Содержание к диссертации
Введение
Глава 1 . Композитные светоотверждаемые пломбировочные материалы и их свойства 12
1.1. Современные композитные материалы 12
1.2. Атопическая аллергия: этиология и патогенез 23
1.3. Проблема непереносимости материалов, используемых в стоматологии 35
Глава 2. Материалы и методы исследования 36
2.1. Автоматизированный компьютеризированный «стекловолоконныи» флуорометрический метод определения высвобождения гистамина из базофилов цельной крови 36
2.2. Экспериментальное изучение иммуномодулирующего действия реставрационных материалов 40
2.3. Материалы и методы клинико-лабораторного исследования 45
2.3.1. Объекты исследования 45
2.3.2. Методы клинического обследования 46
2.3.3.Оценка иммунных показателей ротовой жидкости 50
2.3.4. Метод статистической обработки цифровых данных 51
Глава 3. Гистаминвысвобождающая и иммуномодулирующая активность реставрационных стоматологических материалов 52
Глава 4. Влияние реставрационных материалов на клиническое состояние пациентов при нормальном иммунном статусе и атопической аллергии 62
4.1. Результаты клинического исследования 62
4.2. Результаты исследования иммунного статуса полости рта 79
Глава 5. Анализ полученных результатов 82
Выводы 91
Практические
Рекомендации 93
Список литературы 94
Приложение
- Современные композитные материалы
- Автоматизированный компьютеризированный «стекловолоконныи» флуорометрический метод определения высвобождения гистамина из базофилов цельной крови
- Гистаминвысвобождающая и иммуномодулирующая активность реставрационных стоматологических материалов
- Результаты клинического исследования
Введение к работе
Актуальность проблемы
В настоящее время значительно возрос интерес медиков к проблеме
влияния различных материалов, используемых в медицине, и в частности,
в стоматологии на иммунную систему человека
[Р.В.Петров, Р.Х.Хаитов, 2000]. Многие вещества, как установлено, оказывают неспецифическое и специфическое действие на иммунную систему человека, в результате чего могут усиливаться или ослабляться аллергические процессы [А.А.Бабахин, А.И.Воложин и соавт., 2003, 2004]. В настоящее время известно, что до 25% населения Земного шара страдает аллергическими заболеваниями [GINA Report, Global Strategy for Asthma Management and Prevention, 2006], и неясно, как материалы, используемые в стоматологии, изменяют реактивность организма по отношению к различным аллергенам. Установлено, например, что акриловые пластмассы, используемые в стоматологии, обладают иммунотропным действием, а также способствуют неспецифическому выделению гистамина из базофилов крови [Аззам Омар, 2003]. Показано также учащение и усиление приступов атопической бронхиальной астмы под влиянием акриловых пластмасс, помещенных в полость рта [О.Д.Виноградова, А.И.Воложин, 2002, 2003]. Получены убедительные данные об иммуномодулирующем действии сплавов металлов, используемых в зубном протезировании [Д.А. Сорокин, Л.В. Дубова, 2004], и материалов для пломбирования корневых каналов [Гущина О.О., 2006]. Опубликовано большое количество работ об аллергенности веществ, выделяемых из латексных изделий (перчатки и др.), используемых в медицине [А.А. Бабахин, 2003, 2004]. В стоматологии, помимо выше указанных материалов, широко используются композиты для пломбирования зубов, компонентами которых являются
различные праимеры, адгезивы и непосредственно пломбировочные массы. Каждый из них возможно способен самостоятельно влиять на иммунную систему. Однако, данный вопрос до настоящего времени глубоко не изучался. Актуальность этой проблемы заключается в том, что большинство людей страдает кариесом зубов, и после его лечения в полости рта остаются пломбы, компоненты которых могут оказывать длительное влияние на организм, в том числе и иммуномодулирующее действие. Это действие может осложнить течение общесоматических заболеваний, в первую очередь имеющих аллергическую природу. На основании вышесказанного были сформулированы цель и задачи настоящей работы.
Цель исследования: оценить иммуномодулирующее действие реставрационных материалов, используемых в качестве постоянных пломб, у больных с атопической аллергией и в экспериментальных условиях.
