Введение к работе
Актуальность работы. На территории Предуралья, преимущественно в зоне южно-таежных и хвойно-широколиственных лесов, широко распространены очаги иксодовых клещевых боррелиозов (ИКБ) и клещевого энцефалита (КЭ) [Воробьева Н.Н., 1998, 2000; Korenberg et al., 2001]. В последние годы в Прикамье были описаны еще две нозологические формы инфекций, возбудителей которых также передают иксодовые клещи: моноцитарный эрлихиоз человека (МЭЧ) и гранулоцитарный анаплазмоз человека (ГАЧ) [Коренберг Э.И., 1999; Воробьева Н.Н., 2000; Григорян Е.В., 2000; Афанасьева М.В., 2006]. Ввиду сходства механизма передачи и общих переносчиков нередко происходит одновременное инфицирование сразу несколькими возбудителями инфекций с развитием разнообразных смешанных заболеваний [Коренберг Э.И., 2001]. В этой связи, их клиническая диагностика в остром периоде значительно затруднена, так как проявления характерного для них общеинфекционного синдрома неспецифичны и могут наблюдаться при многих других заболеваниях, не связанных с укусом клеща.
Наиболее часто для верификации инфекций, передающихся иксодовыми клещами, используют серологические методы диагностики. Однако, вследствие замедленного иммуногенеза и недостаточно высокой чувствительности тест-систем лабораторная диагностика этих заболеваний требует дальнейшего совершенствования [Aguero-Rosenfeld M.E., 2005; Wilske B., 2007; Thomas R.J., 2009; Ismail N., 2010]. Поэтому большое значение приобретает применение метода полимеразной цепной реакции (ПЦР), который позволяет осуществлять детекцию ДНК или РНК микроорганизмов в различных биологических тканях (кровь, ликвор и др.) уже в остром периоде заболевания. Целесообразность использования ПЦР также обусловлена ее высокой специфичностью, возможностью идентификации возбудителей заболеваний до геновидов [Liebling M.R., 1993; Busch U., 1996; Swanson J., 2006]. Однако, несмотря на широко известные достоинства этой реакции, ПЦР-диагностика нестандартизована, а условия ее наиболее эффективного применения нуждаются в выявлении и практической апробации на репрезентативном клиническом материале [Brouqui P., 2004; Aguero-Rosenfeld M.E., 2005; Wilske B., 2007]. Вместе с тем, использование ПЦР отнюдь не означает утраты определенного значения серологических методов лабораторной диагностики.
Цель исследования: анализ особенностей клинического течения иксодовых клещевых боррелиозов и гранулоцитарного анаплазмоза человека, протекающих в виде моно- и микст-инфекций, оптимизация лабораторной диагностики этих заболеваний путем сочетания серологического метода с молекулярно-биологическим. Задачи исследования
-
Уточнить особенности клинической картины иксодовых клещевых боррелиозов и гранулоцитарного анаплазмоза человека, протекающих в виде моно- и микст-инфекций.
-
Охарактеризовать серонегативные варианты течения иксодовых клещевых боррелиозов, гранулоцитарного анаплазмоза человека и выявить их дифференциально-диагностические признаки.
-
Определить сроки наиболее интенсивной боррелиемии путем прямой изоляции спирохет из крови пациентов и идентифицировать возбудителей эритемной формы боррелиозов.
-
Оценить диагностическую чувствительность и выявить оптимальные сроки применения ПЦР для лабораторной диагностики иксодовых клещевых боррелиозов и гранулоцитарного анаплазмоза человека.
-
Провести сравнительный анализ результатов применения методов ИФА и ПЦР, полученных при лабораторной диагностике иксодовых клещевых боррелиозов и гранулоцитарного анаплазмоза человека.
Научная новизна работы. Выявлены клинические особенности моно- и микст-инфекций ИКБ и ГАЧ. Показано, что ГАЧ может протекать не только в манифестной, но и в инаппарантной форме. Впервые установлена возможность серонегативного течения инфекционного процесса при ГАЧ и охарактеризованы его клинические проявления. Выявлены клинические особенности серонегативного варианта эритемной формы ИКБ.
Впервые в Российской Федерации выделены и идентифицированы изоляты боррелий (B. garinii геномной подгруппы NT29) из крови больных ИКБ; получены данные, характеризующие частоту изоляции возбудителя боррелиозов от пациентов с эритемной формой заболевания.
