Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Системная склеродермія среди диффузных заболеваний соединительной ткани занимает одно из первых мест по социально-экономическим последствиям из-за преимущественного поражения лиц трудоспособного возраста и прогрессирующего течения. Несмотря на значительные успехи, достигнутые в изучении этого тяжелого и, как правило, прогностически неблагоприятного заболевания проблема эта ещё далека от разрешения. В настоящее время течение ССД и воздействие медикаментов на её развитие мало поддаются прогнозированию. Затруднена диагностика начальной стадии склеродермии, хотя именно она является наиболее перспективной для лечения. Недостаточно разработаны показатели, позволяющие оценивать динамику и тяжесть процесса, решать вопросы дифференцированной патогенетической терапии. В связи с чем, исследования, подводящие к решению этих проблем,являются весьма актуальной задачей.
Свойственные ССД индуративные изменения кожи и висцерофиб-роэы обусловлены значительным нарушением биосинтеза коллагена, повреждением клеточных структур с изменением их антигенности и появлением иммунологически активных форм коллагена (Н.Г.Гусева, І98У; A.M. r.iackel,I985). Патологической перестройке в первую очередь подвергаются 1,Л и Ш типы коллагена в связи с наибольшим их распространением в органах и тканях. Иммунные реакции на эти изоформы коллагена играют ведущую роль в самопрогрессирующем течении склеродермического процесса и генерализованной поражении соединительной ткани с быстрым нарастанием дегенеративных изменений и потерей функции внутренних органов ( В.А.Насонова 1989; Н.Г.Гусева,1990; И.т . Haustein , 1990). Поэтому иммунологическим методам придается больное значение в диагностике этого заболевания. Однако далеко не всегда удается выявить минимальную динамику иммунологических показателей, а значит чётко определить
4, начало заболевания и прогнозировать поражения внутренних органов и систем.
Исходя из этого возникла необходимость разработки ноеьвс методов иыцунодиагностики ССД с использованием иммобилизованных гранулированных антигенов с магнитными свойствами на основе коллагена 1,П и Ш типов.
Исследованиями, проведенными в филиале Института ревматологии РАМН, доказана большая информативность методов иммуноанализа с использованием антигенных сорбентов для диагностики висцеральных нарушений у больных СКВ (А.Б.Зборовский,1991; С.ВЛевкин, 1991).
Включение коллагена в пространственную решетку полиакрила-мидного геля придает антигенам ноше свойства, благодаря которым они приобретают определенные преимущества перед растворимыми формами. При- тшобилиэации достигается стабилизадия фиксируемых белков, т.е. повышается их устойчивость к внешним воздействиям с сохранением их биологических свойств. Фиксация в носителе значительного количества антигенов способствует повышению чувствительности иммунологических методов. Включение магнитного материала позволяет ускорить и упростить ряд операций в твердофазных методах анализа, улучшить качественные характеристики определений (Е:Н.Трофимов,І9ЄГ7; В.И.Ефременко,І989; И.П.Гонтарь,І990). Таким образом, актуальность настоящего исследования обусловлена трудностями б иммунологической диагностике ССД, особенно её ранних стадий. Выбор антигенов обусловлен их патогенетическим значением, а разработка на их основе иммобилизованных гранулированных магдасорбентов позволит расширить диагностические и технические возможности иммуноферментного и иымунофлюоресцентноро методов анализа.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью нашей работы является усовершенствование иммунологической диагностики,и контроля эф -фенгивности терапии ССД с помощью иммобилизованных гранулированных антигенных препаратов с магнитными свойствами на основе нол-лагена 1,П и Ш типов.
Для выполнения этой цели поставлены следующие задачи:
-
Разработать технику иммуноферментного и иммунсфлюорес -центного анализа с использованием иммобилизованного коллагена I, П и Ш типов с магнитными свойствами.
-
На основе разработанных методов иммуноанализа изучить содержание антител к коллагену I, П и ІІІ типов у больных ССД в зависимости от активности, стадии и характера течения заболевания.
-
Оценить влияние различных видов терапии на динамику определяемых показателей у больных ССД.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РАБОТЫ» Созданные иммобилизованные гранулированные препараты на основе коллагена I, Пи 11 типов впервые применялись в иммунсферментном и иммунофлгаоресцентном методах для выявления специфических антител у больных ССД. Показано, что уровень антител к коллагену при ССД отличается от здоровых лиц и больных с синдромом Рейно, обусловленным остеохондрозом позвоночника. Отмечена зависимость антител к различным типам коллагена от клинических форм ССД и характера висцеральных проявлений. Выявлено, что максимальные уровня исследуемых антител определя -ются при остром течении заболевания и третьей степени активности процесса. Установлено диагностическое значение исследуемых показателей и доказана возможность их использования как критерия эффективности проводимой терапии.
ФАКТИЧЕСКАЯ ЦЕННОСТЬ. Используемая технология создания ' иммобилизованных гранулированных препаратов с магнитными свойст-
вами на основе отдельных типов коллагена позволяет получить их с повышенной сорбционной ёмкостью, что расширяет диапазон применения таких веществ в иммунологических методах анализа.
Применение магносорбентов в иммуноферментноы и иммунофлгао-ресцентном методах обеспечивает выявление антител к коллагену I, П и Ш типов на ранних стадиях ССД. Определение антител к различным типам коллагена у больных ССД монет быть использовано в качестве дополнительного диагностического теста для суждения об активности, стадии и характере течения заболевания, а также позволяет прогнозировать клинические проявления и судить об адекватности проводимого лечения.
НА ЗАЩИТУ ВЫНОСИТСЯ ПОЛОЖЕНИЕ о значении определения анти
тел к коллагену I ,П и U1 типов иммуноферментным и иммунофлюорес-
центньщ методом на основе иммобилизованных: антигенов с магнитны
ми свойствами для диагностики степени активности ССД, стадии,
вариантов течения, характера висцеральных поражений и оценки эф
фективности проводимой терапии. .
ПУБЛИКАЦИИ. Бо теме диссертации опубликовано б печатных работ, в том числе 4 в международной печати, I -в сборниках трудов Волгоградского медицинского института, І- в трудах ІУ Всесоюзного съезда ревматологов.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ. Основные положения диссертации доложены . на годичных научных сессиях Волгоградского ордена Трудового Красного Знамени медицинского института (1991, 1992), на заседаниях Волгоградского отделения Всесоюзного общества иммунологов (Волгоград, 1992), на Всесоюзном съезде ревматологов (Шнек, 1991), на II Международном симпозиуме "Реабилитация иммунной системы".'(Дагомыс, 1990), на У Международном Средиземноморском конгрессе ревматологов (Испания, 1990), на XII Европейском конгрессе ревматологов (Венгрия, 1991}.
. 7 ,
ОБЪЁМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ. Диссертация изложена на 10? страницах машинописного текста и состоит из введения, 5 глав, обсуждения полученных результатов, выводов и практических рекомендаций.
Диссертация иллюстрирована 14 таблицами, 4 рисунками,3 выписками из историй болезней. Библиографический указатель содержит 160 источников,в том числе 94 советских и 66 иностранных работ.
