превышали их- в 1,26 раза (на 14,2%) и 1,19 раза (на 10,3%).
Динамика изменения фагоцитарного числа представлена в таблице 6, на рис. 5.
Показатель фагоцитарного числа (ФЧ) нейтрофилов крови поросят 1 контрольной группы до 20 дня опыта умеренно повышался в возрастном аспекте, достигнув 6,7 ед. Его колебание, за период опытов было в пределах от 4,88 до 6,7 ед.
Фоновый показатель больных поросят 2-5 групп был понижен в 25,73-3,16 раза (на 2,2-5,4 ед.).
Во 2 группе отмечалось дальнейшее понижение фагоцитарного числа. К 10 дню эксперимента его значение было ниже первоначального показателя в 1,17 раза (на 0,4 ед.), к 20 дню - в 1,35 раза (на 0,7 ед.), к 30 дню - в 1,59 раза (на 1,0 ед.) и к 60 дню - в 2,08 раза (на 1,4 ед.). Значения фагоцитарного числа у поросят 2 группы значительно уступали контрольным цифрам на эти сроки опыта - в 2,30 раза (на 3,0 ед.), в 3,35 раза (на 4,7 ед.), в 3,65 раза (на
4.5 ед.), и в 4,9 раза (на 5,1 ед.).
В 3 группе значение фагоцитарного числа повысилось к 10 дню - в 1,56 раза (на 1,4 ед.), к 20 дню - в 1,84 раза (на 2,1 ед.), к 30 дню - в 2,04 раза (на 2.6 ед.), к 60 дню - в 2,0 раза (на 2,05 ед.) по сравнению с фоновым уровнем.
Описываемый показатель превышал его значения у поросят 2 группы: на 1 Одень - 1,69 раза (на 1,6 ед.), на 20 день - в 2,3 раза (на 2,6 ед.), на 30 день в 3,0 раза (на 3,4 ед.), на 60 день - в 3,85 раза (на 3,7 ед.). При этом он не достигал контрольного уровня, уступая ему: на 10 день - в 1,36 раза (на 1,4 ед.), на 20 день - в 1,46 раза (на 2,1 ед.), на 30 день - в 1,22 раза (на 1,1 ед.), на 60 день — в 1,28 раза (на 1,4 ед.).
Более активное повышение фагоцитарного числа нейтрофилов наблюдалось у животных 4 группы. К 10 дню опытов оно повысилось в 1,62 раза (на 1,6 ед.), по сравнению с фоновым показателем, к 20 дню - в 2,19 раза (на 3,1 ед.), к 30 дню - в 2,77 раза (на 4,6 ед.), к 60 дню - в 2,85 раза (на 4,8 ед.). Показатели животных 4 группы на всех этапах исследований превышали данные поросят 2 и 3 групп: на 10 день - в 1,83 раза (на 1,9 ед.) и 1,08 раза (на 0,3 ед.), на 20 день - в 2,85 раза (на 3,7 ед.) и 1,24 раза (на 1,1 ед.), на 30 день - в 4,24 раза (на 5,5 ед.) и 1,41 раза (на 2,1 ед.), на 60 день - в 5,69 раза (на 6,1 ед.) и 1,48 раза (на 2,4 ед.).
Максимальный показатель фагоцитарного числа регистрировался у животных 5 группы. Он был выше по сравнению с данными поросят 2,3 и 4 групп, соответственно: на 10 день - в 1,91 раза (на 2,1 ед.), в 1,13 раз (на 0,5 ед.) и 1,05 раза (на 0,2 ед.); на 20 день - в 2,95 раза (на 3,9 ед.), в 1,28 раза (на 1,3 ед.) и 1,04 раза (на 0,2 ед.); на 30 день - в 4,47 раза (на 5,9 ед.), в 1,49 раза (на 2,5 ед.), и 1,06 раза (на 0,4 ед.); на 60 день - в 5,54 раза (на 5,9 ед.), в 1,44 раза (на 2,2 ед.). На данном сроке эксперимента значение фагоцитарного числа поросят 5 группы незначительно уступало показателям животных 4 группы - в 1,03 раза (на 0,2 ед.). На 10 и 20 дни исследований описываемый показатель у животных 5 группы был ниже контрольной цифры в 1,21 раза (на 0,9 ед.) и 1,14 раза (на 0,8 ед.), а на 30 и 60 дни опыта, напротив, превысил контрольный уровень - в 1,23 раза (на 1,4 ед.) ив 1,13 раза (на 0,8 ед.).
