Введение к работе
Актуальность темы диссертации. Несмотря на прогресс современной гепатологии, связанный с внедрением новых методов лабораторной и инструментальной диагностики, расшифровкой этиологии и патогенеза многих форм заболеваний печени, а также уточнением конкретных механизмов изменений на клеточном и молекулярном уровнях, лечение больных с острыми и хроническими поражениями печени все еще остается крайне сложной и, в ряде случаев, далекой от удовлетворительного решения проблемой (По-дымова С. Д.. 1993, Хазанов А. И., 1998). Неуклонный рост удельного веса болезней печени, в том числе острых и хронических гепатитов и гепатозов. цирроза органа, смертности от данного вида патологии, недостаточная эффективность используемых традиционных методов ее терапии диктуют необходимость поиска более оптимальных подходов к лечению болезней печени, особенно, средств их патогенетической терапии (Беляков Н. А., 1991).
Для борьбы с развивающимся при токсических поражениях печени синдромом экзогенной и эндогенной интоксикации организма в комплекс лечебных мероприятий все чаще включаются различные методы экстракорпоральной детоксикации, которые сами по себе не безразличны для организма, сопровождаются рядом побочных эффектов, требуют для своего осуществления наличия определенной аппаратуры и специально подготовленного персонала (Лопаткин Н. А., Лопухин Ю. М., 1989). В этой связи актуальным для современной гепатологии является разработка не только высокоэффективных, но и простых, доступных для большого числа больных и многократного применения методов детоксикации организма (Деденко И. К., 1996, 1997). К одному из них относится энтеросорбция (ЭС).
Несмотря на многочисленные экспериментальные и клинические исследования по изучению эффективности ЭС при различных заболеваниях ее влияние на течение и исход диффузных хронических поражений печени при многократном курсовом проведении практически не изучено.
Учитывая все вышеизложенное, теоретически важно и практически полезно было изучить влияние систематических многократных ежемесячных курсов ЭС при развитии хронического токсического поражения печени (XI1111) на выраженность эндогенной интоксикации организма, степень цитолиза в органе, структурно-функциональное его состояние.
Поскольку жизнедеятельность как здоровой, так и пораженной патологическим процессом печени во многом определяется состоянием ее субклеточных структур, изменения со стороны которых носят опережающий характер по отношению к органу и организму в целом, (Кривчик А. А., 1973, Саркисов Д. С, 1977) представлялось целесообразным изучить реакцию важнейших субклеточных структур гепатоцитов (митохондрий, лизосом, микро-сом) на систематическое курсовое введение сорбента.
Компонентом ХТПП, усугубляющим нарушение ее функционального состояния, является разрастание соединительной ткани с последующим нередким формированием цирроза органа (Логинов А. С, 1985). Цирроз печени является тяжелым исходом многих гепатопатий и обусловливает высокую смертность (Tomas А. В. R., Shaffer Е. А., 1992). Важно было выяснить, как повлияет при данной патологии проведение ежемесячных курсов гастроинте-стинальной сорбции на процесс фиброгенеза в печени.
Связь работы с крупными программами, темами. Диссертационная работа является логическим продолжением и развитием темы НИР кафедры патофизиологии МГМИ «Разработка путей коррекции патологических и компенсаторных реакций организма в ходе развития болезни на модели патологии печени, сердца, мозга, опухолевой болезни» (1992-1995 г; № государственной регистрации 19943208). Глава 5 диссертации - фрагмент темы НИР кафедры «Влияние энтеросорбции на структурно-функциональную перестройку митохондрий и лизосом гепатоцитов (количественная оценка) при хроническом токсическом поражении печени» (1996-1998 г; № государственной регистрации 1996271).
Цель и задачи исследования. Цель работы - выяснить влияние многократных ежемесячно повторяемых курсов ЭС на течение и исход ХТПП.
В соответствии с этой целью в рамках диссертационной работы были поставлены следующие задачи:
-
Изучить влияние многократных ежемесячных семидневных курсов ЭС на состояние экспериментальных животных, показатели токсемии, цитолиза в печени и функциональное состояние органа при хроническом токсическом его поражении CCL4.
-
Получить сведения о влиянии многократных курсов ЭС на состояние субклеточных структур (митохондрий, лизосом и микросом) гепатоцитов.
