Введение к работе
Актуальность темы. В условиям современного свиноводства дм увеличения продуктивности животных, предупреждения многих заболеваний наряду со специфической профилактикой необходимо изыскивать новые способы укрепления здоровья и стимуляции обшей реактивности организма жігаотньїх, в том числе и с помощью биологически активных веществ, а такие за счет улучшения содержания, кормления, создания благоприятного микроклимата нт.д. (Г.К.Волков, Н. Гегамян, А.Ф.Кузнедав, А.Мысик,М.С. Найденскнй.С. И. Плященко, В .Пономарев и др. )
Становление естественной резистентности любого живого организма происходит постепенно — от рождения молодняка до полной стабилизации у взрослого животного. Однако даже при идеально созданных условиях содержания и выращивания новорожденных животных наблюдают достаточно резкие спады естественной резіктеїтюсти их организма, так называемые иммунодефвдиты (провалы иммунитета, иммунные ямы) или критические периоды (КП). Последние могут быть вызваны физиологическими или технологическими причинами, а часто наслаиваясь одни на другие, предрасполагают организм к болезням различной этнологии и даже с отходом молодняка. Поэтому изучение факторов естественной устойчивости, познание особенностей физиологического и иммунологического статуса и профилактика этих критических периодов может в значительной мере стоить заболеваемость и гибель поросят. А это, в конечном итоге, позволяет повышать продуктивность животных и рентабельность производства. В качестве корректора >мм у «дефицитного состояния для свиноматок и поросят наибольший иигерес представляет новый ветеринарный препарат Анандин, который был впервые применен нами на супоросных свиньях и новорожденных поросятах.
Пели и задачи исследования. Целью настоящей работы было изучение эффективности применения «Атандина» в качестве иммуностимулирующего средства для свиноматок и поросят в критические периоды их развития.
В связи с этим для решения поставленной цели необходимо было решить следующие задачи:
1.Изучить влияние препарата «Анандощ», вводя его дважды супоросным свиноматкам (супоросность-бО и 90 суток) в дозе 15мг/кг массы тела на их организм (т.е. свиноматок) и па организм поросят, полученных от них
клиническое состояние свиноматок н их потомства, включая исследования ко програм мы нпронзводствецкые показатели,
морфологичесыи и биохимические показатели крови,
неснецифические показатели несікщфичсской резистентности,
иммунологические показатели сыворотки крови
2.№учигь влияние препарата «Анандин» на поросятах 40-суточного возраста, вводя его двукратно в дозе 15мг/кг живой массы тела с интервалом в 7 дней, т.е. перед отъемом их отсвигаматокнпереводом их в группы поросят-отъемы шей
производствениые показатели, клиническое состояние поросят
морфологические и биохимические показатели крові^ иммунобиологические показатели
показатели неспецифическойрезистекгности
Научная новів на. Впервые на свиноматках и поросятах изучено действиг нового ветеринарного препарата «Анандин» в качестве иммуностдаулирующего средства (цоза 13 мг/кг массы тела внутримышечно) в период супоросностн свиноматок (60 и 90 суток) и поросятам перед огьем он (вдараст 40 суток).
Изучены и представлены данные ж» влиянию анашшна при введении его супоросным свиноматкам на состояние этих животных в период супоросностн и лактации, а также на организм поросят, полученных от них.
Впервые изучено влияние анавдина (двукратное внутримышечное введение поросятам в возрасте 40 суток) перед их отъемом с целью снижеіия стресса.
Впервые получены и обработаны іимунплогические показатели сыворотки крови поросят НСТ-тесту (гест восстановления нигросинего тетрааолия) и ЛКТ-тесту (лизосомалыю*атнонный тест), которые указывают на кислорода а висим ую и кислороднезависичую стадию фагоцитоза; ЦИК (циркулирующие иммунные комплексы) и РТМЛ (реакция торможения миграции лейкоиитовХ с ФГА (фіпогемотлнл-енином)исКонА (конвалиномХ отражающие функциональное состояние гуморального и клеточного иммунитета.
Изучены копрологическис и клинические данные, морфологические и биохим ические показатели крови и хозяйственно-производственные показатели и выявлено положительное влияние введения внащнша в целом на организм свиноматок и поросят.
Ціпа кгичес кое з наченпс работы. Выполиешше исследования и получеішие результаты позволяют использовать препарат Анаїщнн в„. качестве эффективного имыунокорректора дій супоросных свиноматок и поросят.
Полученные да гаме свидетельствуют о том, что введение супоросным свиноматкам (с у порос кость 60 и 90 дней) аианяина в дозе 15мг/кг шложнгелыым образом сказывается на состоянии этих животных в период «упоросности и лакгацаи, а также способствует получению более жизнеспособного потомства (поросят). . . .
