Введение к работе
Актуальность теш. В Российской Федерации и других странах проводится большая работа по профилактике инфекционных болезней, являющихся общими для человека и животных (зооантропонозы), к которым относится и бруцеллез.
Для диагностики бруцеллеза у животных используют бактериологический, серологические и аллергический методы исследований с учетом клинических признаков болезни и эпизоотодогических данных. Серологические методы являются основным, а иногда и единственным критерием оценки благополучия животных по бруцеллезу, так как при проведении бактериологического исследования от больных не всегда удается выделить культуры возбудителя.
В то и? вреыя в сыворотке крови отдельных ливотных из благополучных по бруцеллезу хозяйств нередка выявляют антитела, вступавшие во взаимодействие с бруцеллезный антигеном. В работах Mai Iman V. J., 1930, Ciojrlla Z. ,1948, Пайкова Т. a, I960, Орлова E. С., 1954, Вегпип D.f. ,1956, Иванова И.Ы. ,1959,Гупаленко А.М., 1967, Feeley 6.С. ,1968, Сазонова M.R. ,1971,0hara S. et al. 1974, Ээванника И а ,1975, Nielsen К., 1980, Касьянова А.Й , 1982, Corbel M.GL ,1985, йэсилова И. А., 1992, Сочнева ЕЕ, и др. ьвеханивм возникновения такого феномена получил различную интерпретацию. К причинам, способствующим возникновению этих реакций, относят нарушения физиологического состояния организма животных, повышение уровня "нормальных" антител, различные патологические процессы в организм? животного, несоблюдение сроков проведения исследований после иммунизации скота и сенсибилизация ан-тигеннородственными бруцеллам микроорганизмами. В большинстве случаев такие реакции, проявляются в низких титрах, но при инфицировании животных Y.enterocolltica, перекрестные реакции к антигенам бруцелл
отвечают в высоких титрах (6-ой доклад комитета экспертов по бруцеллезу ФЛО/ВОВ, 1986).
Роль бактерий вида Y. enterocolltica в патологи селъскохозиист-венных кавотных и их внзчение в возникновении перекрестных серологических реакций, при исследовании сыворотки крови животных на бруцеллез научена крайне недостаточно. Неполное освєерниє получили также вопросы эпизоотологии кероиниозов, клинического проявления и иатодов диагностигаї болезни. В свяби с этим ваяное научное и практическое значение приобретает исследования, направленные на разработку эффективных методов дифференциация перекрестных серологических реакций и оценка специфичности традиционных методов диагностики бруцеллеза при сенсибилизации животных антигеннородственными микроорганизмами.
н,ель и задачи работы. Целью наших исследований явилась разработка метода, поэволяодэго дифференцировать реакции, вызываемые У. enterocolltica при проведении диагностических исследований на бруцеллез у кивотных. На разрешение были поставлены следующие задачи:
изучить биологические свойства гоаммов Y. enterocol і t lea, выделенных от животных, в сравнении с референтный штаммами иерсиний серовариамтов: 0:9;0:3;0:бБ;О:б и отработать методику бактериологической диагностики иерсиниозов у яивотньос;
разработать методику изготовления антигенов для выявления антител к иерсиниям различных серовариантов в реакции агглютинации и подучить гипериммунные специфические актисывороткн;
изучить в сравнительном аспекте антигенные свойства кишечных иерсиний различных серовариантов и степень их антигенного родства с бруцеллами в прямой и перекрестной реакции агглютинации, РСК (РДСК). РБП и КР.
разработать методику серологической дифференциации неспецифических реакций при исследовании кивотных на бруцеллез;
провести сравнительное изучение возможности использования аллергенов из S- и R- форм бруцелл для дифференциальной диагностики бруцеллеза от кшечкого иерсиниоза, вызываемого серовариантоы 0:9;
разработать метод дифференциации перекрестных серологических реакций, в том числе обусловленных Y.enterocolltlca сероварианта 0:9, в благополучных по бруцеллезу хозяйствах.
Научная новизна Установлена циркуляция Y. enterocolltlca у крупного рогатого скота и лошадей в хозяйствах ряда областей Нечерноземной зоны РФ.
Изучены биологические свойства выделенных культур в сравнении с референтными штаммами иерсиний серовариантов 0:3; 0:6В; 0:6; 0:8; 0:3. Показано,что антигенное родство иерсиний с бруцеллами выражено только у сероварианта О: 9.
Б экспериментальных и производственных условиях установлены перекрестные серологические реакции к бруцеллезному антигену в диагностических титрах (50-400 ЫЕ/мл), вызванные инфицированием дивотных Y.enterocolltlca 0:9.
Разработан метод комплексной дифференциации перекрестных серологических реакций, в том числе обусловленных Y. enterocolltlca 0:9. возникащих при исследовании нивотных на бруцеллез в благополучных хозяйствах.
Установлено, что у искусственно зараженных и естественно инфицированных иерсиниями животных реакция гиперчувствительности замедленного типа ГРГЗТ) при исследовании с бруцеллезным аллергеном -"бруцеллином И»'- не проявляется (авт. свидетельство N 1567984 от 29.01,87г), что позволяет использовать ей для дифференциации бруцеллеза и иерсиниоза
Практическая ценность. Внедрены в практику ветеринарных лаборатории России и других стран СНГ экспресс-метод дифференциации неспе-
- 4 -цифических показаний РА при исследовании сывороток крови животных на бруцеллез, методика дифференциации бруцеллеза и кишечного иерсинио-ва, вывеиваемого возбудителем Y. enterocol it lea се роварканта 0:9 и методика бактериологического исследования животных на иерсиниоз, нашедшие отражение в штодических рекомендациях.
Апробация работы. Материалы диссертации доложены и одобрены на научной конференции посвяп^нной, 40-летию победы в Великой Отечественной войне (1985), на Всесоюзной конференции "Актуальные вопросы профилактики бруцеллеза и организации медицинской помощи больным", Новосибирск (1889), на научных конференциях молодых ученых ВЙЭВ (1987,1989,1990), на научной конференцки"Щюблеш иаьюкания синтеза и производства новых препаратов для ветеринарии", Самарканд (1994), на заседаниях методических комиссий и Ученого Совета ВЙЭВ (1986-1994), на межлабораторном совещании сотрудников ВЙЭВ (1994).
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 9 работ, в том числе одна брошюра и авторское свидетельство на изобретение.
Ва ващиту выносятся:
материалы сравнительного изучения свойств кишечных иерсиний различных серовариантов;
результаты изучения роли перекрестных серологических реакция, вызываемых Y. enter-cool it іса серовара 0:9 при диагностике бруцеллеза;
метод дифференцин перекрестных серологических реакций, обусловленных антигеннородственными бруцеллод микроорганизмами, в том число Y. enteroooittlca сероварианта 0:9, регистрируемых в благополучных по бруцеллезу животноводческих хозяйствах.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на -/^ страницах машинописного текста, содержит 25 таблиц и состоит из введения, обзора литературы, методической части, собственных исследований, обсуждения полученных результатов, выводов, практических пред-
лояений, списка использованной лотератури и приложения. Библиография содержит 106 отечественных и 170 иностранных источников.