-
Дать сравнительную оценку влияния однократного и многократных ежемесячных курсов ЭС на изучаемые показатели при ХТПП.
-
Установить возможное влияние многократных курсов ЭС на процесс фиброгенеза в печени, характерный для хронических ее поражений.
Объект и предмет исследования. Объект исследования - печень и ее компоненты - гепатоциты, митохондрии (MX), лизосомальная (ЛЗ) и микро-сомальная системы, соединительно-тканный матрикс. Предмет исследования - влияние энтеросорбции на вышеназванные структуры при XI1111.
Гипотеза. Учитывая имеющиеся данные, в частности результаты исследований кафедры патофизиологии МГМИ (Гринько И. В., 1985-1995, Глинская Т. Н., 1992, Хаджуз А. Н., 1992), о положительном влиянии однократного курса ЭС, проведенного в различные стадии процесса, на проявления хронического поражения печени холестатического и токсического характера (выраженность эндотоксемии, цитолиза в органе, функциональное его состояние и состояние субклеточных структур гепатоцитов), можно было
ожидать, что многократные ежемесячно повторяемые курсы ЭС при развитии ХТПП дадут намного более ощутимые позитивные сдвиги в течении и исходе заболевания, возможно, затормозят процесс фиброгенеза в печени.
Методология и методы проведенного исследования. Моделирование ХТПП осуществляли путем подкожного интермиттирующего введения CCL4 (Логинов А.С., 1982; Гринько И.В., 1985). Хронический эксперимент со сроками наблюдения 4, 5 и 6 месяцев проведен на 312 беспородных крысах-самцах со строгим соблюдением правил проведения работ с лабораторными животными.
Сорбент ваулен вводили интрагастрально через зонд семидневными курсами в конце каждого очередного месяца.
О степени эндогенной интоксикации организма судили по содержанию в сыворотке крови средних молекул (СМ) и степени токсичности сыворотки крови (СТК), определяемой по ее влиянию на кариоциты селезенки интакт-ного животного (Радькова О. А. и соавт., 1989). Учитывали помесячную смертность крыс, выраженность цитолиза в печени по уровню в сыворотке крови аланинаминотрансферазы (АЛТ) и ее отношению к аспартатами-нотрансферазе (АЛТ/ACT), функциональное состояние печени, оцениваемое по результатам бромсульфалеиновой пробы (БСФ) и продолжительности наркотического сна (ПНС), которая в значительной степени определяется способностью микросомальной системы печени к биоконверсии ксенобиотиков.
На этапах 4- и 6-месячного ХТПП проводили морфометрическое изучение гистологических срезов печени, окрашенных по Маллори, для определения планиметрическим методом удельного объема соединительной ткани в органе и электронную микроскопию срезов печени с последующим морфо-метрическим исследованием MX и количественно-информационным анализом лизосомальной системы гепатоцитов.
Снятие крыс с опыта осуществляли по общепринятой методике путем декашггации в конце 4 (после 4 курсов ЭС), 5 (после 5 курсов ЭС) и 6 месяцев (после 6 курсов ЭС) ХТПП, на следующий день после последней процедуры ЭС в одни и те же часы.
Полученные результаты подвергались статистической обработке при помощи параметрических и непараметрических критериев.
Научная новизна и значимость полученных результатов.
-
Впервые изучено влияние многократных ежемесячно повторяемых курсов ЭС на течение и исход хронического токсического поражения печени.
-
Дана комплексная оценка эффективности многократных ежемесячно повторяющихся курсов ЭС при данном виде патологии, включающая характеристику состояния и поведения организма, степень выраженности токсемии, цитолиза в печени, функцию органа, сдвиги со стороны внутрикле-
точных структур (MX, ЛЗ и микросом гепатоцитов). Установлено высоко положительное влияние такого метода и тактики проведения сорбционной детоксикации организма при ХТПП на все изучаемые показатели, что демонстрирует их патогенетическую направленность и значимость.
-
Проведена сравнительная оценка однократного семидневного курса ЭС, осуществляемого в конце 4 месяца ХТПП, и многократных ежемесячно повторяемых курсов ЭС с подведением итогов на том же этапе эксперимента. Доказано, что результативность второго метода по всем показателям в 1,5-5,5 раза выше однокурсовой ЭС, проведенной спустя длительный срок от начала процесса.