Введение анандина поросятам в дозе 15 мгЛт в возрасте 40 суток и повторно через неделю повышает естественную резистентность их организма, укрепляет иммунную систему и профилактнрует стрессовое состояние в период отъема.
Вопросы выносимые на защиту Назащитунамнвыносятсяследующне вопросы:
-
Исследование влияния иммуностимулятора «Аиандин» в производственных условиях на организм свиноматок в последнюю треть супоросиости и Организм поросят полученных от них.
-
Профилактическое использование «Анандина», в качестве иммунокорректора в критический период отъема молодняка свиней, исследование состояния иммунной системы поросят до и после применения «Анандина»,
Структура в объЕм диссертации Работа изложена на 107 страницах, включает 21
таблицу,21 рисунок. Список литературы включает 143 наименования, втом числе 55
на иностранных языках.
Апробация работы. Основные положения диссертации доложены и обсуждены на Еонфсренщих профессорско-преподавательского состава, научных сотрудников н аспирантов (Са.нкг-Петербург,С-ПбГАВМ, 2000.2002Х на конференциях молодых ученых и студентов (Санкт-Петербург, С-Лб ГАВМ, 2003) и конференции, посвященной В0-летню МВА <Москва,МВА, 1999).
^СОБСТВЕННЫЕ ИССЛЕДОВАНИЯ
2.1. Материал, место и методика исследования
2.1.1. Общая характеристика объектов.
Научно-производственный опыт по изучению действия анандина был поставлен на поросятах свинофермы «Дружба» АОЗТ «ДетскосельскнЙ» Ленинградской области. Лабораторные исследования проводили на кафедре ветеринарной гигиены и санитарии СПб ГАВМ в период с 2001 по 2003 гг, (номер государственной регистрации 01,20.03.12868). Для проведения исследования использовали препарат Ананднн, изготовленный фирмой «Медитэр» (патент МЙО801 08)l
Свинарники, в которых проводили опыты, представляют собой прямоугольное здаюк размером 82 х 9 м, высотой 2,5 м, с чердаком, столбы-кирпичные, стены-забраны деревом. Световой коэффициент составляет 1:12. Расположение станков-двухрядное, 40 станхо-мест.
Размеры станка: длина 1,98 м, глубина 3,45 м, в котором выделено отделение для поросят, оборудованное инфракрасными лампами для обогрева поросят. Кормоиавиный проход, шириной 2,1 м, расположен по центру свинарника. Пол в станках деревянный. Уклон пола в сторону навозных канавок.
Вентиляция в свинарнике естественная, пригочно-вытяжная.
Рацион свиноматок и поросят сбалансирован по основным питательным веществам, витаминам н минеральным элементам. Кормлеігае животных производится по принятому распорядку дня влажным к нешавкам и по нормам ВИЖа. Поение живо г мах осуществляется из автопоилок ПАС-2А, установленных в станках.
Научно-производственный опыт был проведен в зимний период в двух сериях.
В первой серии опытов ЗО^ти отобранным свиноматкам супоросиостью 60 суток (сентябрь-декабрь 2000г.) вводили анандин из расчета 15 мгЛт живой массы-это опытная группа животных, для контроля были взяты под наблюдение еще 30 свиноматок, у которых опорос пдаїшровался в те же сроки, что и в опытной группе. В течение супороенэсти и лактации за этими свиноматками, а также за поросятами вели визуальные наблюдения -внешний вид, поведение, клиническое состояние, брали и исследовали кровь, учитывали производственные показатели.
В период супоросности н лакташш за свиноматками и их поросятами (опытной н контрольной группой) вели наблюдения и исследовали кровь, кал и другие клинические показателя.
Во второй серии опытов (февраль-май) исследования были проведены на поросятах в возрасте 45 суток. Опытной группе (30 поросят) вводили анандин в дозе 15 мг/кг живой массы, а контрольной группе анандин не вводили. Лабораторные исследования крови, кала проводили до и после введении ананаяна. Этот возрастной период совпадал со временем отъема от свиноматок и перевода поросят в другие помещения. Он в литературе часто характеризуется как третий критический период в жизни поросят.
2.1.2.Методы могигиенических исследований
Для определения показателен микроклимата: температуры, относительной влажности, скорости движения воздуха, наличия вреднодействуюших газов (аммиак, сероводород, диокспл углерода) в животноводческих помещениях была использованы общепринятые методики.
Температуру и влажность измеряли аспирашюккым психометром МВ-4м, динамику этих показателей контролировали недельилм термографом М-16 и гигрографом М-21.
Скорость движения воздуха определяли шаровым кататермометром Хил да.
Содержания аммиака, сероводорода н диоксида углерода определяли с помощью газоанализатора УГ-2.
