Введение к работе
Актуальность работы. Выяснение молекулярной организации и принципов функционирования компонентов нервной системы является одной из основных проблем современной органической химии и биохимии. В последнее время в этой области был достигнут значительный прогресс за счет применения генно-инженерных методов и использования нейротоксинов.
Природные нейротоксины обладают высокоспецифичным механизмом действия: они с большой эффективностью связываются с различными компонентами нервных клеток и тем самым влияют на строго определсгаше стадии проведения нервного импульса. Селективность действия отдельных нейротоксинов позволяет использовать их в качестве инструмента обнаружения, выделения и исследования различных рецепторних и канальных структур, играющих ключевую роль в функционировании нервных клеток. Значительный интерес представляет способность некоторых нейротоксинов действовать на нервную систему только определенной группы животных (например, насекомых или позвоночных).
Поиск и структурно-функциональное исследование новых нейротоксинов, изучение молекулярных основ видоспецифичности их действия является важной предпосылкой для создания на их основе высокоэффективных, антинематодных средств, экологически чистых инсектицидов и фармакологических препаратов нового поколения. Одним из наиболее богатых источников для получения молекулярных зондов исследования нервной системы животных являются яды пауков.
В Институте биоорганической химии им. М.М.Шемякина и Ю.А.Овчинникова РАН был изучен яд паука Latrodectus mactanB trcdecimguttatUG (каракурта). Из него были выделены и охарактеризованы высокоспецифичные токсины . к насекомым, позвоночным и ракообразным. Представляется интересным и полезным исследование компонентов яда близкородственного паука Latrodectus pallidas, изучение их структуры и биологической активности. Проведение сравнительного структурного анализа компонентов ядов двух этих пауков позволит получить важную дополнительную информацию о молекулярных основах высокой специфичности действия этих токсинса.
JJyjbjwOoTii. Основной целью настоящей работы являлось
сравнительное исследование компонентов яда паука Latrpdectus pallldus с ранее изучешшми токсинами из яда каракурта включая:
-
Характеристику белкового состава и биологической активности яда паука Latrodectus pallldus. '
-
Идентификацию и выделение из этого яда ' в индивидуальном виде основного инсектотоксического компонента и токсина для позвоночных. Исследоваїше их биологической активности и частичную структурную характеристику. .'
Кроме того, в задачу данной работь» входило проведение иммунохимического анализа цельного яда Latrodectus pallldus с использованием ионоспецифических антител к <*-латротоксину -основному токсическому компоненту для позвоночных из яда каракурта.
Научная новизна и практическое значение работы, опервые охарактеризован белковый состав и токсическое действие яда паука Latrodectus pallldus. Выделены в индивидуальном виде и биохимически охарактеризованы два основных токсических компонента этого яда. Определены их молекулярные массы. Установлены N-концевые аминокислотные последовательности и для одного из них первичная структура ряда его триптических фрагментов. Показана высокая структурная гомология этих токсинов с раков исследованными «-латротоксином и а-латроинсектотоксином иэ ада каракурта.
Проведение сравнительного структурного анализа компонентов ядов LatrodectUB pallidua и latrodectue mactans tredeclmguttatua позволит получить дополнительную информацию о иолекулярных основах высокой специфичности этих токсинов.
Объем и структура диссертации. Диссертационная работа изложена на JyA страницах машинописного текста и состоит из зведення; обзора литературы, посвященного токсинам из яда пауков; описания материалов и ыачодов исследования; глав, посьященннх результатам и их обсуждению; заключения; выводов и списка испольвованной литературы. Работа иллюстрирована //.. рисунками и .6.. фотографиями. Список цитируемой литературы пклітіает .35 Наименования.
