Введение к работе
Актуальность темы. В последние десятилетия атеросклероз занял одно из ведущих мест в структуре заболеваемости населения, как по частоте возникновения, так и по тяжести осложнений, инвалидизации и уровню смертности, что обусловливает необходимость дальнейшего детального изучения патогенетических механизмов этого заболевания, разработки мер его профилактики, ранней диагностики и лечения (Чазов Е.И., 1986, Оганов Р.Г., Перова Н.В., I990,Uemura К., Piza Ъ., 1988).
Известно, что в развитии атеросклероза и ИБС существенное значение имэит различные формы гиперлипидемий (ГЛП), как приобретенные, связанные в большинстве случаев, с характером питания, так я наследственно обусловленные (первичные или семейные ГЛП) (Климов А.Н., 1987, Оганов Р.Г. и др., 1990, Репин B.C., 1990, Hubinetein О, et
al., 1986, Turay I., 1986, Salbach P. et al., 1989). И совершенно очевидно, что прогресс в понимании механизмов патогенеза атеросклероза и ИЕС в значительной степени связан с изучением различных звеньев-нарушения обмена липидов и липопротеидов (ЛП). Однако, наряду с установлением роли отдельных классов ЛП и апопротеинов в развитии атеросклероза, детальным изучением биосинтеза и транспорта ЛПНП, являющихся главными источниками холестерина (ХС) в атероскле-ротических бляшках, процессн деградации, химической и энзиматическо!1 модификации этой группы Ш в условиях рецептор-опосредованного и неспецифического эндоцитоэа, исследованы далеко неполно. В этом плане существенный интерес представляют системные исследования гидролитических лизосомальных ферментов, участвующих в обмене ЛПНП. Однакоt если в отношении участия протеолитических лизосомальных ферментов в деградации и модификации белкового компонента ЛПШ и их роли в патогенезе ИЕС и ГЛП проведены обстоятельные исследования (Коровкин Б.., 1982, Карманский И.М. и др., 1986, Шликитер В.О., 1987, Ту-тельян В.А., Васильев А.В., 1987, Шимановская Н.П., 1980), то состояние системы лизосомальных липолитических ферментов при различных нарушениях липидного обмена практически не исследовано.
Одним из перспективных направлений в этом отношении может оказаться изучение спектра лизосомальных липолитических ферментов в изолированных клетках крови, в частности, в тромбоцитах, моноцитах и лимфоцитах. Основанием для подобного подхода служат, с одной сто-
2.
роны, имеющиеся сведения О повышении при ГЛП активности кислой фосфолипазы Aj в тромбоцитах (Тц), коррелирующим с изменением активности этого фермента в адітоцитах (Самсонов М.А. -и др., 1986, Васильев А.Б. и др., 1987); изменении активности кислой липазы и кислой холестеролэстеразы в мононуклеарах (Мн) крови у больных ИЕС и ГЛП. (Гапонова М.В. и др.. 1988, Hagemenas F.C. et al., 1984, Coatee P.M. et al., 1986), а с другой стороны, данные об участии Тц и Мн крови во многих патогенетических механизмах атеросклероза, особенно на его ранних стадиях (Маянский Д.Н., 1988, Angelln В. et el., 1988, Fogelman A.M. et al., 1988, Munro J.M., Ootran K.S., 1988).
Важним аспектом решения проблемы профилактики и лечения атеросклероза является изучение роли фактора питания (Головкина Т.М. и др., 1992, Эльгаров А.А. и др., 1992, Самсонов М.А. и др., 1989, Оганов Р.Г. и др., 1990, Мещерякова В.А., 1989, Sohonfeld О., 1988, Stenhbens W.O., 1989, Kannel W.B., 1988). Однако, в экспериментальных и клинических исследованиях при изучении эффективности антиатеросклеротических диет значительное внимание уделяется анализу классических показателей липидного обмена; сведения об изменении целого рвда других метаболических показателей, отражающих влияние алиментарных факторов, особенно на клеточном уровне, весьма ограничены. Поиск информативных критериев нарушения обмена липидов и ЛП при атеросклерозе предполагает возможность использования этих показателей для ранней диагностики атеросклероза, контроля за его течением, а также оценки атерогенного и антиатерогеїшого действия факторов питания, что в значительной степени будет способствовать повышению эффективности диетической терапии больных атеросклерозом.
Цель работы и запачи исследования. Целью работы явилось изучение функционального состояния липолитических ферментов лизосом у некоторых категорий болы.ых с нарушенным липидным обменом, а также на модели экспериментального атеросклероза; исследование влияния фактора питания на активность лизоеомальных кислых гидролаз Тц и Мн крови у больных НЕС, ГЛП и гипертопической болезнью (ГВ); разработка энзиматических подходов для ранней диагностики'нарушений ЛЯ и оценки эффективности диетической терапии.