Задачи
Исследовать влияние различных реставрационных стоматологических материалов на способность высвобождать гистамин из базофилов крови у практически здоровых людей и больных атопическими формами аллергических заболеваний.
Определить влияние подкожного введения мышам реставрационных стоматологических материалов до, одновременно и после стандартной иммунизации аллергеном (Овальбумином), на изменение динамики образования иммуноглобулинов класса Е.
Изучить величину анти-аллергенного IgG-ответа у мышей под влиянием реставрационных стоматологических материалов после стандартной иммунизации Овальбумином. Оценить особенности
7 модуляции IgE- и IgG-ответов у мышей на аллерген под влиянием
реставрационных стоматологических материалов в зависимости от
времени подсадки реставрационных материалов и числа
иммунизации Овальбумином.
Определить изменение иммунного статуса по показателям содержания в ротовой жидкости slgA и соотношения sIgA/белок после пломбирования зубов различными реставрационными материалами у практически здоровых людей и пациентов с атопическими аллергическими заболеваниями.
Исследовать особенности течения атопических аллергических заболеваний (дерматит, ринит, конъюнктивит, бронхиальная астма) после применения пациентам различных пломбировочных реставрационных материалов.
Положения, выносимые на защиту
Реставрационные стоматологические материалы (Призмафил, XRV Herculite, Glasiosite, Te-Econom, Valux Plus, Polofil Supra) используемые для постановки постоянных пломб, не обладают способностью высвобождать гистамин из базофилов крови практически здоровых людей и больных атопическими аллергическими заболеваниями за исключением Filtek Z250, который существенно усиливает высвобождение гистамина.
Подкожное введение мышам реставрационных стоматологических материалов (Призмафил, XRV Herculite, Glasiosite, Te-Econom, Valux Plus, Polofil Supra) изменяет динамику образования иммуноглобулинов класса Е. Введение этих материалов после иммунизации не влияет на IgE-ответ к аллергену, а при имплантации Filtek Z250 усиливает его. Введение мышам реставрационных стоматологических материалов после иммунизации аллергеном
8 Овальбумином слабее изменяет величину анти-аллергенного IgG-
ответа по сравнению с IgE-ответом к аллергену.
Иммуномодулирующий эффект зависит от вида материала, в
наибольшей степени им обладает Filtek Z250.
3. Использование реставрационных пломбировочных материалов
Призмафил, XRV Herculite, Glasiosite, Te-Econom, Valux Plus, Polofil
Supra у больных атонической аллергией, которые не вызывают
обострения основного заболевания.
Научная новизна
Впервые установлено, что реставрационные стоматологические материалы не обладают способностью высвобождать гистамин из базофилов крови практически здоровых людей и больных атопическими аллергическими заболеваниями за исключением Filtek Z250, который усиливает высвобождение гистамина.
Научной новизной отличаются данные о том, что подкожное введение мышам стоматологических материалов (Призмафил, XRV Herculite, Filtek Z250) до, одновременно и после стандартной иммунизации аллергеном (Овальбумином), приводит к изменению динамики образования иммуноглобулинов класса Е. Иммуномодулирующий эффект реставрационных материалов зависит от их вида, времени имплантации и числа иммунизации в эксперименте.
Научно доказано, что введение стоматологических материалов (Призмафил, XRV Herculite) после иммунизации Овальбумином не влияет на IgE-ответ к аллергену, а при имплантации Filtek Z250 усиливает его. Введение мышам реставрационных стоматологических материалов (Призмафил, XRV Herculite) после иммунизации Овальбумином слабее изменяет величину анти-аллергенного IgG-ответа по сравнению с IgE-
9 ответом к аллергену. Повторные иммунизации мышей стабилизируют
антительный ответ против Овальбумина.
Впервые установлено, что использование реставрационных
материалов (Призмафил, XRV Herculite, Glasiosite) у больных
атопическими аллергическими заболеваниями не меняет течения
основного заболевания и не оказывают иммуномодулирующего действия
на организм. Исключение составляет Filtek Z250.
