Введение к работе
Актуальность темы. В структуре инфекционной патологии птиц по статистическим данным более 60,0 % составляют болезни бактериальной этиологии, из числа которых в период 2007-2011 гг. массовая доля сальмонеллеза составила 11,7 %, эшерихиоза – 63,0 % (Венгеренко Л. А., 2009, 2011; Фисинин В. И., 2007, 2011).
В этиологии сальмонеллеза птиц участвуют микроорганизмы S. typhimurium и S. enteritidis, а также S. gallinarum и S. pullorum, вызывающие пуллороз птиц отряда Куриные. Этиологическая структура эшерихиоза наиболее часто представлена серогруппами О1, О2, О26, О55, О78, О138 (Бессарабов Б. Ф., 1980, 2007; Кожемяка Н. В., 1982, 2008; Грошева Г. А., 1983; Стрельников А. П., 1987; Радчук Н. А., 1990; Гусев А. А. и соавт., 1992; Козак С. С., 1992, 2011; Тугаринов О. А., 1993; Сидоров М. А. и соавт. 1995; Панин А. Н. и соавт., 1995; Ленев С. В., 1996; Шустер Б. Ю., 1996; Субботин В. В., 1997; Куликовский А. В., 1998, 2011; Малик Н. И. и соавт., 1998; Яременко Н. А., 1998; Каврук Л. С. и соавт., 1999; Пирожков М. К., 1999, 2002; Степаненко П. П., 1999; Виноходов В. О., 2000; Ленченко Е. М., 2000, 2011; Капустин А. В., 2001; Степаненко И. П., 2001; Венгеренко Л. А., 2003; Андреева Н. Л. и соавт., 2004; Бовкун Г. Ф., 2004; Салаутин В. В., 2004; Борисенкова А. Н. и соавт., 2004; Светоч Э. А., 2004; Крупальник В. Л., 2005; Скородумов Д. И. и соавт., 2005; Гусев В. В., 2006; Павлова И. Б., 2007; Галазин Н. М. и соавт., 2007; Рождественская Т. Н., 2009, 2011; Кононенко А. Б. и соавт, 2011; Смирнов Д. Д., 2011; Eickhoff T. C., 1981; M. D. Galvez A., 1989; Collins, 2001; Janice Y. C., 2011). Установлено, что при болезнях бактериальной этиологии в биотопе желудочно-кишечного тракта диких и синантропных птиц преобладают микроорганизмы родов Salmonella, Escherichia, Staphylococcus, Streptococcus, Pasteurella (Белоусова Р. В., 1977; Сюрин В. Н., 1979; Бессарабов Б. Ф., 2005, Багрецова А. Л., 2005; Бондарев А. Ю., 2009). Циркулирующие среди поголовья птицы микроорганизмы характеризуются устойчивостью к химиотерапевтическим препаратам, в частности, установлена устойчивость энтеробактерий к антибиотикам тетрациклинового ряда, природным и полусинтетическим пенициллинам (Пилипейко В. Г. и соавт., 2002; Хиштова Н. С., 2008; Шурахова Ю. Н. и соавт., 2011). При проведении мониторинговых исследований распространенности сальмонеллеза и эшерихиоза птиц целесообразным представляется применение эффективных методов индикации, оценки антагонистической активности, чувствительности к антибиотикам и дезинфицирующим средствам патогенных и условно-патогенных микроорганизмов, циркулирующих среди поголовья птицы при массовых желудочно-кишечных болезнях, что и определило актуальность темы диссертационной работы.
Цель исследований: изучить этиологическую структуру сальмонеллеза и эшерихиоза птиц с применением эффективных диагностических питательных сред и тест-систем для индикации и идентификации таксономически сходных видов энтеробактерий.
