Содержание к диссертации
Введение
Глава 1 Лучевая диагностика воспалительных поражений сердца (обзор литературы) 21
1.1 Диагностика воспалительных заболеваний сердца в клинической практике 21
1.2 Методы лучевой диагностики воспалительных поражений сердца
1.2.1 Ультразвуковая диагностика воспалительных поражений сердца 25
1.2.2 Компьютерная томография в диагностике воспалительных процессов в сердце 28
1.2.3 Магнитно-резонансная томография в диагностике воспалительных процессов в сердце 29
1.2.4 ПЭТ в диагностике воспалительных процессов в сердце 31
1.3 Радионуклидная диагностика воспаления 31
1.3.1 Радиофармпрепараты для диагностики воспаления 34
1.4 Сцинтиграфическая диагностика воспалительных процессов в сердце 44
1.4.1 Сцинтиграфия воспалительных заболеваний сердца с использованием неспецифических радиофармпрепаратов 47
1.4.2 Сцинтиграфия воспалительных заболеваний сердца с использованием специфических радиофармпрепаратов 50
Глава 2 Материалы и методы 56
2.1 Фантомные исследования 56
2.2 Характеристика больных, включенных в исследование
2.2.1 Характеристика больных инфекционным эндокардитом 61
2.2.2 Характеристика больных с подозрением на миокардит, обследованных при помощи ОЭКТ с 99тТс-НМРАО-лейкоцитами 62
2.2.3 Характеристика больных с подозрением на миокардит, обследованных при помощи ОЭКТ с 99тТс-пирофосфатом... 67
2.3 Радионуклидные методы исследования 71
2.3.1 Методика мечения лейкоцитов 99тТс-НМРАО 71
2.3.2 Однофотонная эмиссионная компьютерная томография сердца с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО 72
2.3.3 Однофотонная эмиссионная компьютерная томография сердца с 99тТс-пирофосфатом 2.4 Эхокардиография 73
2.5 Суточное мониторирование ЭКГ 74
2.6 Лабораторные методы исследования 74
2.7 Эндомиокардиальная биопсия 76
2.8 Экспериментальные исследования радиофармпрепарата на основе ципрофлоксацина, меченного 99тТс
2.8.1 Методы синтеза ципрофлоксацина, меченного 99тТс 77
2.8.2 Методы исследования механизма действия ципрофлоксацина, меченного 99тТс 78
2.8.3 Разработка биологических моделей для исследования фармакокинетики и диагностической эффективности ципрофлоксацина, меченного 99тТс 80
2.8.4 Радионуклидные методы исследования фармакокинетики и диагностической эффективности ципрофлоксацина, меченого 99тТс 2.8.5
Методы исследования токсических свойств ципрофлоксацина, меченого 99mTc 85
2.9 Методы статистической обработки результатов 91
Глава 3 Результаты собственных исследований и их обсуждение 93
3.1 Результаты фантомных исследований 93
3.2 Методические особенности проведения однофотонной эмиссионной компьютерной томографии для топической диагностики воспалительных процессов в сердце 96
3.3 Результаты исследования возможностей ОЭКТ с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО, у больных инфекционным эндокардитом 98
3.4 Исследование эффективности ОЭКТ сердца с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО в диагностике миокардитов 112
3.4.1 Сравнение результатов ОЭКТ сердца с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО и данных клинических, лабораторно-инструментальных и иммунологических исследований у больных с подозрением на миокардит 113
3.4.2 Сопоставление результатов ОЭКТ сердца с 99тТс-НМРАО лейкоцитами и данных эндомиокардиальной биопсии у
больных с подозрением на миокардит 133
3.5 Сопоставление результатов ОЭКТ сердца с 99тТс-пирофосфатом с данными эндомиокардиальной биопсии у больных с подозрением на миокардит 138
3.6 Сравнительный анализ использования радионуклидных методов для диагностики воспалительных поражений сердца 142
3.7 Результаты исследований по разработке методов синтеза ципрофлоксацина, меченного технецием-99т 151
3.8 Исследование механизма действия радиофармпрепарата на основе ципрофлоксацина, меченного технецием-99т 152
3.9 Исследование фармакокинетики радио фармпрепарата на основе ципрофлоксацина, меченного технецием-99т 161
3.10 Результаты исследования эффективности сцинтиграфического выявления очагов бактериального воспаления при помощи ципрофлоксацина, меченного 99тТс 168
3.11 Токсикологические исследования ципрофлоксацина, меченного 99тТс 177
3.11.1 Исследование общей острой токсичности радиофармпрепарата 178
3.11.1.1 Результаты исследований, проведенных на крысах 178
3.11.1.2 Результаты исследований, проведенных на мышах
3.11.2 Исследование кумулятивности радиофармпрепарата 188
3.11.3 Исследование общей хронической токсичности радиофармпрепарата
