Содержание к диссертации
Список сокращений 4
Ведение 6
ГЛАВА I. Обзор литературы 11
1.1. Распостраненность пищевой аллергии. Факторы риска
и механизмы развития пищевой аллергии 11
1.2. Пищевые аллергены, классификация, свойства 13
Пищевые аллергены животного происхождения 15
Пищевые аллергены растительного происхождения 17
Пищевые добавки 24
Перекрестные реакции 25
Классификация и особенности клинических проявлений
пищевой аллергии. Влияние пищевой аллергии на течение
и прогноз аллергических заболеваний 33
1.5. Современные проблемы диагностики и терапии
пищевой аллергии 35
Принципы диагностики 35
Принципы терапии 38
1.6. Субпопуляции Т-хелперов и их роль в регуляции
иммунного ответа 42
ГЛАВА П. Материалы и методы исследования 48
2.1. Исследуемые группы больных 48
Общеклиническое обследование 49
Аллергологическое обследование 49
Ведение пищевого дневника 50
Методы иммунологического обследования 52
Оценка экспрессии мРНК T-bet и GATA-3 (качественная реакция) 52
2.7. Оценка экспрессии мРНК ряда цитокинов (IL-2, 2Ra, 4, 5, 10,
12а, 12Ъ, TGFp, INFy, FOXP3) методом ПЦР в режиме
«реального времени» 55
2.8. Выделение мононуклеарных лейкоцитов и определение
содержания в них IL-4 и INFy 57
2.9. Применение Аллертеста для диагностики ГЗТ 58
2.10. Методы статистической обработки 60
ГЛАВА III. Результаты собственных наблюдений 61
Характеристика обследуемых групп 61
Результаты Аллертеста у больных ПА, ЛПА и ПН 68
Исследование уровней экспрессии цитокинов 71
Оценка экспрессии мРНК T-bet и GATA-3 73
Выделение мононуклеарных лейкоцитов и определение
содержания в них IL-4 и IFNy 73
ГЛАВА IV. Обсуждение полученных результатов 75
Выводы 85
Список литературы 87
СПИСОК СОКРАЩЕНИЙ
АБА - атопическая бронхиальная астма
АД - атопический дерматит
A3 - аллергические заболевания
АР - аллергический ринит
ВСД - вегето-сосудистая дистония
ГБС - гепато-билиарная система
ЖКТ - желудочно-кишечный тракт
МНПК - мононуклеары периферической крови
МонАТ - моноклональные антитела
НЦД - нейро-циркуляторная дистония
ОТ - обратная транскрипция
ИПА - истинная пищевая аллергия
ЛПА - ложная пищевая аллергия
ПКС - полная культуральная среда
ПН - пищевая непереносимость
ПЦР - полимеразная цепная реакция
EDTA - ethylenedinitrilotetraacetic acid (этилендиаминтетрауксусная кислота)
FITC - fluoresceine isothiocyanate (флюоресцеин-5-изотиоцианат)
GAPD - glyceraldehyde-3-phosphate dehydrogenase (глицеральдегид-3-
фосфат дегидрогеназа)
GATA-3 - транскрипционный фактор, ответственный за Тп2-фенотип
HPRT1 - hypoxanthine phosphoribosyltransferase (гипоксантин фосфорибо-
зилтрансфераза)
IL - interleukin (интерлейкин)
INPy - interferon-gamma (интерферон-у)
PBS - phosphate buffer saline (фосфатно-солевой буфер)
РЕ - phycoerythrin (фикоэритрин)
PHA - phytohemagglutinin (фитогемагглютинин)
PMA - phorbol-12-myristat-13-acetate (форбол-12-миристат-13-ацетат)
RANTES- хемокин, экспрессируемыи и секретируемый нормальными Т-клетками и регулируемый процессами активации (Regulated on Activation, Normal T-cell Express and Secreted chemokine)
TGFp - transforming growth factor-beta (трансформирующий фактор роста-(3)
ThO, Thl, Th2, Th3 - Т-хелперы 0, 1, 2 и 3 типа
Введение к работе
Актуальность темы. Несмотря на значительные успехи, достигнутые в изучении распространенности, особенностей спектра этиологически — значимых пищевых аллергенов механизмов формирования непереносимости пищевых продуктов у детей и взрослых, многие вопросы патогенеза, подходов к диагностике и терапии пищевой аллергии изучены недостаточно.
По последним данным сохраняется высокая распространенность пищевой аллергии, составляющая, в среднем - 10% среди детского населения и 2% среди взрослых.
В общей структуре аллергических заболеваний пищевая аллергия составляет около 5%. [Лусс Л.В., 2000-2006 гг., Балаболкин И.И. и соавт., 2005-2007 гг., Пампура А.Н., 2007г. и др.]
В широкой клинической практике приходится сталкиваться с серьёзными трудностями ранней диагностики и терапии пищевой аллергии, в связи с отсутствием специфических клинико-лабораторных маркёров аллергических реакций на пищу. Проблемы заключаются в том, что побочные реакции при употреблении пищевых продуктов могут быть обусловлены участием самых различных механизмов как аллергического, так и неаллергического характера. Например, это может быть следствием сенсибилизации к пищевым аллергенам, пищевым добавкам и/или примесям, содержащимся в пищевых продуктах при истинной пищевой аллергии (ИПА). Реакции на пищу могут развиваться и при различных патологиях, в частности: заболеваниях желудочно-кишечного тракта, гепатобилиарной, эндокринной системы и протекать без участия иммунологических механизмов, например, при ложной пищевой аллергии (ЛПА) и пищевой непереносимости (ПН).