Задачи исследований:
- провести ретроспективный анализ данных по распространенности инфекционных болезней птиц бактериальной этиологии;
- изучить ростообеспечивающие и ингибирующие свойства дифференциально-диагностических питательных сред и чувствительность иммунохроматографической тест-системы «Singlepath Salmonella» для индикации и идентификации микроорганизмов;
- изучить эффективность схем бактериологического исследования на наличие микроорганизмов рода Salmonella и Escherichia;
- изучить количественный и видовой состав микроорганизмов в микробиоценозах кишечника птиц;
- изучить видовой состав патогенных и условно-патогенных энтеробактерий, выделенных из патологоанатомического материала птиц;
- изучить этиологическую структуру сальмонеллеза и эшерихиоза птиц;
- изучить антагонистическую активность, чувствительность к антибиотикам, устойчивость к дезинфицирующим средствам выделенных изолятов энтеробактерий
Научная новизна. Установлено, что при желудочно-кишечных болезнях птицы в микробиоценозе желудочно-кишечного тракта доминируют культуры микроорганизмов, отнесенные к видам: Escherichia coli – 41,2 %; Salmonella typhimurium – 12,8 %; Salmonella enteritidis – 10,7 %; Proteus vulgaris – 7,0 %. Установлено, что этиологическая структура сальмонеллеза представлена видами – S. enteritidis (45,8 %), S. typhimurium (54,2 %); эшерихиоза, серогруппами – О2 (32,14 %), О15 (25,0 %), О1 (21,43 %), О78 (21,43 %), соответственно. При определении адгезивных антигенов установлено, что из 9 изолятов E. coli, отнесенных к серогруппе О2, адгезивными свойствами обладали 4 изолята (K99, 987P, F41, A20); из 7 изолятов, отнесенных к серогруппе О15, – 4 изолята (K99, A20); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О1, – 3 изолята (A20); из 6 изолятов, отнесенных к серогруппе О78, – 4 изолята (K88, A20). С применением модифицированного метода изучения антагонистической активности бактерий установлено, что биологически активные вещества, продуцируемые изолятами E. coli, угнетают рост бактерий S. typhimurium с зоной задержки роста 1,4±0,1 мм; S. enteritidis – 1,6±0,1 мм; C. freundii – 1,5±0,2 мм; P. mirabilis – 0,6±0,1 мм; K. pneumonia – 1,3±0,1 мм. Из изолятов энтеробактерий, выделенных при желудочно-кишечных болезнях птиц, 21,4 % штаммов были чувствительны к антибиотикам группы цефалоспоринов (цефазолин, цефатоксим); 19,1 % – фторхинолонов (офлоксацин, ципрофлоксацин); 16,7 % – аминогликозидов (канамицин, амикацин). Среди изолятов энтеробактерий выделены штаммы, устойчивые к антибиотикам группы макролидов (эритромицин, олеандомицин) и природных пенициллинов (оксациллин), – 21,4 % соответственно.
Практическая значимость работы. На основании экспериментальных данных по изучению межпопуляционных взаимодействий таксономически сходных видов энтеробактерий модифицирована методика определения антагонистической активности микроорганизмов и разработаны «Методические рекомендации по определению антагонистической активности микроорганизмов», утвержденные секцией «Ветеринарная санитария, гигиена и экология» отделения ветеринарной медицины Россельхозакадемии (протокол № 8 от 22 июня 2010 года). Результаты исследований используются в учебном процессе на ветеринарно-санитарном факультете ФГБОУ ВПО «МГУПП» по дисциплине «Эпизоотология».
Апробация материалов диссертации. Основные результаты диссертационной работы доложены и одобрены на заседаниях кафедры «Инфекционные и паразитарные болезни» МГУПБ (М., 2008-2011); на Международной научной конференции молодых ученых «Экологически безопасные ресурсосберегающие технологии и переработки сельскохозяйственного сырья и производства продуктов питания» (М., 2009); на VI Международном ветеринарном конгрессе по птицеводству (М., 2010).
Основные положения, выносимые на защиту:
результаты ретроспективного анализа данных по распространенности инфекционных болезней птиц бактериальной этиологии;
количественный и видовой состав энтеробактерий, доминирующих в микробиоценозах кишечника при желудочно-кишечных болезнях птиц;
этиологическая структура сальмонеллеза и эшерихиоза птиц;
антагонистическая активность, чувствительность к антибиотикам, устойчивость к дезинфицирующим средствам выделенных изолятов энтеробактерий
Публикация результатов исследований. По материалам диссертационной работы опубликовано 6 научных статей, в том числе 4 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Структура и объем диссертации. Диссертация состоит из введения, обзора литературы, обсуждения результатов, выводов, библиографии, приложения. Работа изложена на 142 страницах компьютерного текста, содержит 16 таблиц, 18 рисунков. Библиографический список включает 171 источник, из них 51 иностранных авторов.
