Введение к работе
Актуальность темы
В настоящее время во всех странах мира, особенно в промышленно развитых, наблюдается повышение заболеваемости сахарным диабетом. Большая социальная значимость сахарного диабета состоит в том, что он приводит к ранней инвалидизации и летальности, которая обусловлена наличием поздних сосудистых осложнений диабета: мик-роангиопатий (ретинопатия и нефропатия), макроангиопатий (инфаркт миокарда, инсульт, гангрена нижних конечностей), нейропатий. Среди поздних осложнений сахарного диабета первое место по частоте занимает диабетическая нефропатия. Современные методы исследования позволяют диагностировать диабетическую нефропатию только на стадии микроальбуминурии.
Однако, по всей видимости, микроальбуминурия не относится к числу самых ранних симптомов, свидетельствующих о поражении почек. Основанием для такого предположения является указание на существование у больных сахарным диабетом гиперфильтрации и гиперперфузии, предшествующих микроальбуминурии, которые, как известно, сопровождаются повышением внутриклубочкового давления (Дедов И. И., Шестакова М. В., 2000). Внутриклубочковая гипертензия способна привести к поражению эпителия клубочков, а в последующем, и эпителия канальцев. В настоящее время поражение почки на стадии гиперфильтрации может документироваться данными, полученными только при биопсии почки. Поэтому, крайне актуальным является создание малоинвазивных методов и тест-систем ранней диагностики поражения почек при сахарном диабете на доклинической стадии заболевания.
Белок Тамма-Хорсфалла у больных сахарным диабетом, особенно у больных сахарным диабетом 1 типа, привлекает внимание и в связи с имеющимся предположением возможности существования перекрёстных реакций этого протеина с антигенами Candida albicans, поскольку указанный контингент пациентов склонен к развитию кандидозной инфекции. Возможность развития перекрёстных реакций Тамм-Хорсфалл протеина с антигенами С. albicans существует в связи с наличием общности структуры этого белка с маннопротеином клеточной стенки С. albicans.
Хотя физиологическая роль Тамм-Хорсфалл протеина до конца не ясна, наличие в его составе высокоманнозных остатков способствует связыванию Тамм-Хорсфалл протеина с пилями первого типа Escherichia coli, чем он препятствует распространению восходящей уроинфекции (Рак J. et al., 2001). Это обстоятельство, а также существование перекрёстных реакций между О-антигеном Е. coli и Тамм-Хорсфалл протеином представляет интерес для исследования Тамм-Хорсфалл протеина у больных острым и хроническим пиелонефритом.
Цель исследования: выяснение роли Тамм-Хорсфалл протеина у детей, страдающих сахарным диабетом 1 типа с сопутствующей кандидозной инфекцией.
Задачи исследования:
Разработать диагностические тест-системы для выявления антител к Тамм-Хорсфалл протеину и к антигенам С. albicans. В связи с тем, что С. albicans при переходе в инвазивную форму изменяет антигенную структуру, провести поиск антигенов для конструирования тест-систем, позволяющих детектировать антитела, отражающие агрессивность популяции грибов.
Провести сопоставление общности антигенной структуры Тамм-Хорсфалл протеина и кандидозных антигенов.
Изучить специфичность разработанных тест-систем и определить диагностический титр антител.
4. Провести сравнительное изучение синтеза антител к Тамм-Хорсфалл протеину,
поверхностным и секретируемым антигенам С. albicans у детей, больных сахарным
диабетом 1 типа при манифестации кандидоза и у пациентов групп сравнения.
Научная новизна
Создана диагностическая тест-система для определения Тамм-Хорсфалл протеина и антител к этому белку по специфичности превышающая зарубежные аналоги.
Предложен комплекс диагностикумов, позволяющий контролировать изменение популяции грибов рода Candida в динамике микотической инфекции.
Впервые установлено, что у детей при сахарном диабете 1 типа возрастает титр антител к почечноспецифическому антигену - Тамм-Хорсфалл протеину и определён их уровень, который следует рассматривать как маркёр доклинической стадии диабетической нефропатии.
Выявлена общность антигенов С. albicans и Тамм-Хорсфалл протеина.
Исследование иммунного ответа на антигены агрессии С. albicans создаёт возможность дифференциации перехода от состояния инапарантного кандидоза в его манифестную форму.
Практическая значимость
Разработанная нами тест-система для определения уровня антител к Тамм-Хорсфалл протеину может быть использована для ранней диагностики поражения почек у детей, больных сахарным диабетом 1 типа. Повышение титра антител к Тамм-Хорсфалл протеину у детей с пиелонефритом следует считать показателем поражения канальцевого аппарата почек, что может использоваться при дифференциальной диагностике пиелита и пиелонефрита. Диагностикумы на белковые антигены грибов могут быть полезны при мониторинге за состоянием популяции грибов-комменсалов при различных заболеваниях и патологических состояниях.
Основные положения, выносимые на защиту
У детей, больных сахарным диабетом 1 типа отмечается выраженный иммунный ответ на секвестрированный почечный антиген - Тамм-Хорсфалл протеин, титр антител к которому снижается после начала лечения инсулином. При длительности заболевания более 3 лет уровень антител к этому белку вновь достигает высоких значений.
Несмотря на то, что в антигенной структуре Тамм-Хорсфалл протеина выявлены общие детерминанты с секретируемыми белковыми антигенами кандид, иммунный ответ на почечный и грибковые антигены не ассоциирован.
Манифестная форма кандидозной инфекции у детей при сахарном диабете 1 типа сопровождается нарастанием титров антител к поверхностным и секрети-руемым антигенам С. albicans.
< 4. Транслокация микробной флоры при травме сопровождается нарастанием титров антител к поверхностным белковым антигенам С. albicans, но не к секрети-руемым антигенам, как это имеет место при манифестной микотической инфекции. Внедрение в практику
Основные положения, выводы и рекомендации диссертации внедрены в педагогический процесс кафедры микробиологии и кафедры детских болезней медицинского факультета Российского университета дружбы народов и используются в педагогическом процессе при проведении лабораторных занятий, семинаров и при чтении лекций студентам, ординаторам, аспирантам. Апробация работы
Материалы и основные положения диссертации изложены на семинарах кафедры микробиологии и кафедры детских болезней медицинского факультета Российского университета дружбы народов (Москва, 2005).
Публикация результатов
По теме диссертации опубликовано 4 печатные работы. Объём и структура работы
Работа представлена на 102 листах машинописного текста компьютерного набора, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов, методов и результатов экспериментальных исследований, их обсуждения и выводов, а также библиографического указателя, включающего 159 источников. Диссертация иллюстрирована 7 таблицами и 4 рисунками.