3.11.3.1 Влияние радиофармацевтического препарата на основе антибиотика ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на общее состояние и массу крыс 191
3.11.3.2 Влияние ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на показатели периферической крови крыс 196
3.11.3.3 Влияние радиофармацевтического препарата на основе антибиотика ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на миелограмму крыс 200
3.11.3.4 Влияние 99тТс-ципрофлоксацина на функцию внутренних органов 205
3.11.4 Результаты изучения хронической токсичности ципрофлоксацина, меченного 99тТс , при многократном применении у кроликов 217
3.11.4.1 Влияние ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на общее состояние и массу кроликов 217
3.11.4.2 Влияние ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на гематологические показатели кроликов 217
3.11.4.3 Влияние ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на миелограмму кроликов 219
3.11.4.4 Влияние ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на функциональное состояние печени у кроликов 220
3.11.5 Оценка хронической токсичности ципрофлоксацина, меченного Тс, по результатам патоморфологического исследования внутренних органов крыс 221
3.11.6 Оценка хронической токсичности ципрофлоксацина, меченного Тс, по результатам патоморфологического исследования внутренних органов кроликов 225
3.12 Оценка перспектив использования 99тТс-ципрофлоксацина в кардиологии и кардиохирургии 228
Заключение 231
Выводы 247
Практические рекомендации 250
Список использованных источников
- Магнитно-резонансная томография в диагностике воспалительных процессов в сердце
- Характеристика больных инфекционным эндокардитом
- Методические особенности проведения однофотонной эмиссионной компьютерной томографии для топической диагностики воспалительных процессов в сердце
- Исследование фармакокинетики радио фармпрепарата на основе ципрофлоксацина, меченного технецием-99т
Магнитно-резонансная томография в диагностике воспалительных процессов в сердце
Диагностика воспалительных поражений сердца является актуальной и сложной проблемой современной медицины, что обусловлено широкой распространенностью данной группы заболеваний и связанным с ними высоким уровнем смертности [18, 52, 76, 75].
Так, заболеваемость инфекционным эндокардитом (ИЭ) по данным разных авторов, составляет от 1,7 до 11,6 случаев на 100 тыс. населения в год [8]. В различных лечебных учреждениях нашей страны ИЭ удается выявить лишь в 24,2 % случаев, причем не ранее, чем через 3 месяца от начала заболевания. Такое положение объясняется, во многом, диагностическими сложностями верификации данной патологии.
Классическими признаками инфекционного эндокардита, как известно, являются: поражение клапанов сердца, бактериемия (зеленящий стрептококк, стафилококки и грамотрицательные бактерии) или фунгемия, эмболии, а также аутоиммунные поражения сосудов [8, 51, 76, 75]. Исследователями из Duke University был предложен алгоритм клинической диагностики ИЭ [135], основанный на анализе морфологических признаков заболевания, обнаруженных при операции на сердце или аутопсии, учете достоверных микробиологических признаков (гемокультура) и обнаружении эхокардиографических симптомов (вегетации).
В настоящее время, в связи с активным применением антибиотиков, далеко не у всех больных выявляется вся полиморфная клиническая картина эндокардита. Так называемые периферические симптомы (Либмана-Лукина, Ослера) наблюдаются у 10-15 %, а не у 75 % пациентов. Реже диагностируются гломерулонефрит [15]. Тем не менее, диагноз ИЭ по-прежнему складывается из традиционных признаков, перечисленных выше с обязательной верификацией ультразвуковыми методами исследования сердца [15]. Основными эхокардиографическими признаками данного заболевания, являются: характерные вегетации, абсцессы, признаки недостаточности клапанов и появляющиеся изменения искусственных клапанов. Кроме того, возможности ЭХО-КГ позволяют уточнить локализацию и характер вегетации, измерить их диаметр, судить о давности процесса, а также диагностировать осложнения ИЭ и проводить динамические наблюдение за развитием заболевания [2, 6, 23, 25, 86, 108]. Эхокардиография является важнейшим методом диагностики и позволяет эффективно выявлять 98% вегетации с размерами более 2 мм в диаметре. При низком риске ИЭ (энтерококковая бактериемия с первичным фокусом без других признаков ИЭ) ЭХО-КГ позволяет исключить наличие ИЭ [5].