Практическая значимость
У больных различными видами атопической аллергии и, в том
числе, бронхиальной астмы, рекомендуется проведение пробы на
индивидуальную чувствительность организма к реставрационным
стоматологическим материалам, которые могут изменить реакцию
иммунной системы на аллергены, увеличивая риск более тяжелого течения
основного заболевания. Иммуномодулирующий эффект зависит от вида
материала. В наибольшей степени им обладает Filtek Z250, который
способствует высвобождению гистамина из базофилов крови человека.
Автоматизированный стекловолоконный метод определения
высвобождения гистамина из базофилов крови может быть использован для предварительного скрининга реставрационных стоматологических материалов и индивидуального подбора материалов пациентам, отягощенным общесоматической патологией. При лечении кариозных и не кариозных поражений твердых тканей зубов у больных атопическими формами аллергии можно рекомендовать Призмафил (П), XRV Herculite (Н), Glasiosite (G), Te-Econom (ТЕ), Valux Plus (VP), Polofil Supra (PS)., которые не вызывают обострения основного заболевания, не оказывают значимого гистаминовысвобождающего и иммуномодулирующего действия.
10 Внедрение результатов исследования
Полученные данные используются в учебном процессе и в
дальнейшей научной работе на кафедрах патофизиологии
стоматологического факультета МГМСУ, кафедрах патологической
физиологии и терапевтической стоматологии Нижегородской
государственной медицинской академии, а также в педагогической и
практической работе кафедры стоматологии ЦПК и ППС ГОУ ВПО
«НижГМА» Росздрава,
Личный вклад автора в выполнение работы.
Диссертантом лично обработано 157 источников литературы, из них 102 российских и 55 зарубежных авторов. Автором самостоятельно клинически обследовано и санировано 118 пациентов, из которых 78 с атопической аллергией и 40 соматически здоровых. Совместно с иммунологом автором проанализированы результаты лабораторных анализов крови и ротовой жидкости. Совместно с патофизиологом проведен анализ экспериментально полученных данных. Автором лично проведена статистическая обработка и осуществлен компьютерный набор диссертационной работы и автореферата.
Апробация работы
Основные положения и результаты исследований по теме диссертации доложены и обсуждены на совместном совещании сотрудников кафедр терапевтической стоматологии и патофизиологии Нижегородской государственной медицинской академии, кафедры патофизиологии стоматологического факультета ГОУ ВПО МГМСУ Росздрава 16 декабря 2008 г. (протокол №4).
Публикации
По теме диссертации опубликовано 4 работы, из них 3 - в журналах рецензируемых ВАК РФ. Структура и объем диссертации
Диссертация написана на 111 страницах машинописного текста, состоит из введения, 5 глав, выводов, практических рекомендаций, списка использованной литературы, в том числе 102 российских авторов, 55 иностранных авторов. В диссертации представлено 7 таблиц и 17 рисунков.
Современные композитные материалы
Реставрация зубов при лечении кариеса и некариозных поражений в последние годы наиболее часто осуществляется композитными светоотверждаемыми пломбировочными материалами. Под композитами понимают комбинацию двух различных по химическому составу материалов, с определенной поверхностью разделения между этими компонентами: органическую матрицу и неорганический наполнитель. Каждый из компонентов имеет свойства, которые не могут быть достигнуты при их применении каждого в отдельности. При этом неорганический наполнитель должен быть химически хорошо связан с органической фазой для ее усиления, и присутствовать в остаточном количестве, чтобы обеспечить прочность и твердость композиционного материала [Bowen R.L., 1972].
Согласно международному стандарту ИСО/ТК 106 № 4049, композитными пломбировочными материалами называют полимерные материалы на органической основе, содержащие в количестве 50 % по массе и более неорганического наполнителя, подвергнутого специальной обработке поверхностно - активными веществами [Рыбаков А.И., 1981; Цимбалистов А.В., 2001].