Таким образом, колибактериозно - криптоспоридиозное заболевание поросят приводит к выраженному нарушению в организме защитной реакции фагоцитов. Антикокцидантная терапия на фоне антибиотикотерапии, имму-ностимуляции и пробиотикотерапии способствуют восстановлению функции фагоцитов.
Динамика изменения содержания лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят
Результаты исследований динамики лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят представлены в таблице 16, на рис. 10.
Фоновые значения лактатдегидрогеназы в сыворотке крови больных поросят 2-5 групп были понижены до 6,10 - 6,40 мкМ пирувата. В контрольной группе содержание лактатдегидрогеназы к началу опытов составило 9,14 мкМ пирувата и имело тенденцию к увеличению в возрастном аспекте. К 10 дню опытов рост показателя исследуемой величины, по сравнению с фоном, был в 1,16 раза (на 1,46 мкМ пирувата), к 20 дню - в 1,25 раза (на 2,26 мкМ пирувата), к 30 дню - в 1,31 раза (на 2,86 мкМ пирувата) и к 60 дню - в 1,49 раза (на 4,46 мкМ пирувата).
У животных 2 группы отмечалось снижение уровня лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят по срокам исследований. К 10 дню опытов он снизился, по сравнению с фоновым показателем - в 1,12 раза (на 0,66 мкМ пирувата), к 20 дню - в 1,19 раза (на 0,96 мкМ пирувата), к 30 дню - в 1,36 раза (на 1,61 мкМ пирувата) и к 60 дню - в 1,48 раза (на 1,98 мкМ пирувата). Показатели животных 2 группы значительно уступали данным животных контрольной группы: на 10 день - в 1,95 раза (на 5,16 мкМ пирувата), на 20 день - в 2,22 раза (на 6,26 мкМ пирувата), на 30 день - в 2,67 раза (на 7,51 мкМ пирувата), на 60 день - в 3,3 раза (на 9,48 мкМ пирувата).
У животных 3 группы содержание лактатдегидрогеназы имело тенденцию к умеренному увеличению по срокам опыта. На 10 день оно было по сравнению с фоном - в 1,2 раза (на 1,27 мкМ пирувата), на 20 день - в 1,45 раза (на 2,85 мкМ пирувата), на 30 день - в 1,68 раза (на 4,27 мкМ пирувата), на 60 день - в 1,79 раза (на 4,95 мкМ пирувата). Данные животных 3 группы во все сроки опытов превышали значения 2 группы: на 10 день - в 1,39 раза (на 2,12 мкМ пирувата), на 20 день - в 1,78 раза (на 4,0 мкМ пирувата), на 30 день - в 2,35 раза (на 6,07 мкМ пирувата) и на 60 день - в 2,73 раза (на 7,12 мкМ пирувата), но уступали результатам контрольных животных 1 группы: на 10 день - в 1,4 раза (на 3,04 мкМ пирувата), на 20 день - в 1,25 раза (на 2,26 мкМ пирувата), на 30 день - в 1,14 раза (на 1,44 мкМ пирувата) и на 60 день - в 1,21 раза (на 2,36 мкМ пирувата).
Показатели поросят 4 группы имели более выраженную тенденцию к увеличению. На 10 день опытов разница между фоном и полученным значением была в 1,24 раза (на 1,54 мкМ пирувата), на 20 день - в 1,63 раза (на 4,06 мкМ пирувата), на 30 день — в 1,94 раза (на 6,04 мкМ пирувата) и на 60 день - в 2,07 раза (на 6,82 мкМ пирувата). Показатели животных 4 группы во все сроки исследований превышали данные поросят 2 и 3 групп: на 10 день -в 1,46 раза (на 2,5 мкМ пирувата) и 1,05 раза (на 0,38 мкМ пирувата), на 20 день - в 2,04 раза (на 5,32 мкМ пирувата) и 1,14 раза (на 1,32 мкМ пирувата), на 30 день - в 2,77 раза (на 7,9 мкМ пирувата 5) и 1,18 раза (на 1,88 мкМ пирувата), на 60 день - в 3,21 раза (на 9,1 мкМ пирувата) и 1,18 раза (на 1,98 мкМ пирувата). Уровень лактатдегидрогеназы в сыворотке крови поросят 4 группы на 10 и 20 дни уступал уровню контрольной группы - в 1,34 раза (на 2,66 мкМ пирувата) и 1,09 раза (на 0,94 мкМ пирувата), а на 30 день напротив, был выше контрольной цифры - в 1,04 раза (на 0,44 мкМ пирувата). К концу опыта (60 дней) данный показатель вновь понизился - в 1,03 раза (на 0,38 мкМ пирувата).