При отсутствии эффекта от антибактериальной терапии и подозрении на развитие осложнений показано проведение чреспищеводной ЭХО-КГ (ЧП ЭХО-КГ) [6, 23, 25, 86, 108].
Типичными для ИЭ являются также длительная бактериемия и высокая частота выделения культурального выделения микроорганизмов из крови. Наиболее частыми возбудителями названного заболевания являются стрептококки, энтерококки, стафилококки и микобактерии. Применение антибиотиков до взятия посевов крови снижает частоту выявления бактериемии до 35-45% [2].
В заключение необходимо отметить, что количество больных ИЭ возрастает, ежегодно выявляют 15-20 тыс. новых случаев. Данная патология занимает 4-е место по летальности среди инфекционных заболеваний после сепсиса, пневмонии и абдоминального хирургического сепсиса [2, 33, 51, 53, 63]. Все это делает необходимым дальнейшую разработку новых методов диагностики данного заболевания.
Более затруднительной является диагностика миокардитов, поскольку, воспалительные заболевания миокарда при инфекционных и аутоиммунных заболеваниях, чаще всего, протекают без выраженных кардиальных симптомов, а нередко и бессимптомно. Однако в некоторых случаях миокардит может сопровождаться выраженными клиническими симптомами и приводить к таким тяжелым последствиям как сердечная недостаточность и даже гибель больного.
Общая заболеваемость миокардитами изучена недостаточно, поэтому приходится ориентироваться лишь на частоту их выявления в качестве сопутствующей патологии [42, 77]. По данным различных авторов, число миокардитов среди кардиологических больных достигает 10% [47, 55, 72, 239].
Для диагностики миокардитов предложены различные клинические критерии (NYHA 1964, 1973, 1988), выявляемые через 2-3 недели после перенесенной инфекции [42, 47, 77].
Клинические проявления при инфекционном миокардите варьируют от минимальных симптомов до острой и крайне тяжелой сердечной недостаточности. Самыми распространенными жалобами при миокардитах являются лихорадка, слабость, утомляемость, одышка, сердцебиение, нарушения ритма сердца. Довольно часто встречаются дискомфорт и разнообразные боли в грудной клетке, которые, в отличие от стенокардии, редко провоцируются физической нагрузкой [42, 77].
Детальное физикальное исследование может оказать существенную помощь в диагностике основного заболевания, в рамках которого развился миокардит (особенно коллагенозов и кожных проявлений аллергических реакций). При легких формах миокардита физикальное исследование часто малоинформативно. Акустические критерии миокардита наблюдаются редко, так как более характерны для диффузных миокардитов. Для диагностики легких миокардитов основное значение имеют инструментально-лабораторные исследования [52, 78].
Доказательством мионекроза может быть повышение в плазме активности креатинфосфокиназы и концентрации тропонина I. Чувствительность в диагностике миокардита недавно предложенного определения уровня сердечного тропонина I достигает 34%, специфичность - 89%, положительная диагностическая значимость - 82% [18, 48, 49, 52, 78]. Данные гистологического исследования при миокардитах обычно малоспецифичны, за исключением случаев гигантоклеточного миокардита, некоторых гранулематозных и паразитарных поражений сердца [42, 52]. На аутопсиях, как правило, выявляют воспалительную инфильтрацию миокарда различными клетками. Считают, что при бактериальных миокардитах в составе инфильтрата преобладают полиморфноядерные нейтрофилы, при аутоимунных поражениях - эозинофилы, при вирусных - лимфоциты [42, 52]. Наряду с инфильтрацией, в ходе гистологического исследования иногда удается выявить признаки дистрофии, и даже участки некроза кардиомиоцитов. Гистологические данные могут весьма значительно варьировать, поэтому существенное значение имеют позитивные результаты обнаруженного воспаления, которые подтверждают клинический диагноз миокардита в 17-37% случаев [10, 46, 52, 78]. В настоящее время эндомиокардиальную биопсию обязательно проводят лишь у больных с крайне неблагоприятным течением заболевания (чаще всего это гигантоклеточный миокардит), либо при неэффективности проводимой терапии [46, 48, 49, 52, 78].