Синтетические пломбировочные материалы имеют цвет естественных зубов и после внесения в полость затвердевают вследствие химической реакции или под воздействием света [Хельвиг Э., Климен Й., 1999]. Первые сведения о пломбировании кариозных полостей акриловыми пластмассами появились в 1939 г. после создания швейцарскими химиками полимеров на основе эпоксидной смолы. Их отвердение осуществлялось путем полимеризации мономера при смешивании двух компонентов материала (порошка-жидкости, двух разных паст и т.д.), содержащих разные составляющие системы полимеризации. Для улучшения свойств акриловых пластмасс в их состав пытались вводить различные виды неорганического наполнителя. Так, в 1960 г. появился первый пломбировочный материал на основе наполненной пластмассы - Addent [3 М Compani].
В 50-х годах XX века были предприняты попытки заменить акриловые смолы другими видами полимеров, такими, как цианакрилаты, полистерин, поликарбонат, полиамид и др. Первый самополимеризующийся композиционный пломбировочный материал, органическая матрица которого представляла продукт взаимодействия бисфенола - А и глицедилметакрилата - аддукт Bis - ГМА, предложил в 1962 г. американский ученый - химик R.L. Bowen [цит. по Макеевой И.М., 1996]. С этого времени начался новый этап в развитии технологий лечения твердых тканей зубов.
Мономер Bis - GMA обладает достаточно высокой адгезией к твердым тканям зуба, но имеет высокую вязкость, продолжительное время отверждения и высокую усадку во время реакции полимеризации. Для устранения этих недостатков Bis - GMA растворяется мономерами с более низкой вязкостью - TGDMA (триэтиленгликол - диметакрилат) или DGMA (декандиол - диметакрилат). В конце 60-х годов была предложена более усовершенствованная смола уретандиметакрилат (UDMA), которая является основой большинства известных сегодня композитов [Николишин А.К., 2001].
В качестве неорганического наполнителя в композитных материалах используют размельченные частицы бариевого стекла, кристаллического кварца, фарфоровой муки, различные модификации оксида кремния и даже алмазную пыль, размер частиц колеблется от 0,02 до 50 мкм. Все эти частицы обработаны силанами - кремнеорганическими соединениями, обеспечивающими хорошее сцепление с органической матрицей и влияющие на прочность материала. Кроме того, в состав композитов дополнительно введены катализаторы, ингибиторы, пигменты. Обычно производители заранее смешивают порошок с мономером, формируют пасту. Но также были предложены системы типа «порошок — жидкость» [Петрикас А.Ж., 1994; Борисенко А.В., 2001].
Важным этапом в развитии восстановительной стоматологии явилось создание в середине 70-х годов XX века светоотверждаемых композитов. В состав связующего этих материалов был введен фотоинициатор - метиленбензоиновый эфир, реакция полимеризации происходила под воздействием ультрафиолетовых лучей с длиной волны 365 нм [Уголева С, 1995; Николишин А.К., 2001]. Однако было обнаружено вредное влияние этих лучей на органы зрения и на ткани полости рта, поэтому ультрафиолетовые лампы вскоре перестали применять. После введения в состав композитов новых фотоинициаторов полимеризации (2 - диметиламиноэтанол, камфорхинон) в 1977 г. были созданы материалы, отверждение которых наступает под влиянием лучей видимой части спектра в диапазоне от 400 до 500 нм [Rosen S., 1982; Brannstrom М., 1991]. Светочувствительный инициатор - камфорхинон под воздействием галогеновой лампы, имеющей интенсивность светового потока 280-300 мВт/см , выделяет радикалы, инициирующие процесс полимеризации [Уголева С, 1995]. Преимуществом применения светоотверждаемых композитов является их гомогенная консистенция, возможность моделирования пломбы до момента ее полимеризации, высокий эстетический эффект реставрированного зуба. Особенностями современных композитных материалов являются [Борисенко А.В., 2001]: - очень высокая механическая прочность: в среднем 300-370 МПа при сжатии и 150- 70 МПа на изгиб; - образование химической связи с твердыми тканями зуба (эмалью, дентином, композитом); - склеивание материалов фрагментами (композит - композит, композит - компомер, композит - стеклоиономерный композит и т.д.); - биологическая толерантность материалов; - идентичность с твердыми тканями зубов по физическим свойствам (прочность, термическое расширение, цвет, непрозрачность, стойкость к истиранию, водопоглощение); - стабильность и отсутствие растворения в ротовой жидкости; - возможность восстановления зубов с дефектами различной формы и происхождения (кариес, некариозные поражения, аномалии формы и цвета зубов, положения в зубном ряду, травмы и др.).