Содержание ЛДГ в сыворотке крови у животных 5 группы к 10 дню эксперимента увеличилось, по сравнению с фоном - в 1,32 раза (на 2,02 мкМ пирувата), к 20 дню - в 1,79 раза (на 4,94 мкМ пирувата), к 30 дню - в 2,11 раза (на 6,93 мкМ пирувата) и к 60 дню - в 2,32 раза (на 8,22 мкМ пирувата). Во все сроки опыта показатели поросят 5 группы были выше животных 2, 3 и 4 групп, соответственно: на 10 день - в 1,52 раза (на 2,82 мкМ пирувата), в 1,09 раза (на 0,7 мкМ пирувата) и 1,04 раза (на 0,32 мкМ пирувата); на 20 день - в 2,18 раза (на 6,04 мкМ пирувата), в 1,22 раза (на 2,04 мкМ пирувата) и 1,07 раза (на 0,72 мкМ пирувата); на 30 день - в 2,93 раза (на 8,68 мкМ пирувата), в 1,25 раза (на 2,61 мкМ пирувата) и 1,06 раза (на 0,73 мкМ пирувата); на 60 день - в 3,51 раза (на 10,34 мкМ пирувата), в 1,29 раза (на 3,22 мкМ пирувата) и 1,09 раза (на 1,24 мкМ пирувата). Показатели 5 группы на 10 и 20 дни опытов уступали контрольным цифрам - в 1,28 раза (на 2,34 мкМ пирувата) ив 1,02 раза (на 0,22 мкМ пирувата), а на 30 и 60 дни превышали их - в 1,09 раза (на 1,17 мкМ пирувата) ив 1,06 раза (на 0,86 мкМ пирувата)
Обсуждение исследований
Анализ результатов исследований иммунного статуса, биохимических показателей и микробиоценоза кишечника при колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят показал, что в организме животных развиваются явления выраженных вторичных иммунодефицитов, дис-бактериозов, нарушается витаминно-ферментативный обмен. Эти изменения в сторону иммунодефицитов сопровождались понижением естественной резистентности (бактерицидной и лизоцимной активности сыворотки крови), фагоцитарных реакций, затормаживанием активности Т - Е - РОК - лимфоцитов, Т - хелперов, В - ЕАС — лимфоцитов, при активизации реакции Т -супрессоров.
По результатам проведенных исследований к концу опытов бактерицидная активность сыворотки крови поросят 2 группы уступала показателям контрольных животных в 6,82 раза (на 36,7%), лизоцимная в 6,81 раза (на 18,6%). Исследования показателей Т - и В - систем иммунитета выявили глубокие отличия их от уровня у здоровых животных. Т - Е - РОК - лимфо 122 циты в крови были ниже контрольного значения в 3,25 раза (на 30,2%), Т -хелперы в 3,5 раза (на 16,0%), В - ЕАС - лимфоциты в 3,1 раза (на 9,9%). Параллельно с угнетением Т - Е - РОК - лимфоцитов, Т - хелперов, В - ЕАС -лимфоцитов у больных поросят отмечалась выраженная активизация Т - су-прессоров в крови - в 1,47 раза (на 9,1%). Таким образом, при развитии ассоциативного колибактериозно-криптоспоридиозного заболевания в организме поросят наблюдается последовательное торможение как клеточных, так и гуморальных факторов защиты. Данное обстоятельство согласуется с данными литературы (Е. С. Лейкина, 1981; Э. X. Даугалиева, 1991; С. Е. Ремизова, 2002; С. И. Калюжный, 2004; G. R. Rolley et al., 1980; J. F. Urban et al., 1984). В системе иммунитета особое место занимает фагоцитоз. Это и мощный неспецифический барьер, и фактор, принимающий участие в специфических реакциях организма. Как неспецифический механизм фагоцитоз наряду с гуморальными компонентами (комплемент, бета-лизины, лизоцим) и другими физиологическими механизмами обеспечивает невосприимчивость организма к широкому кругу патогенов. Поэтому можно судить по фагоцитозу о таких физиологических явлениях в организме, как гомеостаз, реактивность, устойчивость. В нашем случае показатели фагоцитарных реакций в организме больных поросят были подавлены, и к концу опыта фагоцитарная активность нейтрофилов крови животных 2 группы уступала показателю контрольных животных в 3,76 раза (на 39,5%), фагоцитарное число в 4,92 раза (на 5,1 ед.). Концентрация криптоспоридий в кишечнике изменяла нормальное состояние микробиоценоза. По нашим данным это выражается в нарушении соотношения между бифидо - и лактофлорой и условно-патогенными микроорганизмами. К 60 дню опыта уровень бифидобактерий и лактобацилл в кишечнике животных больных ассоциативным колибактериозно - криптоспо-ридиозным заболеванием был ниже, чем в контроле в 2,77 и 3,45 раза (на 7,8 и 7,6 lg КОЕ/г). Затормаживание активности нормофлоры сопровождалось активным размножением условно-патогенных эшерихий, псевдомонов и кло-стридий. К 60 дню их уровень превышал контрольные цифры в 3,36 раза (на 11,6 lg КОЕ/г), в 2,04 раза (на 4,3 lg КОЕ/г) и 1,76 раза (на 3,9 lg КОЕ/г). Эти изменения развивались на фоне нарушения ферментного и витаминного обмена и проявлялись в виде уменьшения выработки в организме поросят ферментов углеводного и белкового обменов: ЛДГ, АСАТ, амилазы, жиро - и водорастворимых витаминов.