Характеристика больных инфекционным эндокардитом
О токсичности РФП судили по общему состоянию крыс, еженедельной динамике их общей массы, температуре тела, картине периферической крови, костного мозга, функции печени, почек, нервной системы, сердца (ЭКГ), а также после умерщвления (С02-камера) по данным морфологического исследования внутренних органов и их массы (головной мозг, легкие, сердце, желудочно-кишечный тракт, тимус, селезенка, половые железы, мочевой пузырь, надпочечники, почки и др.).
Температуру тела у крыс измеряли ректально с помощью медицинского электротермометра ТПЭМ-1 (Россия). У кроликов через 7 дней внутривенного применения испытуемого средства проводили биохимическое исследование сыворотки крови и показателей периферической крови, общей массы и морфологии внутренних органов, костного мозга после эвтаназии (С02-камера).
В периферической крови, взятой из хвоста крыс после ампутации его кончика или из краевой вены уха кроликов, определяли гематокритное число, содержание гемоглобина, эритроцитов, ретикулоцитов, тромбоцитов, лейкоцитов, показатели лейкограммы, СОЭ, используя автоматический гематологический анализатор Mythic 18 vet и общепринятые ручные методы исследования [32, 34].
Состояние костномозгового кроветворения у крыс оценивали путем подсчета общего количества миелокариоцитов (ОКК) на бедренную кость (106/бедро) и миелограмм на мазках, приготовленных из гомогената фрагмента миелоидной ткани, взятой из сегмента грудины, и аутологичной сыворотки (1:1), комбинированно окрашенных фиксатором-красителем Май-Грюнвальда и азур II-эозином по Нохту. Процентное содержание отдельных клеточных форм при подсчете миелограмм крыс переводили в абсолютные цифры - х106 клеток на бедро [17, 22, 31, 44]. У кроликов в костном мозге, взятом из сегмента грудины, определяли показатели миелограммы только в относительных единицах (%).
Было проведено изучение биохимических показателей сыворотки крови, характеризующих белковую, углеводную, ферментативную и другие метаболические функции печени. В сыворотке крови определяли активность аспартат- и аланинаминотрансфераз (АсАТ и АлАТ), щелочной фосфатазы (ЩФ), содержание глюкозы, белка, мочевины, креатинина, холестерина, билирубина по общепринятым методам [34], используя полуавтоматический биохимический анализатор фирмы Cormay, стандартные наборы фирм Cormay, Biocon (Германия), Vital Diagnostics (Санкт-Петербург), Вектор-Бест (Новосибирск). В сыворотке крови определяли также концентрацию натрия, калия, хлора и лития с помощью ионоселективного анализатора электролитов EasyLyte (MEDICA Corp, США).
Для оценки почечного метаболизма в моче у крыс определяли следующие показатели: суточный диурез, глюкозу, билирубин, кетоны, удельную плотность, скрытую кровь, протеин, уробилиноген, нитриты, лейкоциты и рН. Исследования проведены на автоматическом анализаторе мочи CLINITEK-50 на полосках URS-10 (USA). Сбор мочи у крыс проводили в индивидуальных обменных клетках, в которых животные находились в течение суток после предварительной адаптации и водной нагрузки. Дистиллированную воду вводили внутригастрально с помощью зонда из расчета 2% от массы тела. О влиянии на ЦНС судили, исследуя эмоциональную реакцию и ориентировочно-исследовательское поведение крыс в «открытом поле». Экспериментальная установка «открытое поле» - камера размером 100x100x60 см с квадратным полом и стенками белого цвета. Пол камеры разделен на 16 квадратов, в каждом квадрате - круглое отверстие диаметром 6 см. Сверху камера освещена электрической лампой накаливания мощностью 100 ватт, расположенной на высоте 1 м от пола камеры. Крыса помещалась в один из углов камеры, и в течение 3 мин регистрировалось количество пересеченных ею горизонтальных квадратов (горизонтальная активность), количество заглядываний в отверстия (норковый рефлекс), вставаний на задние лапы (вертикальная активность), умывание (груминг), актов дефекаций по количеству фекальных шариков. Затем все данные суммировались, и определялась общая двигательная активность. Эмоциональная реакция оценивалась по методу Brady и Nauta [107], при котором полуколичественным способом определяли реакцию на 4 вида воздействий: захват в клетке, где животное постоянно находится, захват в руку после помещения животного на плоскую поверхность, мышечное напряжение, реакция на приближение и толчок пинцета, при этом на протяжении всего периода исследования дополнительно регистрировались дефекация, мочеиспускание и вокализация (всего 7 реакций). Каждая реакция оценивалась по 4-балльной системе, после чего все баллы суммировались, давая общую оценку эмоциональной реакции.
