Введение к работе
Актуальность проблемы
В настоящее время воспалительные заболевания кишечника (ВЗК), к которым относятся неспецифический язвенный колит (НЯК) н болезнь Крона (БК), являются одной из наиболее серьезных проблем современной детской гастроэнтерологии, что обусловлено тяжестью их течения и постоянно возрастающей распространенностью во всем мире. Заболеваемость ВЗК у детей в мире в настоящее время составляет 2,2 - 6,8 на 100 тыс. детского населения. Отмечается тенденция к неуклонному росту со значительным "омоложением" этих заболеваний, что диктует настоятельную необходимость дальнейшего изучения их этиологии, патогенеза и поиска наиболее эффективных подходов к лечению (Н. Buller et al, 2002).
ВЗК сопровождаются хронической интоксикацией, значительными метаболическими изменениями, что неизбежно приводит к нарушению процессов энергообеспечения клеток. Для изучения интенсивности энергообмена используют показатели активности митохондриальных дегидрогепаз. Наиболее информативным и доступным морфологическим субстратом для изучения процессов энергообеспечения клетки являются лимфоциты периферической крови.
Активность внутриклеточных дегидрогепаз лимфоцитов отражает состояние энергообмена не только самих клеток, но и внутренних органов, особенно находящихся в состоянии напряжения или болезни; позволяет прогнозировать исход бактериальной и вирусной инфекции; даст возможеюсть оценить эффективность лечения (РЛ.Нарциссов, 1997; Г.Ф.Семенова, 1999; B.C. Сухорукое, 2004; С.В.Петричук, 2005).
Использование цитоморфоденситометрического метода в оценке функциональной активности митохондрий лимфоцитов периферической крови у больных с различными формами патологии показало его высокую диагностическую ценность для характеристики патологического процесса и его динамики под воздействием терапии, что открывает новые возможности
для дальнейших исследований. Была доказана высокая диагностическая и прогностическая информативность активности митохондриальных дегидрогеназ при хроническом гломерулонефрите, хроническом запоре, аппендикулярном перитоните, бронхиальной астме, атопическом дерматите, у детей с гипоксическим поражением ЦНС (Т.Д. Измайлова, 2003; ЕЛ. Толмачева, 2004; А.В.Петрова, 2006; ЕЛО. Капустина, 2006; И.В. Писарева, 2007);
Комплексный подход к изучению процессов, протекающих в иммунокомпетентных клетках, определяет перспективные направления в изучении иммунологических нарушений при воспалительных заболеваниях кишечника. С появлением проточной цитометрии расширились возможности изучения иммунного статуса детей при различных заболеваниях (Л.В. Пичугина, 1996). Однако, показано, что не всегда при развитии патологического процесса меняются количественные показатели клеточного иммунитета (Д. А. Шмаров, 2004). Можно полагать, что существуют качественные изменения в популяциях лимфоцитоз на уровне внутриклеточных ферментов, которые могут существенно влиять на реализацию иммунного ответа и течение патологического процесса.
Изучение активности внутриклеточных ферментов лимфоцитов важно как для установления новых патогенетических механизмов, происходящих на клеточном и субклеточном уровне при ВЗК у детей, так и для оценки активности воспаления и эффективности проводимой терапии при данной патологии.
Цель работы
Установить закономерности изменений активности
митохондриальных ферментов лимфоцитов периферической крови у детей с воспалительными заболеваниями кишечника для улучшения диагностики болезни и оценки эффективности лечения.
Задачи исследования
-
Оценить клиническое значение цитохимических показателей лимфоцитов (активность внутриклеточных дегидрогеназ лимфоцитов -СДГ, НАДН-Д, ГФДГ) на разных стадиях и при различной длительности заболевания у детей с болезнью Крона и неспецифическим язвенным колитом.
-
Определить цитохимические критерии активности воспаления у детей с неспецифическим язвенным колитом и болезнью Крона.
-
Провести сравнение показателей ферментного статуса лимфоцитов при неспецифическом язвенном колите и болезни Крона у детей.
-
Оценить состояние клеточного иммунитета и активность СДГ в различных популяциях лимфоцитов у детей с воспалительными заболеваниями кишечника.
-
Оценить влияние антицитокиновой терапии при воспалительных заболеваниях кишечника на цитохимические показатели и количественный состав популяций лимфоцитов.
Научная новизна
Впервые выявлены особенности энергетического обмена лимфоцитов у детей с воспалительными заболеваниями кишечника. Установлено, что начальные стадии заболевания характеризуются снижением сукцинатдегидрогеназы на фоне активации НАДН-дегидрогеназы со снижением индекса СДГ/НАДН-Д по сравнению с нормой. При длительном и неблагоприятном течении ВЗК происходит достоверное снижение активности дегидрогеназ (СДГ и НАДН-Д).
Впервые выявлены информативные цитохимические критерии, позволяющие вычислить клиническую и эндоскопическую активность воспалительных заболеваний кишечника у детей.
Впервые при иммуноцитохимическом исследовании у больных с воспалительными заболеваниями кишечника выявлено резкое угнетение сукцинатдегидрогеназы в популяции В-лимфоцитов и активация этого фермента в Т-цитотоксических и NK-клетках, степень которой зависит от продолжительности болезни.
Впервые описана динамика активности митохондриальных дегидрогеназ лимфоцитов на фоне биологической терапии у детей с воспалительными заболеваниями кишечника. Выявлено, что лучший клинический эффект от биологической терапии достигается при исходно высоких значениях активности СДГ и НАДН-Д и сопровождается нормализацией цитохимических показателей.
Практическая значимость
Выявленные изменения активности митохондриальных дегидрогеназ лимфоцитов периферической крови при ВЗК у детей в процессе течения заболевания позволяют считать цитохимические показатели дополнительными лабораторными критериями для оценки тяжести воспаления и степени компенсации нарушений энергетического обмена на фоне патологического процесса.
Депрессия активности митохондриальных дегидрогеназ СДГ и НАДН-Д лимфоцитов периферической крови соответствует наиболее неблагоприятному течению воспалительных заболеваний кишечника у детей. При исходно высоких значениях активности СДГ и НАДН-Д отмечается хороший клинический эффект на фоне проведения биологической терапии, что можно использовать в качестве критерия прогноза эффективности лечения.
Апробация и внедрение результатов работы в практику
Основные положения диссертации доложены и обсуждены в рамках XIV Российской гастроэнтерологической недели (Москва, 2008), 4-го
Европейского Конгресса педиатров - EUROPAEDIATRICS - 2009, XVI Российской гастроэнтерологической недели (Москва, 2010), на IX Российском конгрессе «Инновационные технологии в педиатрии и детской хирургии» (Москва, 2010).
По теме диссертации опубликовано 7 научных работ.
Результаты работы внедрены в практику гастроэнтерологического отделения с гепатологической группой НЦЗД РАМН. Структура и объем диссертации
Материалы диссертации изложены на страницах машинописного
текста и включает введение, обзор литературы, описание материалов и методов исследования, 3 главы описания собственных наблюдений, обсуждение результатов, выводы, практические рекомендации и список литературы. Работа проиллюстрирована 46 рисунками и 31 таблицами. Список литературы содержит 162 источника, в том числе 85 отечественных и 77 зарубежных.