Конкретные запачи исследования включали; - Сравнительное изучение активности лизосомалншх гидролаз - кислой липазы (КЛ), кислой холестеролэстеразы (ЮЭ), кислых фосфоли-
3. ,
аз Aj и Ag^JIAjK, ФМ^к) и щелочных фосфолипаз Aj и Ag^JIAjiili НАрщ) в Тц и Мн крови у практически здоровых людей и у больных ЕС, ГБ и ГЖ1 различного типа.
Исследование активности лизосомальных липолитических ферментов Гц и Мн крови, интиме грудной аорты, слизистой тонкого кишечника п: чени кроликов с экспериментальным атеросклерозом. Изучение влияния базисной противоатеросклеротической диеты на ггивность лизосомальных липолитических ферментов у больных ИБС, 3 и ГЛП.
Изучение влияния модифицированной по жирнонислотному составу х>тивоаторосклеротической диеты, обогащенной ПНЖК семейства W 3, і активность изучаемых ферментов у больных ИБС, ГБ и ГЛП. Изучение влияния базисной противоатеросклеротической диеты моди-цированной по белковому составу (с включением изолята соевого >лка) на активность лизосомальных липолитических ферментов Тц и і крови у больных ІІБС, ГЕ и ГЛП.
Научная новизна. Впервые в комплексном исследовании получены інньїе о взаимосвязи между функциональным состоянием лизосомальной политической ферментной системы "Гц и Мн крови, показателями ли-дного обмена и выраженностью клинической симптоматики у больных С, ГЛП и ГБ; доказана существенная роль системі липолитических рментов лизосом в наруяеник обмена липидов и Ш при этих заболе-лиях.
В исследованиях на модели экспериментального атеросклероза лучены новые данные об участии гидролитического комплекса лизо-м различных типов клеток (гепатоцитов, энтероцитов, клеток-ин-мы аорты, Тц и Мн крови) в катаболизме ЛПНП при развитии атеро-лероза.
Показано, что активность лизосомальных липолитических фермен-в может служить характеристикой развития атсросклеротического оцесса, а функциональные нарушения липолитической системы лизо-м являются одним из звеньев патогенеза атеросклероза. Новыми ляются данные о модулирующем влиянии противоатеросклеротических эт с включением ПНЖК СО 3 и изолята соевого белка на систему зосомальных липолитических ферментов Тц и Мн крови у больных с рушенным липидным обменом. Дано обоснование оценки эффективнос-дифференцированной диетотерапии с позиций воздойствіш алимен-эных факторов на активность липолитических ферментов лизосом.
Научно-практическая значимость работы. Полученные реэульта-
4.
ты явились научным обоснованием для использования комплексного определения активности лизосомальных липолитических ферментов в Тц и Мн крови в качестве диагностических и прогностических критериев оценки развития атеросклероз?.
Выявленный, на основании клинико-биохимичееких исследований, высокий терапевтический эффект противоатеросклеротических диет с включением Ї1ШК (.0 3 и изолята соевого белка, послужил основанием для включения этих биологически активных факторов в диеты для лечения больных с нарушением липидного обмена. Проведенные исследования позволили обосновать целесообразность включения в многофакторную клинико-биохимическую оценку эффективности диетотерапии больных ИБС, ГБ и ГЛП комплексного определения активности лизосомальных липолитических ферментов в Тц и Мн крови. Материалы диссертации включены в "Методические рекомендации по применению эйконола для больных с сердечно-сосудистой патологией", М., 1992 (в печати). Результаты исследований используются в учебно-методическом процессе при подготовке специалистов-диетологов (на базе Клиники лечебного питания Института питания РАМН, на кафедре питания ЦОЛИУВ), в практической работе Клиники Института питания РАМН.
Апробация работы проведена на расширенной клинической конференции отдела лечебного питания Института питания РАМН (18.06.92). Основные положения диссертационной работы доложены и обсувдеш на Всесоюзной научной конференции "Актуальные вопросы профилактики неинфекционных заболеваний", г. Москва, 1990 г., Учредительном конгрессе Международного общества патофизиологов, г. Москва, 1991 г., II Всесоюзном семинаре "Тромбоцит как тест-система физиологических и патологических состояний человека", г. Ташкент, 1991 г., научной конференции отдела лечебного питания Института питания РАМН совместно с проблемной комиссией "Лечебное питание", 1991 г.
Публикации. Основные положения диссертации отражены в 7 печатных работах.
Структура и объем диссертации. Диссертационная работа состоит из введения, трех глав обзора литературы, главы "Материалы и методы исследования", пяти глав раздела "Результаты клинико-эксперимен-тальных исследований и их обсуждение", заключения, выводов и указателя литературы, включающего 316 источников (из них 105 на русском языке и 211 на иностранных языках). Работа изложена на /ВЇГ страницах, включает 17 таблиц и 6 рисунков.
Работа выполнена в соответствии с планом НИР Института пита-
5.
ния РАІЛН по теме 054 "Изучение молекулярных и клеточных процессов при атерогенных гиперлипидемиях, совершенствование методов диагностики атеросклероза, создание новых методов профилактики и лечения атеросклероза алиментарным фактором" (№ гос. регистрации 01.90. 0014737).