Влияние препарата на функцию сердца оценивали по данным электрокардиографии. Электрокардиограмму (ЭКГ) крыс регистрировали с помощью электрокардиографа «Поли-Спектр-8В» во втором стандартном отведении при усилении lmV=20 мм и скорости записи 50 мм/с под эфирным наркозом в положении животных спиной вверх. Показания электрокардиографа " О/Л " 99ІПГТ-І регистрировались через 7 дней введения и через 30 дней после отмены Тс ципрофлоксацина. Выполнялся расчет и анализ ЭКГ с использованием компьютерной программы. Анализировались все компоненты электрокардиограммы, распознавались патологические изменения. У крыс, самцов и самок, рассчитывали частоту сердечных сокращений (ЧСС), измеряли амплитуду зубцов Р, R, Т и длительность интервалов PQ, QT, QRS [43]. Результаты сравнивали с данными контрольных животных.
После эвтаназии крыс и кроликов проводили вскрытие, макроскопическое исследование внутренних органов и определение их массы. Для микроскопического исследования были взяты следующие органы: головной мозг, сердце, трахея, легкое, печень, почка, мочевой пузырь, пищевод, желудок, тонкая и толстая кишка, поджелудочная и щитовидная железы, селезенка, тимус, надпочечник, яичник и матка или семенник и предстательная железа. Кусочки органов фиксировали в 10% формалине и заливали в парафин. Депарафинированные срезы окрашивали гематоксилином и эозином [45].
Местнораздражающее действие РФП на основе антибиотика ципрофлоксацина, меченного 99тТс оценивали при гистологическом исследовании места введения у крыс (участок хвостовой вены) и кроликов (краевая вена уха).
Методические особенности проведения однофотонной эмиссионной компьютерной томографии для топической диагностики воспалительных процессов в сердце
Исходя из результатов нашей работы, можно выделить ряд методологических особенностей гамма-сцинтиграфической визуализации инфекционного эндокардита, отличающих ее от таковой при миокардитах.
В частности, при ИЭ очаги патологического накопления меченых лейкоцитов выявлялись на томосцинтиграммах уже через 3 часа после инъекции РФП и сохранялись на изображениях, получаемых вплоть до 20 часов после инъекции. У больных миокардитом визуализировать воспаление нам удавалось лишь при выполнении отсроченных регистрации. Это обусловлено тем, что интенсивность аккумуляции РФП в патологическом очаге при инфекционном эндокардите выше, чем при миокардите (табл. 14), в силу патофизиологических особенностей данных заболеваний. В частности, эндокардит характеризуется преимущественно гранулоцитарным воспалением, с большим количеством клеток и высокой скоростью их миграции, в то время как миокардит - лимфоцитарной инфильтрацией и медленным оборотом клеток [165]. Поскольку в суспензии меченых лейкоцитов 60% приходится на гранулоциты и 40% - на лимфоциты [155, 156], острое гранулоцитарное воспаление визуализируется раньше с более интенсивными очагами гиперфиксации РФП [165].
Другое методическое отличие сцинтиграфической визуализации инфекционного эндокардита обусловлено локализацией патологических очагов, которые располагаются, как правило, за пределами миокарда, в области клапанов. В связи с этим, при подозрении на указанное заболевание в качестве метода для получения анатомических ориентиров рационально использовать ангиографию по первому пасу, которая позволяет визуализировать большее количество анатомических ориентиров, чем перфузионная сцинтиграфия миокарда, - левый и правый желудочек, восходящую часть аорты и легочную артерию - необходимых для определения расположения клапанов сердца на сцинтиграммах.