Для того чтобы правильно подобрать пломбировочный материал для конкретной клинической ситуации, необходимо знать свойства различных классов композитных материалов в целом и выбранного материала в частности [Хайненберг Б.И., 1993].
Автоматизированный компьютеризированный «стекловолоконныи» флуорометрический метод определения высвобождения гистамина из базофилов цельной крови
Семь видов коммерческих реставрационных стоматологических материалов (РСМ) были использованы в работе: 1 - Призмафил (П), 2 -Filtek Z250 (F), 3 - XRV Herculite (Н), 4 - Glasiosite (G), 5 - Te-Econom (ТЕ), 6 - Valux Plus (VP), 7 - Polofil Supra (PS). После соединения компонентов в определенных пропорциях (согласно инструкции производителя) полученные материалы затем использовали в экспериментах.
Для изучения гистаминвысвобождающей активности РСМ готовили «супернатанты» материалов по методике Pelka М. и сотр. [Pelka М., Danzl С, Distler W., Petshelt А., 2000]. Все стоматологические материалы были измельчены до порошкообразного состояния. 125 мг порошка каждого материала помещали в пробирку, заливали 1 мл PIPES буфера и при периодическом перемешивании инкубировали 48 часов при 37С. Через 48 час инкубации взвесь центрифугировали при 1250 об/мин на центрифуге "Eppendorf" в течение 15 мин. Полученные «супернатанты» до использования хранили в холодильнике не более 2-3 дней.
Определение высвободившегося гистамина после инкубации цельной крови с «супернатантами» РСМ проводили с помощью «стекловолоконного» метода (СВ-метода) [Бабахин А.А., Воложин А.И. и соавт., 2003]. Кратко: гепаринизированную кровь в объеме 25 мкл от пациентов с сенсибилизацией к атопическим аллергенам или от здоровых доноров, не имеющих аллергии к атопическим аллергенам, помещали в лунки 96-луночного плейтов, на дне которых находился стекловолоконныи матрикс, и куда предварительно было добавлено по 25 мкл «супернатантов». После инкубации плейтов в течение 1 часа при 37С и отмывки дистиллированной водой проводили последующую инкубацию в течение 30 мин при 37С с 0,04 % раствором SDS. По завершении, инкубации и последующей отмывки дистиллированной водой в каждую лунку плейтов добавляли определенное количество раствора орто-фталиевого диальдегида для конденсации его с гистамином, сорбированным на стекловолоконном матриксе. Реакцию останавливали через 10 мин добавлением 0,59 % раствора хлорной кислоты.
Результаты, полученные путем автоматизированного спектрофлуорометрического анализа и рассчитанные по специальной компьютерной программе, выражали в нанограммах гистамина на 1 мл крови (нг/мл). Чувствительность метода составляла 5 нг гистамина на 1 мл крови. На основании данных анализа содержания гистамина в каждой из шести лунок «фиброгассового» плейта, куда был помещен один и тот же «супернатант», рассчитывали среднее значение гистаминолиберации для каждого «супернатанта» РСМ у каждого пациента. На рис. 1, 2, 3 показаны этапы определения гистамина. Затем высчитывали среднее значение высвобождения гистамина в группах здоровых доноров и больных аллергией. Статистическую обработку результатов проводили по Стьюденту. Разница в уровнях высвобождения гистамна под воздействием «супернатантов» РСМ и контролем (инкубация крови только с PIPES-буфером) считалась достоверной при р 0,05.
В качестве положительного контроля использовали: 1) анти-IgE (Dako) в трех стандартных разведениях (1:80; 1:280; 1:400), нанесенных на стандартный «фиброглассовый» плейт; 2) кальциевый ионофор А23187 (Sigma) в трех концентрациях (62,5 мкг/мл, 31,25 мк/мл и 15,67 мкг/мл). В качестве отрицательного контроля кровь инкубировали только с PIPES-буфером.