В настоящее время известно, что ключевыми цитокинами, продуцируемыми Т-хелперными клетками типов Thl и Th2, являются IL-2, IL-4, IL-12, IL-10 и другие цитокины.
7 Тем не менее, изучение особенностей репертуара цитокинов IL-2, IL-4, IL-5, IL-10, IL-12, TGFp, INFy, FOXP3, GATA-3, T-bet при ИПА, ЛПА или псевдоаллергии, ПН, и их содержание при различных механизмах формирования непереносимости пищевых продуктов, является важным с позиции оценки характера воспалительной реакции, во многом и определяющей механизм формирования непереносимости к пище.
Естественно, что правильная оценка механизма развития реакций на пищевые продукты гарантирует адекватную терапию и профилактику пищевой аллергии, эффективность лечебно-профилактических мероприятий и обеспечит высокое качество жизни пациентов.
Цель и задачи исследования
Целью работы явилось изучение особенностей клинико-аллергологи-ческой характеристики и соотношения синтеза цитокинов ТЫ- и Th2-клетками при истинной и ложной пищевой аллергии.
Задачи исследования
Выявить распространенность истинной и ложной пищевой аллергии у больных с аллергопатологией.
Изучить особенности соматической патологии при истинной и ложной пищевой аллергии у больных с аллергопатологией.
Выявить особенности спектра этиологически значимых пищевых аллергенов при истинной пищевой аллергии у больных с аллергопатологией.
Представить аллергологическую характеристику истинной и ложной пищевой аллергии.
Выявить особенности спектра этиологически значимых пищевых продуктов при ложной пищевой аллергии у больных с аллергопатологией.
Выявить особенности клинического течения истинной и ложной пищевой аллергии у больных с аллергопатологией.
Изучить особенности соотношения синтеза цитокинов ТЫ- и Th2-клетками при истинной и ложной пищевой аллергии.
Научная новизна.
Впервые на большом клиническом материале проведено углубленное комплексное клинико-лабораторное, иммунологическое и аллергологическое обследование больных, страдающих пищевой аллергией, позволившие установить факторы риска и провоцирующие факторы развития истинной пищевой аллергии, ложной пищевой аллергии и пищевой непереносимости, определить характерные нарушения показателей иммунного ответа и особенностей клинического течения ПА, ЛПА и ПН.
Установлены особенности спектра этиологически значимых пищевых аллергенов при ИПА, ЛПА и ПН. Установлено снижение этиологической значимости сенсибилизации к белкам коровьего молока, свойственное детям раннего возраста, и повышение роли антигенов рыбы, морепродуктов, яичного белка и растительных пищевых аллергенов в формировании ИПА у взрослых.
Впервые выявлена тенденция к повышению уровня экспрессии IL-5 у больных ИПА по сравнению с группами пациентов ЛПА и здоровыми лицами.
Впервые отмечено повышение экспрессии GATA-3 у больных с ИПА в сравнении с больными ЛПА.
Впервые, используя Аллертест, установлено, что у 17,4% больных ИПА, выявлена аллергия к пищевым добавкам, протекающая по клеточно-опосредованному типу аллергических реакций.
Практическая значимость
На основании тщательного изучения и анализа результатов комплексного клинико-лабораторного, иммунологического и аллергологического исследования, получены важные для практического здравоохранения данные о
факторах риска и провоцирующих факторах развития ИПА, ЛПА и ПН, особенностях спектра пищевых продуктов при различных механизмах их непереносимости, особенностях клинических проявлений ИПА, ЛПА и ПН.
Установлено, что среди факторов риска и провоцирующих факторов развития ИПА, наряду с генетически детерминированной предрасположенностью к аллергии, очень важную роль имеют наличие сопутствующих заболеваний и характер питания. Установлено, что у 88% первые проявления ИПА отмечаются в раннем детстве, в то время как при ЛПА - преимущественно в подростковом периоде и у взрослых, а ПН - в более старшем возрасте и у лиц с сопутствующей патологией ЖКТ, печени и желчевыводящих путей, нервной и эндокринной системы.
Установлено, что клиника ИПА у взрослых, в отличие от детей, отличается многообразием проявлений и наличием, наряду с кожными симптомами (атопический дерматит, ангиоотек, генерализованная крапивница), респираторных проявлений: аллергического ринита (34,8%), бронхиальной астмы (21,7%), орального аллергического синдрома (21,7%), а также мигрени (2%) и др.
На основании тщательного анализа клинико-лабораторных, иммунологических и аллергологических показателей, установлены особенности ИПА у взрослых, характеризующиеся полисенсибилизацией и наличием перекрестных реакций между пищевыми, пыльцевыми и эпидермальными аллергенами.
Впервые внедрен в практику Аллертест, позволяющий выявлять аллергические реакции на пищевые добавки и примеси, содержащиеся в пищевых продуктах, протекающие по клеточно-опосредованному механизму.
Публикации по теме диссертации
По материалам диссертации опубликовано: 7 печатных работ. Материалы исследований доложены на VIII конгрессе «Современные проблемы аллергологии, иммунологии и иммунофармакологии», Москва, 2007 г.
10 Объем и структура диссертации
Диссертация изложена на 114 страницах машинописного текста, состоит из введения, обзора литературы, описания материалов и методов, результатов и обсуждения полученных данных, выводов, списка литературы, включающего 251 источник, в том числе 33 отечественных и 218 зарубежных. Работа содержит 11 таблиц, 10 рисунков, 1 схему.