Таким образом, ОЭКТ с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО, в сочетании с дополнительными методами топической диагностики воспалительных очагов в сердце позволяют успешно диагностировать инфекционный эндокардит. Однако, учитывая более высокую чувствительность современных ультразвуковых методов в диагностике данного заболевания, сцинтиграфия может быть использована лишь в качестве дополнительной диагностической процедуры у пациентов с малоинформативными результатами ЭХО-КГ или для диагностики причин «лихорадки неясного генеза» и послеоперационной лихорадки.
Диагностика миокардитов является еще более затруднительной, поскольку, воспалительные поражения сердечной мышцы при инфекционных и аутоиммунных заболеваниях, чаще всего, протекают без выраженных клинических появлений, а, нередко, и бессимптомно. Однако в некоторых случаях миокардит может сопровождаться выраженными клиническими симптомами и приводить к тяжелым последствиям [42, 48, 78]. Самыми распространенными жалобами при миокардитах являются лихорадка, слабость, утомляемость, одышка, сердцебиение, нарушения ритма сердца [42, 48, 78]. Немаловажную роль в постановке диагноза играет наличие перенесенного инфекционного заболевания в анамнезе и его хронологическая связь с появлением кардиальных жалоб.
В последние годы исследуются возможности методов ядерной медицины в диагностике миокардитов. В представленной работе была исследована эффективность способа топической диагностики воспалительных очагов, основанного на использовании перфузионной сцинтиграфии миокарда в сочетании с радиофармпрепаратами: лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО, и 99тТс-пирофосфатом.
Методологические особенности сцинтиграфической визуализации миокардитов, по нашему мнению, заключаются в следующем. Во-первых, для выявления воспалительных процессов в миокарде можно использовать 2 радиофармпепарата - 99тТс-пирофосфат и лейкоциты, меченные 99тТс-НМРАО. Названные индикаторы отражают различные патофизиологические процессы, характерные для миокардитов. Первый позволяет оценить выраженность альтеративных процессов, второй - выраженность лимфоцитарной инфильтрации в миокарде.
Во-вторых, при подозрении на миокардит достаточно выполнить лишь отсроченную (через 16-20 часов после инъекции РФП) регистрацию сцинтиграмм, поскольку, в представленной работе ни у одного из 156 больных с подозрением на миокардит не удалось выявить очаги гиперфиксации РФП на ранних изображениях (через 3 часа после инъекции РФП). Это связано, с низкой интенсивностью аккумуляции РФП в очагах воспаления на фоне высокой радиоактивностью пулов крови желудочков сердца на ранних сроках сканирования.
В-третьих, при выборе способа топической диагностики у больных с подозрением на миокардит рационально использовать метод совмещения с перфузионными сцинтиграммами сердца, так как он позволяет получить четкие изображения контуров миокарда и предоставляет дополнительную информацию о состоянии сердечной мышцы.
Эффективность способа топической диагностики воспалительных очагов, основанного на использовании перфузионной сцинтиграфии миокарда в сочетании с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО, была изучена нами на 116 больных с подозрением на миокардит. Из их у 40 человек была выполнена морфологическая верификация диагноза.
По данным исследования была показана связь результатов сцинтиграфии с лейкоцитами, меченными 99тТс-НМРАО, и титров аутоантител к фибриллярным структурам кардиомиоцитов, что отражает наличие аутоиммунного патологического процесса, характерного для миокардитов. То же можно сказать и о концентрации провоспалительного цитокина ИЛ-ір, являющегося одним из наиболее чувствительных маркеров воспаления. Полученные результаты косвенно доказывают специфичность указанного выше радионуклидного метода в диагностике воспалительных заболеваний миокарда.
Исследование фармакокинетики радио фармпрепарата на основе ципрофлоксацина, меченного технецием-99т
В работе проводилось изучение кумулятивных свойств радиофармпрепарата на 20 (10 самцов и 10 самок) конвенциональных аутбредных крысах, раздельно на самцах и самках, по пять животных в группе.
