Введение к работе
Актуальность темы. Одним из основных направлений национального проекта «Развитие АПК» является ускоренное развитие гусеводства, цель которого - увеличение производства мяса на 7%. «Отраслевая целевая программа развития птицеводства в Российской Федерации на 2005-2007 гг. и на период до 2010 года» предусматривает произвести к 2010 году 2,2 млн.т мяса птицы, в том числе гусиного мяса до 5 тыс.т
Серьезным препятствием на пути развития промышленного гусеводства наряду с факторами нарушения технологического режима выращивания являются различные инфекционные болезни молодняка, среди которых особое место занимает вирусный энтерит (парвовирусная инфекция) гусей. Это заболевание до настоящего времени имеет широкое распространение среди молодняка 1-30-суточного возраста, протекает остро и характеризуется высокой смертностью,достигая до 90-100% (В.В. Малушко, 1982; Л.М. Контримавичус, 1983; Б.Б. Трефилов, 2000; А. Белецкая, 2003; Б.Б. Трефилов с соавт, 2009; Derzsy D. et al., 1966; Varga J., 2000).
С профилактической и терапевтической целью при вирусном энтерите гусей применяют цитратную кровь и сыворотку крови гусей - реконвалесцентов (Л.М. Контримавичус, 1984; B.C. Фадин, 1975; Б.Б. Трефилов, 2009; Coudert М. et al, 1973), гипериммунную сыворотку млекопитающих ( В.В. Малушко с соавт, 1980; А.Ф. Бондаренко, 1982) и гипериммунную гусиную сыворотку крови ( Б.Б. Трефилов, 2008; Derzsy D., 1970; Bernath S., Szalai R, 1970).
Однако в комплексе мероприятий по предупреждению и ликвидации вирусного энтерита гусей (ВЭГ) важная роль отведена вакцинопрофилактике.
Несмотря на широкое применение вирусвакцины ВНИВИП сухой культуральной против ВЭГ в Российской Федерации и странах СНГ, проблема борьбы с этой болезнью остается весьма актуальной.
Исходя из изложенного, разработка высокоэффективной и технологичной инактивированной вакцины против ВЭГ, применяемой в условиях промышленного гусеводства, фермерских хозяйств и личного подворья - остается востребованной в связи с:
- отсутствием отечественного инактивированного вакцинного препарата против
вирусного энтерита гусей;
недостаточно длительным напряженным иммунитетом при применении живых вакцин против вирусного энтерита гусей;
сокращением количества вакцинаций с целью уменьшения стрессов и нагрузки на
иммунную систему;
- потребностью в вакцинном препарате, не содержащем живого вируса.
Цели и задачи исследования. Целью настоящей работы являлась разработка технологии изготовления инактивированнои вакцины против вирусного энтерита гусей и изучение ее иммунобиологических характеристик.
Для достижения ее было необходимо решить следующие задачи:
подобрать производственный штамм вируса энтерита гусей и изучить его биологические характеристики;
изучить оптимальные системы культивирования вируса и его инактивацию;
разработать компонентный состав инактивированнои вакцины против вирусного энтерита гусей;
изучить физические параметры и иммунобиологические свойства инактивированнои вакцины;
изучить динамику формирования поствакционального иммунитета у вакцинированных гусей.
Научная новизна. Впервые разработана отечественная инактивированная эмульсионная вакцина против вирусного энтерита гусей.
Отработана оптимальная схема получения вируссодержащего сырья из вакцинного производственного «клона 6» вируса энтерита гусей, депонированного в ФГУ ВГНКИ №71, патент РФ №1499917 «Штамм Goosa parvovirus для приготовления вакцинных препаратов против вирусного энтерита гусей», с использованием культуры клеток эмбрионов гусей.
Обоснованы режимы инактивации вируса энтерита гусей формальдегидом и димерэтиленимином. Изучена кинетика инактивации вируса.
Научно обоснован компонентный состав инактивированнои сорбированной и эмульсионной вакцины, определены оптимальные соотношения антигена и адъювантов. Доказана ее безвредность и высокая антигенность и способность индуцировать длительный поствакцинальный иммунитет у гусынь по сравнению с вирусвакциной ВНИВИП.
Практическая значимость работы. Полученные результаты исследований послужили основанием для разработки технологии изготовления инактивированнои вакцины и подготовки нормативной документации на вакцину против вирусного энтерита гусей:
«Стандарт организации на вакцину против вирусного энтерита гусей инактивированную эмульсионную» (проект).
- «Инструкция по применению вакцины против вирусного энтерита гусей
инактивированнои эмульсионной», временная утверждена директором ГНУ «ВНИВИП»
Россельхозакадемии, 2010 года.
Основные положения диссертационной работы, выносимые на защиту:
Характеристика производственного вакцинного «клона 6» вируса энтерита гусей;
Схема получения вируссодержащего сырья для изготовления инактивированной вакцины;
Инактивация вируса энтерита гусей димерэтиленимином;
Компонентный состав инактивированной сорбированной и эмульсионной вакцины;
Физические и иммуногенные характеристики инактивированной вакцины против вирусного энтерита гусей.
Апробация работы. Основные положения диссертационной работы доложены и обсуждены на заседаниях Методического совета отдела вирусологии, опухолевых болезней птиц и иммунофармакологии и Ученого совета ГНУ «ВНИВИП» (2006-2009), на Международных агропромышленных конгрессах (СПб, 2007,2009), Международных конференциях ВНАП (2009), науно-практической конференции 3-4 июня 2008 (СПб, Г.Ломоносов, 2008).
Личный вклад соискателя. Диссертационная работа выполнена автором самостоятельно. Отдельные этапы выполнены совместно с ведущим научным сотрудником Никитиной Н.В., за что автор выражает ей сердечную благодарность.
Публикации. По материалам диссертации опубликовано 5 научных статей, в том числе одна работа в издании, рекомендованном ВАК РФ, уведомление о поступлении и регистрации заявки №2010100456 от 12.01.2010 г.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 109 страницах компьютерного текста и состоит из следующих разделов: обзор литературы, собственные исследования, обсуждение полученных результатов, выводы, практические предложения и список литературы, приложения. Диссертация иллюстрирована 12 таблицами, 6 рисунками. Список использованной литературы включает 243 источника, из них 121 зарубежный.
