Введение к работе
n.or.'1'I:.;: .
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Известно, что бактериальная инфекция играет значительную роль в структуре неонатальной заболеваемости. Предрасполагающими факторами являются повреждающие воздействия на становление иммунной системы плода, нарушение процессов внеутробной адаптации новорожденного, интенсивная бактериальная контаминация (Г.А.Самсыгина и др., Г9Є7; 3.И.Михайлова и др., 1986; Л.И.Васильева, 1990).
Основная сложность в клинической диагностике инфекционных заболеваний, развивающихся в анте- и интранатальный периоды, состоит в том, что большинство клинических проявлений внутриутробных инфекций являются общими и для неинфекционных заболеваний, поэтому в каждом случае для подтверждения диагноза необходимо проводить лабораторные исследования с помощью экспресс анализа, так как инфекционный процесс в неонатальный период может в короткий срок закончиться летальным исходом (П.А.Девис, Л.А.Готефорс, 1987; П.Н.Дерябин и др., 1987; її.А.Овчинникова и др., 1987; Т.В.Баутпна, 1988). Поэтому ранняя диагностика инфек-ционно-воспалительных заболеваний, обеспечивающая адекватную этиопатогенетическую терапию, является актуальной проблемой клинической медицины.
Ведущим методом диагностики бактериальной инфекции является микробиологическое исследование материала из очагоЕ инфекции и жидких сред организма. Но бактериологическое исследование, во-первых, не всегда дает положительные результаты (от 32 до 80) и во-вторых, лишено экспрессности, удовлетворяющей клиническую и эпидемиологическую практику (В.И.Каляничева и др., 1984; А.Ф.Фролов и др., Г987; М.К.Северцова и др., 1988; s.p. Knatua et al., 1986).
В настоящее время в лабораторной диагностике неонатальной бактериальной инфекции используют в осноеном неспецифические скрининговне метода: количественное определение С-реактиЕНого белка (J.H.Bhrich et al., 1986; 3.Shine et al., 1985), тест с нитросиним тетразолем (В.А.Силич и др., 1985; Р.А.Малншева и др., 1985; 0.Montana et al., 1985), оценка лейкоцитарной формулы (П.А.Девис, Л.А.Готефорс, 1987; Н.З.Никитина и др., T99I; c.u.biu et al., 1985; с.p.Sneer et al., 1985). Специфические се-
рологические методы диагностики зачастую трудно выполнимы е неонатологичесной практике, что связано с использованием достаточно больших: объемов крови для новорожденного (РИГА), с определенной сложностью в проведении и с потребностью в специальных реактивах и препаратах. Кроме того, внедрение иммунологических методов диагностики инфекционных заболеваний сдерживается плохой технической оснащенностью лабораторий и недостатками промышленного выпуска, диагностических препаратов (Н.В.Иванова и др., 1991).
Таким образом, разработка простых и достаточно надежных .диагностических гестов с использованием мпкрообъемов крови, которые могли бы дать объективную информацию о наличии икфекцион-нс—воспалительных заболеваний, их актиЕНостл и позволили бы судить об эффективности проведенного лечения, является актуальной задачей.
ЦЕЛЬ ИССЛЕДОВАНИЯ - совершенствование диагностики ингйекци-онно-воспалительных заболеваний новорожденных и детей раннего возраста, вызванных грашолокительными и гра:?стрицателышми микроорганизмами, путем создания диагностического кст.шлекса на основе микрсметодоЕ.
-
Изучить взаимодействие измененных гранулоантсв с микроорганизмами у детей с инфеіщионно-ЕОспалителвнь7.:п и неинФвкци-онными заболеваниями. Разработать микрометсд дтіагностпки этиологии ин^екционяо-ЕОСпалительннх заболеваний у новорожденных и детей раїшего Есзраста.
-
Изучить термодинамические характеристики реакции антиген-антитело у новорожденных и детей раннего возраста. Разработать мпкрометод выявления антител к бактериальншл антигенам (аллергенам), основанный на термсдинзотческих характеристиках реакции антиген-антитело.
-
Изучить влияние бактериальной сенсибилизации женщин с хроническими счагаш инфекции на иммунологические показатели их нсйсрскдень-тс.
-
Предложить комплекс ынкрометодов по обследованию новорожденных и детей раннего гозраста для выявления инфекционно-воспа-
лительных заболеваний, вызванны:: грамвслсжнтельной или грамотри-цательнон микройлорои.
-
Впервые установлено, что при инфекционнс-воспалительных заболеваниях новорожденных и детей раннего возраста измененные гранулоцити специфически взаимодействуют с аутоттаммачи микроорганизмов .
-
Впервые установлено, чтс в острый период инфекционно-воспалительных заболеваний, вызванных грамотрицагельной микрофлорой, возрастает количество измененных гранулоцитов, специфически взаимодействующих С Salmonella minnesotae R 595 И Esche-riiiia ooli, а при заболеваниях стафилококковой природт - со стафилококковой вакциной.
-
Впервые разработаны диагностические критерии показателя иммуноцитоприлилания с грамотрицательныш и грашоложительными микроорганизмами для диагностики инфекционнс-воспалительных заболеваний новорожденных и детей раннего возраста.
-
Проведена дифференциальная микрокалориметрия реакции антиген-антитело, изучена ее' термодинамика. На основе термодинамических характеристик иммунологической реакции ЕперЕые разработаны критерии, позволяющие выявлять антитела к бактериальным антигенам в микрообъемах крови.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Разработанные на основе проведенных исследований:
микрометод выявления антител к бактериальным антигенам (аллергенам) с помощью дифференциальной микрокалориметрии;
микрометод выявления сенсибилизации организма к патогенной и условно-патогенной.флоре, включая аутошгаммы (тест показатель иглілуноцитоприлипания) (А.с. В 1697007)
ЯЕляится достаточно информативными и реко?лендоЕаны для использования в качестве лабораторных тестев для выявления заболеваний, вызванных грамполокигельной и грамогрицательнои микрофлорой у новорожденных и детей раннего возраста.
Применение этих методов в комплексе с клиническими и микробиологическими исследованиями улучшило и ускорило постановку диагноза, что обеспечило более правильный выбор антибактериальной терапии и контроль за ее эффективностью. Результаты исследований легли в основу методических рекомендаций Минздрава СССР "Микро-метода определения активности шфекционнс-воспалительннх заболеваний новорожденных", І9Є7 г. Шкромегоды иммунодиагностики т-
фекционно-воспалительных заболеваний внедрены во 2 ДКБ г. Новосибирска. Имеются акты внедрения.