Изучаемый препарат вводили подопытным животным в объеме 10 мл/кг внутривенно ежедневно в утреннее время в течение 28 дней. Контрольной группе животных в таком же режиме вводили раствор 0.9% NaCl. В период исследования животных взвешивали один раз в неделю, а также проводили наблюдение за их состоянием в течение одной недели после введения РФП. На протяжении всего эксперимента не было выявлено ни одного случая гибели лабораторных животных. В 1-й группе крыс (самцов и самок), получавших радио фармпрепарат, не было выявлено статистически значимого изменения показателя массы тела в сравнении с контрольными животными (табл. 25). Также не было выявлено изменений в показателях прироста массы тела экспериментальных животных на тех же сроках наблюдения (табл. 26).
При наружном осмотре и исследовании трупов крыс по окончании исследования различий между подопытными и контрольными группами не было установлено: шерстный покров был гладкий, блестящий, кожа эластичная, подвижная, подкожная клетчатка умеренно выражена, видимые слизистые оболочки бледные, чистые, без изъязвлений и посторонних наложений, патологические выделения из естественных отверстий тела отсутствовали. При патологоанатомическом вскрытии также не было установлено различий между животными подопытных и контрольных групп. Органы грудной и брюшной полостей имели анатомически правильное расположение и нормальную макроструктуру, каких-либо макроскопических патологических изменений обнаружено не было
В виду отсутствия гибели животных в экспериментальном исследовании количественную оценку кумуляции РФП, заключающуюся в расчете коэффициента кумуляции по формуле Люблина Е.М., Минкина Н.А. (1970) [35] (КК =(DS/N Jin50) (50/A), где А - процент погибших животных = 0) применить не удалось из-за нулевого параметра в одном из знаменателей формулы (отсутствие летальности). В связи с этим, в нашей работе была использована качественная оценка кумулирующих свойств лекарственного средства [35], также основанная на показателях гибели лабораторных животных. В частности, летальность среди животных менее 50% после введения разрешающей дозы исследуемого вещества свидетельствует об отсутствии токсических, кумулятивных свойств лекарственного средства и патологических процессов вследствие накопления препарата в организме экспериментальных животных. В этой ситуации адаптивные и компенсаторные возможности организма лабораторных животных обеспечивают гомеостаз на уровне, совместимом с нормальным протеканием основных физиологических процессов. В нашем исследовании гибель животных после введения разрешающей дозы 99тТс-ципрофлоксацина была равна нулю, что свидетельствует об отсутствии кумулятивных свойств у исследуемого препарата.
Исследование общей хронической токсичности 99тТс-ципрофлоксацина было выполнено на половозрелых белых конвенциональных аутбредных крысах разводки лаборатории экспериментального биомоделирования НИИФиРМ им. Е.Д. Гольдберга (сертификат здоровья лабораторных животных 24-03, выданный НЦБМТ РАМН), а также кроликах разводки личного подсобного хозяйства «Барин» (г. Томск).
Оценка воздействия РФП на общее состояние, температуру и массу тела, на показатели периферической крови, на функцию печени, почек, центральной нервной системы (ЦНС), сердечно-сосудистой системы (ЭКГ), на морфологию костного мозга, других внутренних органов крыс (самцы и самки отдельно), кроликов (самцы, самки) была нами выполнена по окончании семидневного курсового внутривенного введения 99тТс-ципрофлоксацина. Обратимость проявлений токсического воздействия РФП исследовали на крысах через 30 дней после окончания курса введения препарата.
В нашем исследовании не было отмечено негативного влияния ципрофлоксацина, меченного 99тТс, на общее состояние и массу крыс. В частности, ни через 7, ни через 30 дней после окончания курсового введения РФП достоверного изменения средней массы крыс (самцов и самок) по сравнению с контролем (табл. 27, 28) не наблюдалось во всех трех группах. Процент прироста массы крыс-самцов достоверно превышал контрольные значения в третьей подопытной группе (доза введения РФП 1,5 мл/кг) на 5 сутки семидневного курса введения препарата, в первой подопытной группе (доза введения РФП 0,15 мл/кг) на 3 сутки опыта (табл. 29). Процент прироста массы крыс-самок изменялся в сторону увеличения во второй группе через 30 дней после окончания введения РФП (табл. 30). Таким образом, обнаруженные изменения в проценте прироста массы тела подопытных крыс по сравнению с контролем незакономерны, так как не зависят от длительности введения и дозы препарата.