Венозную кровь для анализа в объеме 5-7 мл (использовали «вакуумные» пробирки с гепарином фирмы Becton Dickinson) брали от здоровых доноров, не страдающих аллергией или больных, имеющих сенсибилизацию к различным атопическим аллергенам, подтвержденную аллергологическим анамнезом, кожными пробами с различными аэроаллергенами и наличием в сыворотке крови аллерген-специфического
Для изучения иммуномодулирующего эффекта РСМ использовали модель стандартной иммунизации мышей-самцов (CBAxC57Bl/6)Fl в возрасте 8-12 недель модельным аллергеном овальбумином (О А) внутрибрюшинно, в дозе 10 мкг/мышь, трижды, с интервалом в 3 недели (Рис.4). Модельный аллерген овальбумин (ОА) (Sigma) был использован во всех экспериментах, как для иммунизации мышей, так и для тестирования анти-ОА- IgE- и IgG- антител в реакции пассивной кожной анафилаксии (ПКА) и ELISA, соответственно. Самцов беспородных крыс (в возрасте 9-12 недель) использовали для ПКА при определении мышиных анти-ОА IgE- антител.
Гистаминвысвобождающая и иммуномодулирующая активность реставрационных стоматологических материалов
Стоматологические материалы, локально помещенные в организм, в том числе в полость рта, могут также играть роль дополнительных внешних факторов, способных привести к усилению или ослаблению иммунного ответа на различные антигены (аллергены), то есть модулировать иммунный ответ.
Согласно информации, подробно изложенной в 2-й главе работы было использовано несколько видов коммерческих реставрационных стоматологических материалов (РСМ): Призмафил (П), Filtek Z250 (F), XRV Herculite (Н), Glasiosite (G), Te-Econom (ТЕ), Valux Plus (VP), Polofil Supra (PS). После соединения компонентов в определенных пропорциях (согласно инструкции производителя) полученные материалы затем использовали в экспериментах.
Анализ результатов, полученных с помощью СВ-метода по высвобождению гистамина из базофилов цельной крови под воздействием «супернатантов» РСМ не выявил существенных различий в уровнях высвобождения гистамина, как в группе здоровых доноров, так и в группе больных с сенсибилизацией к различным аллергенам, что косвенно указывает на неспецифическое действие РСМ на базофилы крови. Высокий уровень высвобождения гистамина, как у больных аллергией, так и у здоровых доноров, показал образец «супернатанта» F (16,5 ± 1,3 нг/мл) и (11,58 ± 0,8 нг/мл), соответственно (Табл. 2, 3).
Низкий уровень высвобождения гистамина из базофилов крови отмечался при инкубации крови больных аллергией и здоровых доноров с «супернатантами» остальных РСМ и не отличался от уровня отрицательного контроля, т.е. инкубации крови с PIPES- буфером: 3,76 ± 0,68 (у больных аллергией), 3,8 ± 0,31 (у здоровых доноров).
В положительных контролях (инкубация базофилов крови с анти-IgE или кальциевым ионофором А23187) наблюдалось высвобождение гистамина, характерное при использовании этих гистаминолибераторов, что подтверждало отвечаемость базофилов крови испытуемых субъектов на специфические (анти-IgE) и неспецифические (ионофор А23187) стимуляторы.
Иммуномодулируюший эффект от подкожной имплантации мышам трех РСМ (П, F, Н) в отношении развивающегося и развившегося иммунного ответа изучали посредством выявления анти-ОА антител классов IgE и IgG .
При имплантации мышам РСМ до, одновременно с иммунизацией ОА, в целом, отмечается торможение IgE-антителообразования к ОА на всех сроках наблюдения по сравнению с контролем (Рис.11, 12). Характерное торможение анти-ОА IgE-антителообразования в случае имплантации РСМ до стандартной иммунизации ОА наблюдается через 1 и 3 недели после вторичной и третичной иммунизации. Наиболее выраженное угнетение IgE-ответа наблюдается при имплантации "П". Менее выраженное — при имплантации "F" и "Н" (Рис.11).