В конечном итоге, среднесуточный прирост живой массы поросят 2 группы составил лишь 90 г, сохранность - 25%.
Следовательно, в условиях СТФ, неблагополучных по колибактериозно - криптоспоридиозному заболеванию поросят необходимы мероприятия по коррекции иммунного статуса, микробиоценоза и биохимической реактивности организма с применением иммунологических, микробиологических, па-разитологических методов.
Комплексная антикокцидантная терапия монензином и антибиотикоте-рапия колимицином (3 группа) способствовали некоторым позитивным перестройкам, но не восстанавливали нарушенный иммунный баланс, микробиоценоз кишечника и биохимические реакции в организме животных. Все исследованные нами параметры иммунологического равновесия в организме (факторы естественной резистентности, Т - Е - РОК - лимфоциты, Т - хелпе-ры, В - ЕАС - лимфоциты, фагоцитарная активность нейтрофилов крови); микробиоценоза (показатели нормофлоры); биохимической активности (уровень витаминов А, С, Е, Вь Вг в печени), синтез ферментов углеводного и белкового обмена (ЛДГ, амилазы, АСАТ) имели достоверное повышение, по сравнению с их уровнем у поросят 2 группы, но значительно уступали таковым у поросят 1 и всех остальных опытных групп. Эти данные свидетельствуют о том, что только антикокцидантная терапия монензином и антибиоти-котерапия колимицином при ассоциативном колибактериозно-криптоспоридиозном заболевании поросят недостаточны, ибо с одной стороны криптоспоридии и бессистемное повышение уровня гемолитических ко-либактерий вызывают глубокие деструктивные изменения, йммунодефициты и дисбактериозы в организме, с другой стороны антикокциданты и антибио 124 тики сами по себе усиливают в организме супрессивные реакции. Подобные данные описаны при сальмонеллезно-криптоспоридиозном заболевании у поросят Р. Т. Маннаповой (1998,1999), стрептококково - криптоспоридиоз-ном заболевании у телят Р. Б. Шагимухаметовым (1999,2000), аскаридиозно - гетеракидозном заболевании у кур С. Е. Ремизовой (2004,2005), криптоспо-ридиозе у телят С. И. Калюжным (2004).
Восстановление иммунобиологической реактивности организма, состояния микробиоценоза кишечника на фоне активизации биохимических реакций отмечалось в организме у поросят 4 и, особенно 5 групп, которых на фоне антикокцидантной и антибиотикотерапии подвергали иммуностимуля-ции прополисом и пробиотикотерапии препаратами ветом - 1.1. (4 группа) и лактобифид (5 группа).
Комплексная терапия способствовала значительной активизации резистентности животных. Бактерицидная активность сыворотки крови поросят 4 и 5 групп к концу опыта превышала показатель больных животных в 7,19 и 7,8 раза (на 39,0 и 42,9%). Показатель лизоцимной активности сыворотки крови был выше параметров поросят 2 группы в 9,46 и 9,96 раза (на 27,1 и 28,7%). Лизоцим - белковое вещество, фермент с молекулярной массой 14400, содержит 129 аминокислот, образующих единую полипептидную цепь. Обладает сильным растворяющим действием в отношении мукополи-сахаридов оболочки ряда видов микробов. Помимо прямой антибактериальной активности он обладает свойствами активации клеток РЭС и стимуляции фагоцитоза. Повышение факторов естественной резистентности под влиянием данной комплексной терапии следует рассматривать как весьма благоприятный фактор. Подобные исследования состояния естественных защитных механизмов при ассоциативных инвазиях проводились многими авторами (А. М. Буканов с соавт., 2004; А. В. Красников, 2004; Г. Н. Худов, 2004). При этом большое значение повышению естественных защитных сил организма поросят следует придать исследованному в этой группе животных прополису.