Проанализирована эффективность метода ПЦР в сравнении с серологическим методом (ИФА) при лабораторной диагностике ИКБ и ГАЧ. Установлены оптимальные сроки применения ПЦР для подтверждения диагноза ИКБ и ГАЧ, позволяющие верифицировать эти инфекции в дебюте заболевания (до появления четких серодиагностических данных), а также при их серонегативных вариантах.
Практическая значимость работы. Полученные результаты позволяют улучшить клиническую и лабораторную диагностику иксодовых клещевых боррелиозов, гранулоцитарного анаплазмоза человека и их микст- инфекции.
С помощью культурального метода установлена видовая принадлежность наиболее распространенных возбудителей эритемной формы ИКБ в Прикамье.
Выявлены клинические особенности ИКБ, ГАЧ, анаплазмозно- боррелиозной микст-инфекции и оптимальные сроки применения ПЦР (в сочетании с серологическим методом) для лабораторной верификации этих заболеваний, что способствует их ранней диагностике и своевременному назначению адекватной этиотропной терапии.
Реализация и внедрение результатов исследования. Принципы клинико-лабораторной диагностики ИКБ, ГАЧ и анаплазмозно-боррелиозной инфекции, способствующие повышению уровня выявляемости этих заболеваний внедрены в работу Пермской краевой клинической инфекционной больницы.
Материалы диссертационной работы используются в учебном процессе на кафедрах инфекционных болезней, микробиологии с курсом вирусологии и иммунологии, эпидемиологии с курсом гигиены и эпидемиологии ФПК и ППС, а также в лекциях и практических занятиях с курсантами факультета усовершенствования врачей кафедры инфекционных болезней Пермской государственной медицинской академии им. ак. Е.А. Вагнера.
Личное участие автора в получении результатов. Автором лично проведена лабораторная диагностика ИКБ, ГАЧ и МЭЧ с помощью ПЦР в лаборатории переносчиков инфекций ФГБУ «НИИЭМ им. Н.Ф. Гамалеи» Минздрава России, а также клиническое обследование больных, поступивших в Пермскую краевую клиническую инфекционную больницу с заболеваниями, развившимися после присасывания клещей в эпидсезоны 2007-2010 гг. Вся полученная информация систематизирована, обработана и проанализирована.
Апробация и публикация материалов работы. Материалы диссертации представлены на научных сессиях ГБОУ ВПО «ПГМА им. ак. Е.А. Вагнера» Минздрава России (Пермь, 2009, 2010, 2011, 2012), 10-м международном симпозиуме по инфекциям, передающимся иксодовыми клещами (Веймар, Германия, 2009), Краевой научно-практической конференции «Актуальные проблемы инфекционной патологии» (Пермь, 2010), Всероссийской научно-практической конференции с международным участием «Современные аспекты природной очаговости болезней», посвященной 90-летию ФГУН «Омский научно-исследовательский институт природноочаговых инфекций» Роспотребнадзора (Омск, 2011).
По теме диссертации опубликовано 13 научных работ, из которых 5 - в центральных изданиях, рекомендованных ВАК Минобразования и науки Российской Федерации.
Объем и структура диссертации. Диссертация изложена на 189 страницах машинописного текста и состоит из введения, обзора литературы, главы «Материалы и методы исследования», четырех глав собственных
исследований, заключения, выводов, практических рекомендаций и указателя литературы, включающего 87 отечественных и 170 зарубежных источников. Диссертация иллюстрирована 18 таблицами, 28 рисунками и 11 клиническими примерами.
Похожие диссертации на Оптимизация лабораторной диагностики и клинические особенности иксодовых клещевых боррелиозов, гранулоцитарного анаплазмоза человека
![Оптимизация методов диагностики диссеминированного туберкулеза в учреждениях первичной медико-санитарной помощи и особенности его клинического течения в современных эпидемических условиях [Электронный ресурс]](/i/i/4306/191956.png "Оптимизация методов диагностики диссеминированного туберкулеза в учреждениях первичной медико-санитарной помощи и особенности его клинического течения в современных эпидемических условиях [Электронный ресурс] Горохова Ирина Валентиновна")