Все показатели микроклимата определялись ежедекадно вЗ смежных дня, три раза в сутки, в трех точках: в торцах, на двух уровнях - 0,5 и 1,5 м от пола и в центре помещения;
параметры микроклимата в течение суток регистрировали непосредственно в зоне нахождения животных в S-9, 14-15 н 20-21 час.
2.1.3.Методы гематологических исследований
Для определения состояния естественной резистентности и иммунобиологической реактивности организма животных были использованы методики клинических, морфологических, биохимических и иммунобиологических исследований. Кровь для исследований брали иї хвостовой всім.
Количество эритроцитов и лейкоцитов в крови определяли традиционным способом в счетной камере ГЬряева с использованием меланжеров дая разведения крови (И.М .Беляков и другис,1992). Содержание гемоглобіни крови определяли гемоглобнн-циающным по методу поЛ-М.Пнменовойи Г.ВДерввда (1974). Для определения содержания гемоглобина в одном эритроците (СГЭ) и цветного показателя крови (ЦПК) использовали номограммы (Ф.ФДиковский,198І). Лейкоцитарную формулу выводили на основе подсчета клеток в мазках, окрашенных по Романовскому— Гимза.
Содержание общего белка определяли рефрактометром «РЛУ», белковых фракций -методом электрофореза на бумаге. Фракционирование сывороточных белков проводили на аппарате УДФ, предназначенном для разделения белков и других высокомолекулярных соединений, В исследованиях применяли вероналовыЯ буфер с рН 8,6.
Для определения неспешф ической реактивности органшма поросят использовали следующие тесты:
-
Л 1С отымая активность сыворотки крови
-
Бактерицидная активность сыворотки кроен.
Лизоцнмную активности сыворотки крови определяли нефлометрнческим методом в модификации А.Ф.Куэтцова (1975J. Суточную агаровую культуру M.Iysodecticus использовалив качестве тест-культуры,
Бактерицидную активность определяли по методу О.В.Смирновой и ТАКузьмгагай (1966). В качестве тест-микроба использовали суточную бульонную культуру S.dublin, штамм 23а 5.
2.1.4 Методы клинических икопрологнческих исследований
При проведении клинических исследований были применены методы визуальной и инструментальной оценки дня определения общефункционального состояешя телят. Учитывали следующие показатели: массу тела, температуру, дыхание, пульс, окраску елю истых оболочек, подвижность, реакцию на внешние раздражители, поедаем ость корма.
Копро логические исследования включали в себя оценку консистенции, цвета, запаха: наличие растительной клетчатки, рН, жира и жирных кислот, крахмала, детрита,
растворимого белка, билирубина и стеркобилина. Посев проб кала проводили на питательные среда с последующим выявлением микробной и грибной контаминации.
Анализ показателей консистенции, цвета, запаха фекалий, рН, а также миробнологические исследования клетчатки и детрита проводили по А.Н.Смирнову.
Для определенна жира и жирных кислот пользовались следующей методикой: небольшое колігчество кала помешали на предметное стекло, с предварительно нанесенным реактивом Соатгофа.
Присутствие крахмальных зерен, наблюдали в препарате, предварительно обработанном люголевским раствором, под микроскопом.
Билирубин и растворимый белок в кале определяли, используя пробу Трибуле-Вишнякова.
Опенку содержания билирубина, производили в пятибалльных плюсовых единицах.. При наліпии билирубина в пробирке с трихлоруксусиой кислотой наблюдается зеленое окрашивание (А,М.Смирнов, 1994).
Содержание стеркобилина определяли с помощью качественной пробы с уксуснокислым цинком по Шлезингеру.
Скрытую кровь в кале определяли, применяя бензидиновую пробу Адлер-Шлсзенгер-Хольста.
2.1.5. Методы и мму иол отческих исследований
При иммунологических исследованиях сыворотки крови поросят, для создания наиболее полной и объективной картины общего состояния животных были использованы как традиционные, так и цитохимические жилкофазные методики (В Л .Пастуше нков, КХА.Мигин, 1993>
Для изучения состояния иммунной системы животных использовали традиционные методики: Лизосомпо-катноиный -гест (ЛКТ), тест восстановления нитросинего тетразолня (НСТ% постановка реакции торможения лейкоцитов (РТМЛ) и определения в сыворотки крови уровня циркулирующих иммунных комплексов (ЩЖ).
При изучении метаболизма лимфоцитов с использованием цитохимической жидкостной методики определяли активность дегидрогеназ (фермент лимфоцитов): суклншт дегидротеназы (СДГ), лактат дегидрогеназы ^ПД Г>. альфа - глицерофосфат дегцдрогеназы (а-Г-фДГХ глюкозо-6-фосфат дегидрогеяяц (Г-б-фДГ), НАД и НАД4> -окендазы.