-
Получены убедительные доказательства существенного тормозящего влияния многократных курсов ЭС на процесс фиброгенеза в печени при ХТПП, что подтверждает ведущую роль хронической токсемии в патогенезе фиброза органа и патогенетическую обоснованность проведения систематических курсов ЭС при данной форме патологии с целью его профилактики.
Практическая значимость полученных результатов. Результаты экспериментальных исследований, свидетельствующие о положительном влиянии многократных ежемесячно повторяемых курсов ЭС на течение и исход хронического токсического поражения печени, заключающемся в выраженном уменьшении степени эндогенной интоксикации организма, значительном улучшении функционирования органа и состояния субклеточных структур гепатоцитов, резком снижении удельного объема соединительной ткани в печени, намного большая эффективность повторного курсового введения сорбента по сравнению с однократным курсом гастроинтестинальной сорбции, обосновывают правомерность и целесообразность более широкого использования ЭС, в частности ежемесячное курсовое ее проведение, в комплексе лечебных мероприятий ХТПП.
Основные положения диссертации, выносимые на защиту.
-
Многократные ежемесячно повторяемые курсы ЭС являются эффективным патогенетически обоснованным методом лечения хронического токсического поражения печени.
-
Положительное влияние многократных курсов ЭС при ХТПП проявляется заметным снижением уровня токсемии, степени цитолиза в печени, нормализующим влиянием на функцию органа, улучшением состояния субклеточных структур гепатоцитов, уменьшением выраженности фиброза печени, значительным повышением выживаемости экспериментальных животных.
-
Эффективность многократных ежемесячно повторяемых курсов ЭС, проводимых в течение 4 месяцев ХТПП, намного выше однократного цикла гастроинтестинальной сорбции, проведенной в конце 4 месяца ХТПП по всем изучаемым показателям: выраженности токсемии, степени цитолиза
в органе, функционального состояния печени и субклеточных структур гепатоцитов.
Личный вклад соискателя. Автор принимал непосредственное участие в выполнении работы по всем разделам диссертации, включая организацию и проведение экспериментальных, лабораторных и морфолопгческих исследований, статистическую обработку полученных данных, обобщение и анализ результатов работы. Определение уровня средних молекул и активности АЛТ, ACT в сыворотке крови, степени ее токсичности, поглотительно-экскреторной функции печени, гастродуоденальное зондирование крыс проводилось самостоятельно. Экспериментальная часть работы выполнена на базе экспериментально-биологической клиники и лаборатории физиологии и экспериментальной патологии ЦНИЛ МГМИ. Морфологический раздел работы выполнен совместно с сотрудниками кафедры патофизиологии МГМИ канд. мед. наук В. Ю. Зиновкиной и Т. Н. Глинской, асе. кафедры гистологии МГМИ И. Н. Мельниковым; постановка пробы ПНС - со старшим научным сотрудником лаборатории физиологии и экспериментальной патологии канд. биол. наук Никифоровой И. Н.
Апробация результатов диссертации. Основные результаты работы доложены и обсуждены на: Республиканских научных конференциях молодых ученых и студентов «Актуальные проблемы современной медицины» (Минск, 1997, 1998, 1999); II Белорусско-Российском симпозиуме «Биохимические механизмы эндогенной интоксикации» (Гродно, 1997); VI Международной научно-практической конференции «Экология человека в постчернобыльский период» (Минск, 1998); III Белорусской научно-практической конференции «Эфферентные и физико-химические методы терапии» (Могилев, 1998), научной сессии Минского медицинского института (1999), заседаниях кафедры патофизиологии МГМИ (1996-1999), совместном заседании кафедры патофизиологии МГМИ и городского общества патофизиологов (1999).
Опублнкованность результатов. По материалам диссертации опубликовано 10 работ, из них 5 статей в журнале и сборниках, 4 тезисов. Одна работа депонирована в БелИСА. Общее количество страниц опубликованных материалов составляет 42 страницы.
Структура и объем диссертации. Диссертация изложена на 116 страницах машинописного текста и состоит из: введения, общей характеристики работы, обзора литературы, описания материала и методов исследования, 4 глав собственных исследований, заключения, списка литературы, включающего 377 источников. Работа иллюстрирована 27 рисунками, содержит 7 таблиц.
