Введение к работе
АКТУАЛЬНОСТЬ ПРОБЛЕМЫ. Высокая частота ревматоидного артрита (РА) среди воспалительных заболеваний суставов,прогрессирующий характер течения,приводящий к ранней инвалидизацжи. больных и неудовлетворительные результаты его лечения обуславливают актуальность изучения механизмов аутоиммунитета и хронического ревматоидного воспаления.
Среди многообразия иммунных нарушений у больных РА наиболее типичным является избыточная продукция широкого спектра аутоантител (аутоАТ) и высокие уровни различных по составу иммунных комплексов (ИК).Эти'феномены обуславливают развитие и персистенцшэ воспаления при РА ( Насонов Е.Л.,1984,Сперанский А.И.,1984).
Присутствие в периферической крови (ПК),синовиальной жидкости (СЖ) и синовиальной ткани (СТ) больных РА избыточного количества аутоАТ и Ж является следствием поликлональной В-клеточной активации.Этот феномен является ключевым в патогенезе РА и лежит в основе многообразия патогенетических механизмов и клинических проявлений заболевания.Так,гиперактивация в большей степени выражена при серопозитивном.варианте РА, с более тякелым течением и быстрым лрогрессированием.
Есть основания предполагать,что активация В-лимфоцитов у больных РА опосредована дисфункцией регуляторних Т-клеток, моноцитов/макрофагов (Мц/Мф),нарушением продукции и рецепции многих медиаторов,контролирующих пролиферацию,дифференциров-ку и функции лимфоцитов (idpsky P.E.,l989.Petersen J.,1983)
Механизмы нарушений контроля пролиферации и дифференци-ровки В-лимфоцитов,их аутореактивных клонов у больных РА практически не изучены.
Исследования этих механизмов^позволят не только глубже понять патогенез хронического воспаления,но и разработать новые подходы эффективной иммуноактивной терапии РА,основанной на коррекции процессов, приводящих к пшерактивации В-лимфоцитов.
ЦЕЛЬ И ЗАДАЧИ ИССЛЕДОВАНИЯ. Целью настоящего исследования являлось изучение механизмов нарушения пролиферации В-лимфоцптов у больных с различными клиническими характеристиками РА.
3 соответствии с этим решались следующие задачи:
I.Изучить пролиферативную активность не стимулированных и стимулированных митогеном лаконоса (МІ) культур мояояуклє-аров (МНК) периферической крови больных РА с разными клиническими характеристиками.
2.Изучить влияние Мц и ряда их медиаторов на пролиферацию культур МНК и культур,обогащенных В-лимфоцитами от больных с разными вариантами заболевания.
3.Изучить влияние факторов синовиального экссудата (СЭ) от серопозитивных и серонегативных больных РА на пролиферацию культур,обогащениях В-лимфоцитами,здоровых людей.
4.Охарактеризовать функцию неспецифических Т-супрессоров (Тс),контролирующих пролиферацию В-лимфоцитов больных РА и изучить механизмы ее нарушения.
НАУЧНАЯ НОВИЗНА РЕЗУЛЬТАТОВ ИССЗДОВАШЙ.Впервые проведена комплексная оценка гуморальных и клеточных механизмов, контролирующих пролиферацию В-лимфоцитов больных РА.
Впервые показаны различия цитокин-опосредованной регуляции пролиферации В-лимфоцитов больных серопозитивныг и се-ронегативяым РА,характеризующиеся не только особенностями продукции факторов,контролирующих пролиферацию В-лимфоцитов при этих серологических вариантах болезни,но и изменением чувствительности к ним В-клеток больных.
Полученные данные свидетельствуют о различиях в иммуно-патогенезе серопозитивного и серонегативного.РА,определяющих своеобразие их клиники и течения,и требуют разработки новых подходов к избирательной иммунокоррекции,основанной на глубоком понимании механизмов В-клеточной активации.
Выявлено нарушение регуляции пролиферации В-лимфоцитов
МОНОЦИТаМИ,ОбуСЛОВЛеННОе НЄ ТОЛЬКО ГШерпрОДуКІВіеЙ І1ІЇ2 к
М-1,но и изменением чувствительности к этим цитокинам клеток-мишеней.
Впервые установлено, что культуры В-лимфоцитов больных РА имеют разную чувствительность к действшо интерферонов (ИФ) еС и Jb ; фактору некроза опухоли * -(Ш0О. В-лиьыо-цигы серонегативных больных сохраняют чувствительность к антипролиферативному действшо ИФ в сразнепии с серопозитивш-ми больными. В-лимфоциты серопозитивных больных высокочувствительны к действию Ш0е.
