Введение к работе
Актуальность темы
Распространенность язвенной болезни среди взрослого населения составляет в разных странах от 5 до 15%. Если в возникновении язвы двенадцатиперстной кишки особое значение придается активации факторов агрессии, то при возникновении язвы желудка – нарушению факторов защиты. Значимым фактором агрессии является H. pylori. Однако в различных исследованиях показано, что у ряда пациентов (от 20 до 60%) с язвами желудка развитие заболевания происходит без участия H. pylori. Более того, язвы рубцуются без применения эрадикационной терапии. Данные обзора рандомизированных исследований показывают, что рецидивы ЯБЖ наступают у 5—10% больных и после эрадикации. Только у 38% пациентов с IgG к H. pylori в крови выявляется язвенная болезнь, гастродуоденит или рак желудка. Таким образом, с одной стороны очевидна роль H.pylori в патогенезе язвы желудка, с другой стороны - факторов защиты, заключающихся в высокой скорости регенерации слизистой (Hopkins R.J., 1996; Ивашкин В.Т. с соавт., 2002; Абдулганиева Д. И., 2003; Щербинина М. Б., 2005; Иванов Л.Н., 2005; Амиров Н.Ш. с соавт., 2005; Бредихина Н.А., 2009).
В последние годы в связи с успехами молекулярной биологии существенно изменились представления о механизмах регуляции регенераторных процессов. Восстановление структуры включает: клеточную пролиферацию и дифференцировку, миграцию клеток, а также реструктуризацию стромы и ангиогенез. Ведущими факторами в обеспечении пролиферации и дифференцировки являются ростовые факторы и их рецепторы, в частности EGFR – рецептор эпидермального фактора роста с тирозинкиназной активностью (Tarnawski A., 2005).
EGFR, расположенные апикально, повышают резистентность эпителиальных клеток желудка к кислоте, регулируют парацеллюлярную проницаемость (Balestreire E.M. еt al., 2007; Chen M. et al., 2002). Повреждение слизистой значительно активирует экспрессию EGFR и его лигандов (EGF, TGF-), которые реализуют свою активность через митоген-активируемые протеинкиназы (МАП-киназы), а ингибиторы МАП-киназы затрудняют регенерацию. Экзогенный EGF потенцирует действие Н2-блокаторов (Okabe S. еt al., 2005). Механизм действия некоторых антацидов включает активацию генов EGF с EGFR, благодяря чему реализуется противоязвенный эффект (Tarnawski A. et al., 2000).
При активации EGFR происходит открытие специфических магниевых каналов плазмолеммы (TRPM6, TRPM7), посредством которых Mg2+ поступает внутрь клетки (Quamme G.A., 2008; Muallem S. еt al., 2007; Rondon L.J. et al., 2008). На культуре клеток показано, что пролиферирующие клетки потребляют магний (Rubin H., 2005). Значимость магния в обеспечении резистентности слизистой показана в ряде работ российских и зарубежных авторов (Mooren F.C., 1999; Zimowska W. et al., 2002; Федосеенко М.В. с соавт., 2003; Лебедева С.А., 2005).
Однако не систематизированы данные о пролиферативном процессе в различных слоях стенки желудка и на различных сроках регенерации язвы. Недостаточно изученным остаётся вопрос о характере изменения системного магниевого баланса, обеспечивающего оптимальные условия регенерации язвы. Нет данных о взаимосвязи магниевого баланса с активностью пролиферативных процессов в зоне регенерации язвенного дефекта.
Всё вышеперечисленное делает необходимым одновременное изучение механизмов регуляции пролиферации и магниевого баланса, каждый из которых вовлечён в механизмы резистентности слизистой ЖКТ.
Цель исследования
Целью исследования является определение роли плазмолеммного, ядерного регуляторов пролиферации и магниевого баланса в патогенезе язвенных повреждений желудка и возможность их коррекции.
Задачи исследования
-
Определить изменение удельного числа EGFR- и Ki67 – позитивных клеток в слоях стенки желудка при формировании и развитии экспериментальной ацетатной язвы.
-
Исследовать магниевый баланс при формировании и развитии экспериментальной ацетатной язвы и в процессе обострения язвенной болезни желудка в клинике.
-
Оценить взаимосвязь удельного числа EGFR-, Ki67 – позитивных клеток и концентрации магния эритроцитов в крови из подключичной вены.
-
Выявить влияние магнийсодержащей лекарственной композиции на основе минерала бишофит на магниевый баланс, удельное количество Ki67 – и EGFR- позитивных клеток в слоях стенки желудка, биохимические маркеры клеточного повреждения, активность сукцинатдегидрогеназы в тканях желудка и морфологические признаки регенерации при экспериментальном язвенном процессе.
-
Исследовать взаимосвязь вегетативного регулирования и концентрации магния эритроцитов при экспериментальной ацетатной язве и у больных с обострением язвенной болезни желудка.
Научная новизна работы
Впервые выявлено неодновременное повышение пролиферативной активности в разных слоях желудка при его экспериментальном эрозивно-язвенном повреждении. На 7-е сутки формирования ЭАЯ желудка в СПСО на фоне весьма умеренного увеличения числа клеток, вступивших в митоз, отмечается практически полное отсутствие активированных клеток, готовых к пролиферации. В ПО имеет место как увеличение числа делящихся клеток, так и сохранение субпопуляции клеток, активированных к дальнейшему размножению. На 14-е сутки в СПСО активируется процесс пролиферации, проявлением чего служит увеличение субпопуляции клеток вступивших в митоз, так и происходит восстановление числа клеток, готовых к делению при одновременном ещё большем увеличении в ПО удельного числа клеток, готовых к размножению.