Сроки забора крови: 1-2 нед первичной иммунизации; 2 -1 нед. вторичной иммунизации; 3 -3 нед. вторичной иммунизации; 4-1 нед. третичной иммунизации; 5-3 нед. третичной иммунизации. - Имплантирован У -Имплантирован "F" - Имплантирован "HP" -Контроль иммунизации ОА
Сроки забора крови: 1 - 2 над. первичной иммунизации; 2 -1 над. вторичной иммунизации; 3 - 3 над. вторичной иммунизации; 4 -1 над. третичной иммунизации; 6 - 3 нед. третичной иммунизации. [— Имплантирован "Р" - —Имплантирован "Р Имплантирован "HP" Контроль иммунизации ОА
Рис.13. Анти-ОА IgE-ответ у мышей (СВАхС57 B1/6)F1 , которым имплантированы образцы реставрационных стоматологических материалов через 7 дней после иммунизации ОА.
Относительно анти-ОА IgG-ответа наблюдалась сходная картина. Имплантация "П", "F", "Н" до иммунизации ОА заметно угнетала анти-ОА IgG-ответ по сравнению с контролем (иммунизация только ОА) на всех сроках наблюдения. Наиболее выраженное угнетение IgG-ответа было в случае имплантации "П" (Рис.14) Сроки забора крови: 1-2 нед. первичной иммунизации; 2 -1 над. вторичной иммунизации; 3-3 нед. вторичной иммунизации; 4 -1 нед. третичной иммунизации; S - 3 нед. третичной иммунизации.
Имплантация РСМ одновременно с иммунизацией ОА почти не влияла на уровни анти-ОА IgG по сравнению с контролем, за исключением 3 недели после вторичной иммунизации ОА, когда уровни анти-ОА IgG-антител были выше, чем в контроле при имплантации всех РСМ (Рис.15). Сроки забора крови: 1 - 2 нед. первичной иммунизации; 2 -1 мед. вторичной иммунизации; 3 - 3 над. вторичной иммунизации; 4 -1 над. третичной иммунизации; 5 - 3 над. третичной иммунизации
В данном исследовании нами показано, что подкожное введение мышам РСМ до, одновременно и после стандартной иммунизации аллергеном, приводит к изменению динамики образования антител, принадлежащих к иммуноглобулинам классов IgE и IgG. Введение РСМ до иммунизации и одновременно с ней приводит к супрессии IgE-ответа, причем во втором случае в меньшей степени. Введение РСМ после иммунизации практически не влияет на IgE-ответ к аллергену по сранению с контролем, а в отдельных случаях даже усиливает его (имплантация Filtek Z250). Это, возможно, связано с обнаруженной ранее гистаминвысвобождающей активностью этого РСМ.
Результаты клинического исследования
Клинические наблюдения включали в себя обследование 78 пациентов, страдающих одной из форм атопической аллергии (основная группа) и 40 практически здоровых лиц без аллергологического анамнеза (контрольная группа). Для оценки клинических проявлений больных консультировали у специалистов-аллергологов. Лечение начинали с профессиональной гигиены полости рта, включающую в себя тщательное обследование полости рта, регистрацию состояния зубов, удаление мягких зубных отложений, зубного камня, последующее полирование зубов и пломб. Полирование проводилось с помощью специальной щетки, которая фиксировалась в угловом наконечнике, на скорости 5000 — 10000 оборотов в минуту, с использованием абразивной пасты Clean Polish. Пасту наносили на поверхность зубов и осуществляли чистку всех их поверхностей горизонтальными, вертикальными и круговыми движениями. Проксимальные поверхности зубов тщательно очищали штрипсами с мелкой насыпкой. Гладкость зубов проверяли с помощью стоматологического углового зонда. Качество чистки проверялось и подтверждалось пациентом, который с помощью языка мог определять все шероховатости и неровности на поверхности зубов. В дальнейшем чувство гладкости зубов являлось критерием самоконтроля для пациента. Пациентам также осуществляли подбор предметов и средств гигиены, обучали правилам пользования ими. Объясняли связь между зубным налетом, болезнями зубов, т.е. при плохой гигиене быстро появляется краевая пигментация, пломба теряет блеск, повышается риск «рецидивного» кариеса, при этом демонстрировали зубной налет с помощью инструментов (экскаватор, гладилка, зонд), а также индикатора зубного налета (фуксин). Таким образом, аргументировали необходимость систематического удаления зубных отложений. Все больные после проведения профессиональной гигиены полости рта были разделены на две группы: основная (с атопической аллергией) и контрольная (практически здоровые).