Впервые установлено, что СЭ-от серопозитивных больных II серонегатинных больных различается по способности изменять
пролиферации культур,обогащенных В-лимфоцитавд, здоровых людей. Показано,что образцы СЭ больных с високими титрами ревматоидного фактора (РФ) характеризуются преобладанием активности факторов, стимулирующих МЛ-индупдрованную пролифарапш В-лимфоцитов,тогда как в образцах СЭ-больных серонеґативнвл РА такого влияний на пролиферацию не выявлено.
Впервые охарактеризована функция- трех типов неспепифп-ческих Тс больных РА.ингибирующих МЛ-индуциррванную пролиферацию не только в аллогенной.но и в аутологичной тест-системе. Установлено,что снижение активности неспепифнческих Тс обусловлено угнетением продукции ими супрессорных факторов (СФ) и снижением чувствительности к ним клеток-мишеней.
ПРАКТИЧЕСКАЯ ЗНАЧИМОСТЬ РАБОТЫ. Обосновывается необходимость изучения "цитокиновой сети",регулирующей пролиферацию В-лимфоцитов больных серопозитивным РА как'одного пз ключевых звеньев патогенеза этого варианта болезни,ЕОИСка на этой основе новых подходов к иммуяокоррекции.
Примененные в работе методы определения чувствительности культур несепарированннх и сепарированных МНК к действЕП цитокинов могут быть апробированы как "нагрузочные" пробы для уточненій показаний к мопо- или комбинированной терашш синтетическими аналогами цитокинов.
Изменение уровня пролиферации обогащенных В-лзшфопптами культур здоровых лвдей под действием СЭ больных РА М02ЄЇ 6HTS рекомендовано для определения интегральной активности факторов ,контролирующих пролиферацию В-лимфоцитов.
Данные,полученные в исследованиях,используются при чтении лекций и проведении практических занятий-на курсе клинической иммунологии Новосибирского мединститута.
Г. Клинические особенности серопозитивного РА,в отлнчяэ от серонегативного,обусловлены своеобразием нммунопатогенеза, связанным,в частности, с нарушением соотношения активности цитокинов-регуляторов пролиферации' В-лимфоцитов,приводящим к накоплению и актийации этой популяции клеток.появлеяию.АТ разной специфичности и Ж разного состава.
2. У больных ^РА, чаще в группах с диагностическими титрами РФ, высокой активностью воспалительного процесса обнаруживаются изменения чувствительности В-лимфоцитов к
стимулирующим или ингибирующям влияниям на их пролиферацию таких цитокинов, как ШІ-І, ПГЕ2, №V , ИФ/S, Ш0CQ и восприятия, их Т-клеткамп-мише-нями. Изменения соотношения активности цитокинов,обеспечивающих стимуляцию или шгибицшо пролиферации 3-лимфоцитов, связаны не только с вариантом болезни, но имеют и индивидуальные различия.
3. В СЭ от больных серопозитнвныл РЛ преобладает активность факторов,стимулирующих пролиферацию обогащенной В-лю-фоцитами культуры здоровых людей, тогда как в Со от серопе-гативных больных проявляется оппозитное влияние на пролиферацию В-лимфоцитов.
АПРОБАЦИЯ РАБОТЫ И ПУБЖСАЦИИ. І.Іатєриалц диссертации доложены на конференции молодых ученых Урала и Сибири "Актуальные вопросы ревматологии" ( Свердловск,1990),Всесоюзном симпозиуме с мендународнш участием "Патогенез хронического воспаления" ( Новосибирск,1991) и ІУ Всесоюзном съезде ревматологов ( Минск,1991). Апробация работы состоялась на семинаре клинического отдела ИКИ СО АІ.Ш СССР 3 октября 1991 г.
По теме диссертации опубликовано 8 работ.
ОБЪЕМ И СТРУКТУРА ДИССЕРТАЦИИ, диссертация выполнена
в соответствии с планом НИР ИКИ СО АМН СССР,номер госреги
страции: №1.86.0/019693. Материалы изложены на стра
ницах машинописного текста. Диссертация состоит из введе
ния, обзора литературы, описания материалов и методов, ре
зультатов- исследований в четырех главах и их обсуждения,
заключения и выводов. Диссертация включает 27 таблиц и
14 рисунков. Список литературы включает 249 источников, из
них 38 работ отечественных авторов.