На 14-е сутки с момента моделирования ЭАЯ желудка отмечается тенденция к аккумуляции магния в клетке на фоне сниженного оттока с лимфой ОКЛП из интерстиция и возросшего транспорта с кровью воротной вены на фоне сниженного магнийуреза.
Определена положительная корреляционная зависимость между показателем прироста содержания магния в эритроцитах и удельным числом EGFR – позитивных клеток СПСО.
Показано, что применение магнийсодержащей лекарственной композиции в форме суппозиториев (МЛКс) при ЭАЯ уменьшает площадь язвенного дефекта благодаря ускорению образования грануляционной ткани в дне язвы, восстановления сосудистого компонента, снижению обсемененности спиралевидными микроорганизмами, нормализации концентрации биохимических маркеров клеточного повреждения (МСМ, ЛДГ). Под влиянием МЛКс в ПО пролиферативные процессы так же повышены, но менее выражены в сравнении с ЭАЯ без лечения, а в СПСО перифокальной зоне более выражены, чем при язве без лечения.
Научно-практическая значимость
Получены новые данные о регуляции процесса пролиферации, о его зависимости от состояния магниевого баланса и вегетативного тонуса. Установлено, что в процессе формирования ЭАЯ и обострения ЯБЖ у человека отмечается симпатотония. Применение МЛК при ЭАЯ приводит к уменьшению площади язвенного дефекта, усилению пролиферации и восстановлению магниевого и вегетативного баланса. Площадь язвенного дефекта имеет тенденцию к уменьшению как при применении МЛК в виде гранулята, так и суппозиториев.
Основные положения, выносимые на защиту
-
В процессе формирования и развития экспериментальной ацетатной язвы происходит неодновременная активация пролиферации в различных слоях стенки желудка.
-
На 7-е сутки с момента моделирования экспериментальной ацетатной язвы в собственной пластинке слизистой оболочки отмечается умеренное нарастание количества клеток, вступивших в митоз при практически полном отсутствии активированных клеток, готовых продолжать деление; в то время как в подслизистой основе на фоне усиленного деления значительно увеличивается популяция клеток, готовых делиться.
-
На 14-е сутки с момента моделирования экспериментальной ацетатной язвы в собственной пластинке слизистой оболочки выявляется возрастание числа вступивших в митоз клеток при восстановлении субпопуляции клеток, готовых приступить к делению; при одновременном увеличении в подслизистой основе как делящихся клеток, так и готовых к делению.
-
На фоне сформировавшейся экспериментальной ацетатной язвы концентрация магния эритроцитов крови из подключичной вены и суточном объеме мочи снижается. В динамике развития экспериментальной ацетатной язвы выявлено восстановление концентрации магния эритроцитов крови из подключичной вены до контрольных значений при сохранении сниженного содержания в суточном объеме мочи.
-
Установлена прямая корреляционная зависимость между уровнем внутриклеточного магния и числом активированных к делению клеток. Восстановление уровня клеточного магния приводит к оптимизации пролиферативных процессов в зоне экспериментальной ацетатной язвы, что проявляется возрастанием числа клеток, готовых приступить к делению в собственной пластинке слизистой оболочки.
-
Применение магнийсодержащей лекарственной композиции в форме суппозиториев при экспериментальной ацетатной язве вызывает уменьшение площади язвенного дефекта за счет ускорения образования грануляционной ткани, восстановления сосудистого компонента, усиления пролиферации в перифокальной зоне собственной пластинки слизистой оболочки, нормализации магниевого и вегетативного баланса.
-
У пациентов с обострением язвенной болезни желудка наблюдается симпатикотония и происходит снижение уровня магния эритроцитов к 30-му дню лечения.
Апробация работы
Материалы работы были представлены и прошли обсуждение на конференции, посвященной 65-летию кафедры оперативной хирургии и топографической анатомии ВолГМУ (Волгоград, 2004), 62-ой, 63-ей и 66-ой научных конференциях ВолГМУ (Волгоград, 2004, 2005, 2008), 3-ей международной конференции "Болезни цивилизации в аспекте учения В.И. Вернандского" (Москва, 2005), научной конференции с международным участием "Медико-биологические аспекты мультифакториальной патологии" (Курск, 2006), IX Международном конгрессе "Здоровье и образование в XXI веке" (Москва, 2008), IX Всероссийской научно-практической конференции “Актуальные вопросы клиники, диагностики и лечения в многопрофильном лечебном учреждении” (Санкт-Петербург, 2009).
Получен патент на изобретение №2348414: Способ первичной профилактики возникновения и развития язвенных повреждений 12-перстной кишки./Л.М. Ганичева, С.А. Галкин, В.А. Старавойтов, В.А. Рогов. Зарегестрирован в государственном реестре Российской Федерации 10 марта 2009г.
Публикации
По материалам диссертационного исследования опубликовано 9 работ, в том числе 3 в журналах, рекомендованных ВАК РФ.
Объём и структура работы
Диссертация изложена на 138 страницах машинописного текста. Состоит из введения, 5-ти глав, обсуждения, выводов. Работа иллюстрирована 19 таблицами, 20 рисунками и 5 схемами. Список литературы содержит 192 источника, из них 75 отечественных и 117 иностранных.