Пациентам обеих групп проводилась реставрация различных групп зубов материалами, используемых в качестве постоянных пломб. Число запломбированных зубов у одного пациента варьировало от 2 до 7 с интервалом от двух до пяти дней. Всего было запломбировано 79 зубов передней группы, 134 - боковой группы. В число обследуемых вошли пациенты с различными формами кариеса зубов, а также с некариозными поражениями зубов. Пациенты с тяжелыми заболеваниями пародонта в группу исследуемых не входили. Все пациенты были разделены на подгруппы в зависимости от используемого для реставрации пломбировочного материала. В следующее посещение (через 2-7 дней после проведения реставрации) оценивались жалобы пациентов и данные объективного обследования. Было обращено внимание на наличие на слизистой оболочке полости рта (СОПР) патологических элементов (афт, эрозий, язв), степень их выраженности, количество, время появления, а также влияние различных пломбировочных материалов на частоту возникновения и тяжесть клинического проявления различных форм аллергических реакций (приступы бронхиальной астмы, крапивница, аллергический конъюнктивит, аллергический дерматит, поллинозы).
Индекс Грина - Вермилиона (ИГВ) дает возможность оценить гигиенический статус полости рта, а именно, количественное определение зубного налета и зубного камня. Чем ниже показатель данного индекса, тем более благоприятный гигиенический статус имеет обследуемый. В результате определения индекса Грина — Вермилиона у обследованных лиц до лечения было установлено, что в основной группе он составил 2,70±0,07, в контрольной группе - 2,97±0,05. При определении данного индекса после санации наблюдалось его снижение в обеих группах обследованных лиц по отношению к результатам, полученным при исходном исследования.
Индекс РМА используется для определения интенсивности и распространенности воспалительной реакции. Снижение его свидетельствует о положительной динамике воспалительного процесса. При изучении динамики индекса РМА у обследованных лиц до санации были получены следующие результаты: в основной группе - 26,09±0,37%, в контрольной -23,84±0,21%. При определении индекса РМА после санации наблюдалось его снижение в обеих группах, и составил в основной группе — 0,5±0,01%(снижение на 25,59%), в контрольной группе - 0% (снижение на 23,24%).
Мюлемана у обследуемых лиц была установлена следующая структура выраженности данного показателя: в основной группе, наиболее часто (в 47,37% случаев)он соответствовал интенсивности «О балла», чуть меньше (в42,11%) — «1 балла» и в 10,53% - «2 балла». Похожие показатели были зарегистрированы и в контрольной группе: 52,17% случаев интенсивности кровоточивости «0», 39,13% - «1» и 8,70% - «2». После санации полости рта, было установлено, что показатель индекса Мюллемана в обеих группах соответствовал нормальному значению. Таким образом, 100% обследованных лиц переместились в группу интенсивности кровоточивости десневой бороздки «0».
Оценка состояния пациентов основной группы после пломбирования зубов показала следующие результаты.
Основная группа. В результате пломбирования зубов реставрационным материалом «Призмафил» (всего 19 человек) осложнения в виде афтозных поражений на СОПР наблюдали у 2 пациентов, при этом замены пломбировочного материала не потребовалось. Лечение поражений на СОПР проводили с применением Солкосерил дентальной адгезивной пасты (СДАЛ). У одного пациента наблюдали изменение общего состояния в виде приступов удушья, при этом поражения СОПР не выявлено. Не предъявляли жалоб 16 пациентов.
